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公开(公告)号:CN116694816A
公开(公告)日:2023-09-05
申请号:CN202210179759.5
申请日:2022-02-25
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种SARS‑CoV‑2、甲型流感病毒和乙型流感病毒核酸等温多重检测试剂及检测方法。本发明的检测方法包括:经特别设计优化的等温扩增引物,与酶切试剂进行偶联,从而建立一种检测试剂及检测方法。本发明具有多重、快速、便携的优势,弥补了等温检测特异性不高、多重检测困难的缺陷,可准确区分鉴别症状相似的SARS‑CoV‑2、甲型流感病毒和乙型流感病毒感染病例,为精准防控疫情提供有力支持。
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公开(公告)号:CN114561374B
公开(公告)日:2024-10-29
申请号:CN202210239388.5
申请日:2022-03-11
Applicant: 上海交通大学 , 交弘生物科技(上海)有限公司
IPC: C12N9/22 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明提供了嗜热核酸酶Argonaute(PfAgo)蛋白的突变体及其制备方法和应用。本发明所述Ago突变体的酶催化活性较野生型显著提高,具有更好的高温热稳定性,并且突变体在靶标DNA底物选择性上对于野生和突变碱基具有更好的区分能力,这提高了其在核酸检测技术领域中的应用潜力,同时也为开发新的基因操作工具奠定了基础。
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公开(公告)号:CN113201578A
公开(公告)日:2021-08-03
申请号:CN202110474666.0
申请日:2021-04-29
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/6816 , C12Q1/6806 , C12N9/22 , C12N15/55
Abstract: 本发明提供了一种新型高温Argonaute蛋白的表征及应用。具体地,本发明提供了一种核酸切割体系,其特征在于,所述核酸切割体系包括:(a)向导DNA(gDNA);(b)可编程核酸内切酶Argonaute(Ago);和(c)任选的报告核酸,其中若所述报告核酸被剪切,所述的剪切是可以被检测出的。并且,本发明还提供了基于本发明的可编程核酸内切酶TpsAgo的一种富集和检测低丰度目标核酸的体系和方法。本发明所提供的检测体系和方法能够特异性地针对低丰度的核酸进行有效富集和高效检测,并且本发明的可编程核酸内切酶TpsAgo具有强大的基因操作潜力。
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公开(公告)号:CN117007789A
公开(公告)日:2023-11-07
申请号:CN202310734833.X
申请日:2023-06-20
Applicant: 交弘生物科技(上海)有限公司 , 上海交通大学
IPC: G01N33/53 , G01N33/543 , G01N33/577 , G01N33/58 , C12Q1/686 , G01N33/569 , C12Q1/70 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于Argonaute的多重免疫层析核酸检测方法及应用,包括步骤:一,对核酸样品进行等温多重扩增;二,在扩增产物加入Argonaute、向导ssDNA和探针进行剪切;三,将剪切产物滴加于免疫层析侧流片,所述试纸设有若干条检测线和质控线,观察检测线和质控线的颜色,确定检测结果。本发明采用Argonaute级联剪切与免疫层析相结合的方法,通过特别的探针修饰和层析侧流片设计,实现了一条免疫层析侧流片的多重核酸检测,并应用于SARS‑CoV‑2、甲型流感、非洲猪瘟和Actin‑β基因检测中,相比于已有技术灵敏度更高、特异性更强,且操作简便,无仪器局限性,有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN113201578B
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202110474666.0
申请日:2021-04-29
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/6816 , C12Q1/6806 , C12N9/22 , C12N15/55
Abstract: 本发明提供了一种新型高温Argonaute蛋白的表征及应用。具体地,本发明提供了一种核酸切割体系,其特征在于,所述核酸切割体系包括:(a)向导DNA(gDNA);(b)可编程核酸内切酶Argonaute(Ago);和(c)任选的报告核酸,其中若所述报告核酸被剪切,所述的剪切是可以被检测出的。并且,本发明还提供了基于本发明的可编程核酸内切酶TpsAgo的一种富集和检测低丰度目标核酸的体系和方法。本发明所提供的检测体系和方法能够特异性地针对低丰度的核酸进行有效富集和高效检测,并且本发明的可编程核酸内切酶TpsAgo具有强大的基因操作潜力。
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公开(公告)号:CN119570979A
公开(公告)日:2025-03-07
申请号:CN202311154393.7
申请日:2023-09-07
Applicant: 交弘生物科技(上海)有限公司 , 上海交通大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种扩增与Argonaute酶兼容的一管式基因编辑核酸检测方法及应用,包括固定化核酸酶的制备,扩增‑酶切兼容体系组分配方,扩增‑酶切一管式反应程序以及该方法在单重或多重核酸检测中的应用。本发明采用Argonaute级联剪切与酶固定化包埋结合的方法,结合Argonaute高温耐受特点,通过温控释放核酸酶活性,实现了扩增无核酸酶干扰,酶切热启动释放活性的一管式检测流程,避免了现有基因编辑核酸检测技术普遍存在的核酸污染、操作繁琐等问题,并且易于保存和运输,在现场及时检测和居家核酸自检中具有重要的应用潜力。
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公开(公告)号:CN111926117A
公开(公告)日:2020-11-13
申请号:CN202010833690.4
申请日:2020-08-18
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明提供了SARS-CoV-2病毒核酸等温快速检测试剂盒及检测方法。本发明的检测方法包括:(a)提供一含靶标核酸分子的待检测的样本;(b)将所述待检测的样本与切割试剂或含所述切割试剂的切割缓冲液进行混合,从而形成一检测体系,其中,所述的切割试剂包括:2个向导ssDNA、基因编辑酶(Ago)、和第一报告核酸分子,所述第一报告核酸分子带有荧光基团和淬灭基团,并且,所述的2个向导ssDNA之间彼此相邻;和(c)对所述检测体系进行荧光检测,从而获得荧光信号值,其中,所述检测体系中检测到荧光信号值,则表示所述样本中存在靶标核酸分子;而所述检测体系中没有检测到荧光信号值,则表示所述样本中不存在靶标核酸分子。本发明的方法可高灵敏度、准确性的检测靶标核酸分子。
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公开(公告)号:CN111548918A
公开(公告)日:2020-08-18
申请号:CN202010404845.2
申请日:2020-05-14
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种能实现多体系兼容的全封闭一体式反应管;包括管体和位于顶部可以开启的管盖,在管体中部设有温变相固体隔离层;所述管体被温变相固体隔离层分割形成第一腔室和第二腔室;所述温变相固体隔离层中间设有加样孔,所述加样孔为倒置的圆台体通道。温变相固体隔离层采用复合石蜡隔离层,随着温度的升高,温变相固体隔离层熔化,第一腔室和第二腔室的反应体系混合。本发明操作便捷,制作简单,隔离层性质稳定,兼容性强,适合于多体系的一管式反应。
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公开(公告)号:CN114561374A
公开(公告)日:2022-05-31
申请号:CN202210239388.5
申请日:2022-03-11
Applicant: 上海交通大学 , 交弘生物科技(上海)有限公司
IPC: C12N9/22 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明提供了嗜热核酸酶Argonaute(PfAgo)蛋白的突变体及其制备方法和应用。本发明所述Ago突变体的酶催化活性较野生型显著提高,具有更好的高温热稳定性,并且突变体在靶标DNA底物选择性上对于野生和突变碱基具有更好的区分能力,这提高了其在核酸检测技术领域中的应用潜力,同时也为开发新的基因操作工具奠定了基础。
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