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公开(公告)号：CN105104168B
公开(公告)日：2017-08-01
申请号：CN201510483098.5
申请日：2015-08-07
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: A01H1/02
Abstract: 本发明公开了一种亲本播始历期相近的杂交水稻选育方法，属于杂交水稻的选育领域。本发明杂交水稻选育方法，以播始历期相近、遗传距离较远的不同水稻亲本改良水稻不育系和恢复系，通过在不同生态环境条件下分期播种，获得播始历期相近、农艺性状稳定的不育系和恢复系，然后测交，种植测交F1代，选择性状优良的杂交组合，即为亲本生育期相近的杂交水稻。本发明方法保证父本与母本同期播种时花期相遇，提高制种的可靠度；同时也有利于田间操作机械化，减少对劳动力的依赖，节约成本，提高制种效率。
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公开(公告)号：CN104046636B
公开(公告)日：2017-03-15
申请号：CN201410276408.1
申请日：2014-06-19
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种密码子植物化改造的PMI(phosphomannose isomerase，磷酸甘露糖异构酶)基因，本发明利用水稻优化密码子设计合成了PMI基因。并且本发明提供一种表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在遗传转化方面的应用。本发明利用改造的PMI基因构建植物表达载体，以甘露糖为筛选剂，将外源基因导入水稻细胞中。本发明实现了水稻的高效遗传转化，这是因为经过密码子植物化改造的plant PMI的转化效率显著提高。
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公开(公告)号：CN103993038B
公开(公告)日：2017-01-18
申请号：CN201410245313.3
申请日：2014-06-04
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种利用PMI(phosphomannose isomerase，磷酸甘露糖异构酶)筛选标记将外源基因导入闭颖授粉籼稻的方法。具体而言，本发明通过含有pCAMBIA1381-PMI载体的农杆菌菌株EHA105介导，以甘露糖为筛选剂，将外源基因导入到闭颖授粉的籼稻品种9m90中。导入结束后，通过PCR检测鉴定，证实外源基因已导入9m90中。该方法成功实现了闭颖授粉的籼稻品种的遗传转化，且无需使用抗生素或除草剂筛选，在加快性状改良过程同时，避免花粉外传导致的基因漂移，提高了环境友好程度。
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公开(公告)号：CN103981214B
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201410235525.3
申请日：2014-05-28
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种将外源基因导入粳稻品种8m30的水稻细胞的方法。具体地讲，本发明是通过农杆菌介导，将外源基因导入到闭颖授粉的粳稻品种8m30中。在遗传转化过程中，本发明采用了特制的培养基以及比常规介导方法更好地转化方式。通过PCR检测鉴定，表明外源基因已导入8m30中。该方法成功实现了闭颖授粉的粳稻品种的遗传转化，在加快性状改良过程同时，可避免花粉外传导致的基因漂移。
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公开(公告)号：CN104017821B
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201410209304.9
申请日：2014-05-16
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明涉及一种定向编辑颜色决定基因OsCHI创制褐壳水稻材料的方法，包含以下步骤：在颖壳颜色决定基因OsCHI外显子区选取靶标片段并构建植物CRISPR/Cas9打靶重组载体，将该重组载体导入水稻细胞并再生成苗，在载体中的表达框的作用下对水稻细胞进行剪切，触发水稻细胞DNA的自我修复功能。再通过对再生株系基因组目标片段的测序，获取携带两个等位OsCHI基因同时发生功能缺失突变的株系，经过颖壳颜色鉴定，即为所创制的褐壳水稻材料。实验表明，本方法可利用颖壳颜色决定基因OsCHI快速创制褐壳水稻材料。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105002176A
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201510547897.4
申请日：2015-08-28
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种用于水稻温敏不育基因tms5的功能标记、利用该功能标记检验样品是否为含有tms5基因的方法、利用该功能标记基因判断两系温敏水稻的种子纯度的方法以及其在培育不育系中的应用。本发明根据水稻tms5基因突变位点序列，在PCR引物中引入错配碱基，使含有tms5基因(突变型)的水稻PCR扩增产物出现一个限制性内切酶Rsa I的酶切位点，而不含有tms5基因(野生型)的水稻PCR产物则没有这一酶切位点。通过Rsa I酶切PCR产物，可将含有tms5基因的水稻PCR扩增产物酶切成两个片段，而不含的却无法被切开，从而进行区分。本发明采用直接酶切tms5扩增产物的设计，与前人相比，一方面简化了检测流程，另一方面也避免了假阳性结果的出现。
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公开(公告)号：CN104004782A
公开(公告)日：2014-08-27
申请号：CN201410209121.7
申请日：2014-05-16
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明涉及一种延长水稻生育期的育种方法，包含以下步骤：在水稻生育期决定基因Ehd3外显子区选取靶标片段并构建植物CRISPR/Cas9打靶重组载体，导入水稻细胞并再生成苗；利用载体中的表达框实现对水稻细胞中Ehd3外显子区DNA的剪切，从而引起水稻细胞的自我修复；通过对再生株系基因组目标片段的测序，获取携带两个等位Ehd3基因同时发生功能缺失突变的株系，经过表型鉴定，确认再生植株生育期的延长。实验表明，本方法可快速获得生育期延长的水稻材料。
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公开(公告)号：CN103993039A
公开(公告)日：2014-08-20
申请号：CN201410245505.4
申请日：2014-06-04
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种利用PMI(phosphomannose isomerase，磷酸甘露糖异构酶)筛选标记将外源基因导入闭颖授粉粳稻的方法。具体而言，本发明通过含有pCAMBIA1381-PMI载体的农杆菌菌株EHA105介导，以甘露糖为筛选剂，将外源基因导入到闭颖授粉的粳稻品种8m30中。通过PCR检测鉴定，表明外源基因已导入8m30中。该方法成功实现了闭颖授粉的粳稻品种的遗传转化，且无需使用抗生素或除草剂筛选，在加快性状改良过程同时，避免花粉外传导致的基因漂移，提高了环境友好程度。
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公开(公告)号：CN103993038A
公开(公告)日：2014-08-20
申请号：CN201410245313.3
申请日：2014-06-04
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种利用PMI(phosphomannose isomerase，磷酸甘露糖异构酶)筛选标记将外源基因导入闭颖授粉籼稻的方法。具体而言，本发明通过含有pCAMBIA1381-PMI载体的农杆菌菌株EHA105介导，以甘露糖为筛选剂，将外源基因导入到闭颖授粉的籼稻品种9m90中。导入结束后，通过PCR检测鉴定，证实外源基因已导入9m90中。该方法成功实现了闭颖授粉的籼稻品种的遗传转化，且无需使用抗生素或除草剂筛选，在加快性状改良过程同时，避免花粉外传导致的基因漂移，提高了环境友好程度。
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公开(公告)号：CN103981215A
公开(公告)日：2014-08-13
申请号：CN201410225911.4
申请日：2014-05-23
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于基因工程的骨干质粒载体，所述骨干质粒载体中，向导RNA表达框和Cas9核酸酶表达框位于同一双元载体中，向导RNA表达框由水稻U6启动子，壮观霉素抗性基因、人工合成的sgRNA骨架序列和Poly-T终止子依次构成；Cas9核酸酶表达框由ZmUBI启动子，水稻偏好密码子改造后的Cas9编码序列和35s终止子依次构成。本发明还提供了利用所述质粒载体构建的含有靶标序列的重组载体，及其在水稻基因打靶中的应用。
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