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公开(公告)号:CN108866008A
公开(公告)日:2018-11-23
申请号:CN201810680288.X
申请日:2018-06-27
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了抗锦鲤疱疹病毒的单克隆抗体制备方法及其应用,本发明制备的抗锦鲤疱疹病毒的单克隆抗体是由保藏编号为CCTCC NO:C201887的小鼠杂交瘤细胞株分泌产生的,单克隆抗体的效价为1:1.28×105;杂交瘤细胞株活性高,可识别锦鲤疱疹病毒结构蛋白,特异性强。并在此的基础上建立了检测锦鲤疱疹病毒的夹心ELISA检测方法,其最低检测浓度为3.923ng/mL,利用上述单克隆抗体建立了检测锦鲤疱疹病毒的间接夹心ELISA试剂盒,可用于大规模锦鲤疱疹病毒的检测,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN106967841A
公开(公告)日:2017-07-21
申请号:CN201610624854.6
申请日:2016-07-29
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
CPC classification number: C12Q1/705 , C12Q1/6869 , C12Q2531/113 , C12Q2565/301 , C12Q2535/122
Abstract: 本发明公开了基于焦磷酸测序的鲤疱疹病毒3型检测试剂盒。本发明所提供的基于焦磷酸测序的鲤疱疹病毒3型检测试剂盒,依赖于鲤疱疹病毒3型指纹序列,所述鲤疱疹病毒3型指纹序列为序列表中SEQ ID No.1的第2355‑2389位核苷酸;所述试剂盒包括鲤疱疹病毒3型指纹序列的测序引物和扩增鲤疱疹病毒3型指纹序列的引物对;所述测序引物为序列表中SEQ ID No.4所示的单链DNA;所述扩增鲤疱疹病毒3型指纹序列的引物对由序列表中SEQ ID No.2所示的单链DNA和SEQ ID No.3所示的单链DNA组成。
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公开(公告)号:CN105087491A
公开(公告)日:2015-11-25
申请号:CN201510531300.7
申请日:2015-08-26
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种锦鲤脑细胞系的构建方法及其应用,将锦鲤脑组织先放入含胶原酶和胰蛋白酶消化液A中进行消化,收集细胞,再加入含EDTA-4Na的消化液B中进行消化,收集消化后的细胞进行原代培养和传代培养即可获得锦鲤脑细胞系;本发明针对锦鲤脑组织细胞的特征,采用胶原酶和胰蛋白酶联合消化法分离脑组织细胞,进行原代培养,继而成功构建了锦鲤脑细胞系,已连续传至100代以上,可提供大量的锦鲤脑来源细胞,且细胞能维持良好的生长状态,可以对其进行冷冻保存。本发明锦鲤脑细胞系对锦鲤疱疹病毒具有敏感性,接毒后均出现细胞病变,电镜观察可以发现增殖的病毒粒子,本发明细胞系可以直接应用于病原特性研究及疫苗研制。
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公开(公告)号:CN102965438B
公开(公告)日:2014-02-26
申请号:CN201210467910.1
申请日:2012-11-16
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种致病性鳢源舒伯特气单胞菌的双重PCR检测引物组、试剂盒及方法,通过设计的两对特异性引物和优选的反应体系、反应条件,可快速、准确检测致病性鳢源舒伯特气单胞菌,为实验室进一步研究该菌及其致病机理奠定了基础。本发明突出的优点是建立的多重PCR反应,敏感性强、特异性高,可以快速、准确地检测出样品中的致病性鳢源舒伯特气单胞菌,同时避免了反复培养、冗长的一系列生化反应,节约时间、劳动能力和成本。
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公开(公告)号:CN102534050B
公开(公告)日:2013-06-19
申请号:CN201210039379.8
申请日:2012-02-21
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
Abstract: 本发明公开了用于诊断草鱼呼肠孤病毒的三重PCR检测引物组、试剂盒及方法。本发明的方法可同时检测草鱼呼肠孤病毒三种亚型:HZ08株型、104株型、JX09-01株型的三重RR-PCR检测方法,可在检测草鱼呼肠孤病毒的同时,鉴定其亚型,为有针对性的提出防控措施和更准确的因病施治方案争取了宝贵时间,对草鱼出血病的有效控制具有重大意义;应用本发明的引物组和试剂盒进行草鱼呼肠孤病毒的检测具有准确、灵敏、快速、节约成本等优势。
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公开(公告)号:CN118127234B
公开(公告)日:2024-09-20
申请号:CN202410335283.9
申请日:2024-03-22
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,特别是涉及一种基于RAA‑CRISPR/Cas12a检测杂交鳢弹状病毒的引物对、体系、试剂盒和应用。所述引物对包括引物对1、引物对2、引物对3和引物对4中的任一对。本发明利用HSHRV糖蛋白序列,使用PRIMER 5.0软件,设计4对特异性上下游引物,成功对核酸进行扩增。随后根据设计选择,手动设计特异性crRNA探针,使用阳性样品为模板,分别对引物及探针进行筛选,成功构建特异性、灵敏性、准确性均表现良好的检测方法。可检测出10copies/μL的阳性样品,且只在阳性模板有荧光信号,其他常见水生动物常见病毒均无扩增。在临床样品检测实验中,表现出较好的准确性。
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公开(公告)号:CN116949218B
公开(公告)日:2024-06-25
申请号:CN202310980493.9
申请日:2023-08-04
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所 , 上海海洋大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12N15/113 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于检测Ⅲ型鲤疱疹病毒的RAA‑CRISPR试剂盒。所述试剂盒包含Ⅲ型鲤疱疹病毒RAA的扩增引物以及crRNA序列;本发明还提出了基于RAA‑CRISPR‑Cas12a系统构建一种新型Ⅲ型鲤疱疹病毒的检测方法,具有高灵敏、高特异、便捷检测,灵敏度可达到102copies/reaction,可以实现对Ⅲ型鲤疱疹病毒(CyHV‑3)的简便、快速、准确检测,避免依赖PCR等复杂仪器。
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公开(公告)号:CN116949218A
公开(公告)日:2023-10-27
申请号:CN202310980493.9
申请日:2023-08-04
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所 , 上海海洋大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12N15/113 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于检测Ⅲ型鲤疱疹病毒的RAA‑CRISPR试剂盒。所述试剂盒包含Ⅲ型鲤疱疹病毒RAA的扩增引物以及crRNA序列;本发明还提出了基于RAA‑CRISPR‑Cas12a系统构建一种新型Ⅲ型鲤疱疹病毒的检测方法,具有高灵敏、高特异、便捷检测,灵敏度可达到102copies/reaction,可以实现对Ⅲ型鲤疱疹病毒(CyHV‑3)的简便、快速、准确检测,避免依赖PCR等复杂仪器。
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公开(公告)号:CN116356080A
公开(公告)日:2023-06-30
申请号:CN202310404356.0
申请日:2023-04-14
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 中国水产科学研究院珠江水产研究所 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12N15/11 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于基因检测技术领域,公开了一种检测锦鲤疱疹病毒的RPA‑LFD引物、探针及试剂盒。本发明提供了一种检测锦鲤疱疹病毒的试剂,其具有较高的灵敏度和特异性,最低检测限为101copy/μL,检测效果稳定,与鲤浮肿病毒(CEV)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)、鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV‑2)以及锦鲤(鲤)易感染细菌嗜水气单胞菌,无交叉反应。
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公开(公告)号:CN114908029B
公开(公告)日:2023-03-21
申请号:CN202210427863.1
申请日:2022-04-22
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC: C12N1/21 , C07K14/14 , C12N15/46 , C12N15/74 , A61K35/744 , A61K39/15 , A61K39/39 , A61P31/14 , A61P7/04 , C12R1/225
Abstract: 本发明公开了一种II型草鱼呼肠孤病毒VP6重组乳酸菌的构建和应用,所述重组乳酸菌保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号是CCTCC NO:M2022323。通过相关检测证明了重组乳酸菌可以通过口服免疫将抗原直接呈递给消化道免疫系统中的抗原呈递细胞,能够刺激鱼体同时产生局部黏膜免疫应答和系统免疫应答反应、提高鱼体产生特异性和非特异性免疫应答反应。提高免疫后稀有鮈鲫在GCRV感染过程中存活率,相对存活率(RPS)为42.9%,饲喂L.lactis pNZ8148‑VP6在GCRV感染过程中具有较好的生态防控效果。
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