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公开(公告)号：CN1276087C
公开(公告)日：2006-09-20
申请号：CN200510049187.5
申请日：2005-03-07
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种生物合成γ-氨基丁酸的方法，其特征在于，保藏编号为：CGMCC NO.1306的短乳杆菌(Lactobacillus brevis)，经琼脂斜面培养基活化后，转接于GYP种子培养基或MRS种子培养基，培养10～30小时后，以0.5%～5%的接种量接种于GYP或MRS发酵培养基中，在25℃～35℃下静置培养48h～120h，即得含菌体的发酵液，菌体离心分离收集；离心后的菌体再以灭过菌的去离子水洗涤，取0.25～2g湿菌体，悬浮于15～50mL的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲体系中，L-谷氨酸钠含量为5mM～60mM，反应1～10小时，反应液离心即得含γ-氨基丁酸的溶液。本发明生产成本低、反应条件温和、环境污染小、方法简单、易于操作，生产效率高，并且产品纯度较高，减轻了后续分离纯化工艺。
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公开(公告)号：CN1268750C
公开(公告)日：2006-08-09
申请号：CN200410089174.6
申请日：2004-11-29
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种能催化吲哚生成靛蓝的P450BM-3变体基因及其用途。它通过易错PCR技术介导的随机突变，筛选获得的P450BM-3变体基因，该P450BM-3变体基因中的第39位的异亮氨酸(Ile)的密码子ATC突变为缬氨酸(Val)的密码子GTC，所得到的P450BM-3变体基因(Ile39→Val)P450BM-3，该变体基因序列为SEQ ID No.1核苷酸序列，并且编码细胞色素P450BM-3的单加氧酶。P450BM-3变体基因表达得到的P450BM-3变体蛋白酶能催化吲哚生成染料靛蓝。本发明创造了一种对吲哚具有更高催化活力的P450BM-3变体基因，其突变位点为Ile39→Val，该变体基因表达的突变酶能够催化吲哚生成染料靛蓝，与R.D.Schmid领导的科研小组获得的具有三个突变位点P450BM-3(Phe87Val，Leu188Gln，Ala74Gly)变体酶相比较，在测定的一例中活性提高了1.2-1.4倍，为生物转化生产染料靛蓝提供了广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN1683545A
公开(公告)日：2005-10-19
申请号：CN200510049189.4
申请日：2005-03-07
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种控制pH发酵生产γ－氨基丁酸的方法。保藏编号为：CGMCC NO.1306的短乳杆菌(Lactobacillus brevis)，经琼脂斜面培养基活化后，转接于GYP种子培养基中，培养25～35小时后，以5～10％的接种量接种于发酵罐中，发酵罐装液量为1～3L，搅拌转速为50～150r/min，在30℃下静置培养，对其进行pH控制发酵，发酵培养约25～40小时，待菌体生长进入稳定期，pH值回升后，连续流加1～3mol/L的盐酸，发酵培养基pH控制在5.0～5.6，继续培养约40～60h，即得含γ－氨基丁酸的发酵液。本发明的优点：在于通过在稳定期控制pH发酵，GABA的产量达到30g/L，工艺简单，环境污染小、操作方便，GABA产量高。
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公开(公告)号：CN1637144A
公开(公告)日：2005-07-13
申请号：CN200410089175.0
申请日：2004-11-29
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种能催化吲哚生成靛蓝的P450BM－3Glu435Asp变体基因及其用途。它通过易错PCR技术介导的随机突变，筛选获得的P450BM－3变体基因，该P450BM－3基因中的第435位的谷氨酸的密码子GAA突变为天冬氨酸的密码子GAT，所得到的P450BM－3变体基因(Glu435→Asp)P450BM－3该变体基因序列为SEQ ID No.1核苷酸序列，并且编码细胞色素P450BM－3的单加氧酶。能催化吲哚生成靛蓝的P450BM－3Glu435Asp变体基因，表达所得到P450BM－3变体蛋白酶能催化吲哚生成染料靛蓝。本发明创造了一种对吲哚具有更高催化活力的P450BM－3变体基因，其突变位点为Glu435→Asp，该变体基因表达的突变酶能构催化吲哚生成染料靛蓝，与R.D.Schmid领导的科研小组获得的具有三个突变位点的P450BM－3(Phe87Val，Leu188Gln，Ala74Gly)变体酶相比较，在测定的一例中活性提高了1.5－1.7倍，为生物转化生产染料靛蓝提供了广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN1637141A
公开(公告)日：2005-07-13
申请号：CN200410089167.6
申请日：2004-11-29
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM－3单加氧酶变体基因及其用途。它通过易错PCR技术介导的随机突变，筛选获得的P450BM－3变体基因，该P450BM－3基因中的第168位的天冬氨酸的密码子GAT突变为天冬酰胺的密码子AAT，第225位的丙氨酸的密码子GCA突变为缬氨酸的密码子GTA，将第440位赖氨酸的密码子AAA突变为天冬酰胺密码子AAT所得到的P450BM－3变体基因(Asp168→Asn，Ala225→Val，Lys440→Asn)P450BM－3。该变体基因序列为SEQ ID No.1核苷酸序列，并且编码细胞色素P450BM－3的单加氧酶。本发明创造了一种对吲哚具有更高催化活力的P450BM－3变体基因，该变体基因表达的突变酶能构催化吲哚生成染料靛蓝，与R.D.Schmid领导的科研小组获得的具有三个突变位点的P450BM－3(Phe87Val，Leu188Gln，Ala74Gly)变体酶相比较，在测定的一例中活性提高了1.9－2.4倍，为生物转化生产染料靛蓝提供了广阔的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107312787A
公开(公告)日：2017-11-03
申请号：CN201710586367.X
申请日：2017-07-18
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种融合蛋白基因、工程菌及其在制备9α-羟基-雄烯二酮中的应用，其中，所述融合蛋白基因包括编码3-甾酮-9α-羟基化酶的基因和编码细胞色素P450 BM-3酶中黄素域的基因。本发明将3-甾酮-9α-羟基化酶在大肠杆菌中异源表达，并通过基因重组技术，将3-甾酮-9α-羟基化酶与细胞色素P450 BM-3酶的黄素域进行融合表达，得到融合蛋白KshA-P450，并使用含有该融合蛋白的重组工程菌催化底物雄烯二酮制备9α-羟基-雄烯二酮，不仅提高了比活力，同时也提高了转化率。
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公开(公告)号：CN107177642A
公开(公告)日：2017-09-19
申请号：CN201710438866.4
申请日：2017-06-12
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种咪唑‑4‑乙酸的生物合成方法，该方法包括以下步骤：以L‑组氨酸为底物，在膜联L‑氨基酸脱氨酶的催化下，进行脱氨反应，得到含有中间产物3‑(4‑咪唑)‑2‑氧丙酸的反应液；向所述反应液中加入过氧化氢溶液，进行反应，反应结束后，得到咪唑‑4‑乙酸。本发明方法步骤简单，反应条件温和，原料来源广泛、生物催化剂易于制备、设备要求低，底物转化率高，且不需要使用有机溶剂和有毒试剂，相对于现有的化学法具有高效、成本低和环境友好的特点。
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公开(公告)号：CN106754479A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611053173.5
申请日：2016-11-24
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
IPC: C12N1/20 , A61K35/747 , A61P19/06 , A23L33/135 , C12R1/225
Abstract: 本发明公开了一种弯曲乳杆菌及其应用，该菌株被命名为弯曲乳杆菌(Lactobacillus curvatus)5‑1，保藏号为CGMCC No.12891。该菌株具有高效降解嘌呤核苷的能力，同时可以耐受人体正常条件下的酸性环境和胆盐浓度，可以在肠道内分解摄入食物中的嘌呤核苷，从而减少小肠对嘌呤核苷的吸收。因此弯曲乳杆菌(Lactobacillus curvatus)5‑1是开发辅助治疗高尿酸血症的微生态菌剂的良好菌株。
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公开(公告)号：CN105851200A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610256480.7
申请日：2016-04-22
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
IPC: A23B4/20 , A23L3/3562 , A23L3/3472 , A23L3/3481
CPC classification number: A23B4/20 , A23L3/3472 , A23L3/3481 , A23L3/3562 , A23V2002/00 , A23V2200/10 , A23V2250/2112 , A23V2250/2042 , A23V2250/55 , A23V2250/60
Abstract: 本发明涉及一种水产品天然生物保鲜剂，按重量份数计由以下成分组成：硫酸软骨素寡糖16～24份，抗氧化肽35～40份，姜黄提取物41～45份，除菌水300～450份；还涉及该生物保鲜剂的制备方法和在水产品保鲜中的应用。本发明中的生物保鲜剂无毒、无残留、低成本，可有效避免水产品脂肪、蛋白质等不被氧化破坏，并保持水产品鲜亮的色泽；同时，充分利用姜黄提取物的广谱抗菌活性，防止各种水产品常见菌在水产品中保藏过程中的滋生和繁殖，从而对水产品起到有效的保鲜作用，显著延长水产品的保鲜期。此外，该保鲜剂的制备过程中，硫酸软骨素寡糖和抗氧化肽均以水产品加工副产物为原料，可降低生产成本，提升水产品加工的产值，改善环境，具有显著的社会效益。
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公开(公告)号：CN104928342A
公开(公告)日：2015-09-23
申请号：CN201510151242.5
申请日：2015-03-31
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种制备S-腺苷蛋氨酸和D-蛋氨酸的方法，该方法包括：以D/L-蛋氨酸为原料，通过发酵制得S-腺苷蛋氨酸，从菌体细胞中分离得到S-腺苷蛋氨酸，从发酵液中分离得到D-蛋氨酸。本发明方法以价格低廉的D/L-蛋氨酸为原料，采用包含S-腺苷甲硫氨酸合成酶的菌株进行发酵，使L-蛋氨酸在菌体细胞内与ATP反应生成S-腺苷蛋氨酸，通过细胞膜将S-腺苷蛋氨酸与D-蛋氨酸分隔开来，再通过离心分离及离子交换等分离方式，将S-腺苷蛋氨酸和D-蛋氨酸分别分离出来，该方法不仅实现了S-腺苷蛋氨酸和D-蛋氨酸的同步生产，还使D-蛋氨酸得到回收。
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