公开(公告)号：CN102174561B

公开(公告)日：2012-11-14

申请号：CN201110008942.0

申请日：2011-02-27

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王丕武 ,  杜娟 ,  付永平

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  A01H5/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种大豆胰蛋白酶抑制剂KTi和凝集素SBA双价RNAi表达载体，它是从大豆籽粒中克隆了大豆胰蛋白酶抑制剂KTi和凝集素SBA基因，用绿色荧光蛋白GFP作为中间片段，构建了大茎环结构的KTi和SBA双价RNAi表达载体，以植物表达载体pCAMBIA3301为基础，用大豆种子特异性启动子7αP，并插入大茎环结构的KTi和SBA双干扰元件，获得了重组表达载体pCAMBIA3301-7αP-SBAF-KTiF-GFP-KTiZ-SBAZ，通过遗传转化，获得的转基因大豆品种的胰蛋白酶抑制剂活力平均降低了83％，凝集素活性也有大幅度降低，从而降低了饲料加工成本，期望为畜牧业增加更大的经济效益。

公开(公告)号：CN102703467A

公开(公告)日：2012-10-03

申请号：CN201210135776.5

申请日：2012-05-04

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王丕武 ,  宋冰 ,  付永平 ,  洪洋 ,  晏佳琳 ,  李翠 ,  崔程程 ,  邢飞 ,  王贺 ,  张卓 ,  李勃 ,  王鹏 ,  马建 ,  杜鹃 ,  王丹

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/82 ,  C07K14/415 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明公开了大豆锌指蛋白基因STF-2，是大豆中新发现的与干旱相关的C2H2型锌指蛋白基因。经实验表明，STF-2编码的蛋白能够定位到细胞核中，该基因过量表达后能够明显提高转基因植物的抗旱性，具有提高植物综合耐逆性的功能，本发明的基因来源于大豆，具有适合于大豆等双子叶植物的优化密码子，其基因工程受体主要适合于双子叶植物的大豆、烟草、棉花等，此外也适合于水稻、小麦、玉米等单子叶植物。

公开(公告)号：CN102260704A

公开(公告)日：2011-11-30

申请号：CN201110151145.8

申请日：2011-06-08

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 付玉芹 ,  王丕武 ,  李鲁华 ,  吕长利

IPC: C12N15/82 ,  A01H4/00 ,  A01H5/00

Abstract: 基于二氧化硅纳米粒子作为基因载体的植物转基因方法，包括基因枪和超声波两种转化方法。将不同尺寸的硅纳米粒子以多聚赖氨酸(PLL)进行表面修饰，构建纳米基因载体，修饰后的纳米粒子能够通过静电作用有效地与基因结合，形成二氧化硅纳米粒子-基因复合物，分别通过基因枪法和超声波法转化植物受体材料，成功地实现了外源基因在植物细胞中的高效稳定表达。本发明方法具有操作简单、价格低廉、转化效率高、转化材料不受植物种属类型、组织器官类型限制。本发明方法为二氧化硅纳米基因载体在植物转基因中的广泛应用奠定了良好的基础。

公开(公告)号：CN102174561A

公开(公告)日：2011-09-07

申请号：CN201110008942.0

申请日：2011-02-27

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王丕武 ,  杜娟 ,  付永平

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  A01H5/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种大豆胰蛋白酶抑制剂KTi和凝集素SBA双价RNAi表达载体，它是从大豆籽粒中克隆了大豆胰蛋白酶抑制剂KTi和凝集素SBA基因，用绿色荧光蛋白GFP作为中间片段，构建了大茎环结构的KTi和SBA双价RNAi表达载体，以植物表达载体pCAMBIA3301为基础，用大豆种子特异性启动子7αP，并插入大茎环结构的KTi和SBA双干扰元件，获得了重组表达载体pCAMBIA3301-7αP-SBAF-KTiF-GFP-KTiZ-SBAZ，通过遗传转化，获得的转基因大豆品种的胰蛋白酶抑制剂活力平均降低了83％，凝集素活性也有大幅度降低，从而降低了饲料加工成本，期望为畜牧业增加更大的经济效益。

公开(公告)号：CN101805718A

公开(公告)日：2010-08-18

申请号：CN201010141053.7

申请日：2010-03-31

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王丕武 ,  马超 ,  曲静 ,  付永平 ,  马建

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/56 ,  C12N15/74 ,  C12N9/42 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开一种可分泌表达黑曲霉木聚糖酶的食品级重组乳酸乳球菌及制法，菌株中含有表达载体pNZS-XYNB，所述的表达载体pNZS-XYNB是在载体pNZ8149中加入了以下元件：乳酸乳球菌MG1363的Usp45信号肽基因SPusp45序列；黑曲霉木聚糖酶B的成熟肽编码序列XYNB。本发明扩增出已知的黑曲霉木聚糖酶基因的成熟肽编码序列，将其与载体pNZS进行连接，通过电转化进入宿主菌乳酸乳球菌NZ3900细胞中，在nisin的诱导下进行表达，经SDS-PAGE分析和酶活检测证明，本发明克隆的黑曲霉木聚糖酶基因在工程菌中可以分泌表达，具有降解木聚糖的活性。

公开(公告)号：CN101012448A

公开(公告)日：2007-08-08

申请号：CN200610163263.X

申请日：2006-12-15

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王丕武 ,  曲同宝 ,  关淑艳 ,  曲静

IPC: C12N5/04 ,  A01H4/00

Abstract: 本发明涉及一种羊草耐盐体细胞突变体筛选方法，属于羊草基因工程和遗传育种领域。包括成熟胚诱导愈伤组织再生，体细胞突变体筛选体系的建立，获得耐盐试管苗。优点在于以羊草成熟种子为外植体，筛选的培养基能够高效诱导羊草成熟胚形成愈伤组织并且能够高效再生；该方法操作简便，效果好，适应性广，利用该方法改良羊草品种具有时间短、效率高等特点，培育一个抗盐碱新品种比常规育种方法能提前3～4年完成。

公开(公告)号：CN1179633C

公开(公告)日：2004-12-15

申请号：CN01113922.6

申请日：2001-04-29

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王丕武 ,  张君 ,  张晓玲 ,  祁新

IPC: A01H1/02

Abstract: 玉米自交系花粉管通道转基因改良方法。外源目的基因的导入在玉米自交后6～8小时内进行，将雌穗花丝全部剪去，在切口处滴注100～300微升外源目的基因DNA液，重新套上纸袋，做好记载。将收获的种子灭菌后置于培养基上发芽生长，对幼苗进行多聚酶链式反应检测和分子杂交分析，再对转化后代进行自交纯化和农艺性状鉴定，培养出转基因玉米自交系。本发明提供了一种简便、经济、有效的玉米自交系转基因改良方法，适用于各种基因型的转化，具有转化效率高、改良时间短等优点。

公开(公告)号：CN1383715A

公开(公告)日：2002-12-11

申请号：CN01113922.6

申请日：2001-04-29

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王丕武 ,  张君 ,  张晓玲 ,  祁新

IPC: A01H1/02

Abstract: 玉米自交系花粉管通道转基因改良技术。外源目的基因的导入在玉米自交后6～8小时内进行,将雌穗花丝全部剪去,在切口处滴注100～300微升外源目的基因DNA液,重新套上纸袋,做好记载。将收获的种子灭菌后置于培养基上发芽生长,对幼苗进行多聚酶链式反应检测和分子杂交分析,再对转化后代进行自交纯化和农艺性状鉴定,培养出转基因玉米自交系。本发明提供了一种简便、经济、有效的玉米自交系转基因改良方法,适用于各种基因型的转化,具有转化效率高、改良时间短等优点。