-
公开(公告)号:CN116949218B
公开(公告)日:2024-06-25
申请号:CN202310980493.9
申请日:2023-08-04
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所 , 上海海洋大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12N15/113 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于检测Ⅲ型鲤疱疹病毒的RAA‑CRISPR试剂盒。所述试剂盒包含Ⅲ型鲤疱疹病毒RAA的扩增引物以及crRNA序列;本发明还提出了基于RAA‑CRISPR‑Cas12a系统构建一种新型Ⅲ型鲤疱疹病毒的检测方法,具有高灵敏、高特异、便捷检测,灵敏度可达到102copies/reaction,可以实现对Ⅲ型鲤疱疹病毒(CyHV‑3)的简便、快速、准确检测,避免依赖PCR等复杂仪器。
-
公开(公告)号:CN116949218A
公开(公告)日:2023-10-27
申请号:CN202310980493.9
申请日:2023-08-04
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所 , 上海海洋大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12N15/113 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于检测Ⅲ型鲤疱疹病毒的RAA‑CRISPR试剂盒。所述试剂盒包含Ⅲ型鲤疱疹病毒RAA的扩增引物以及crRNA序列;本发明还提出了基于RAA‑CRISPR‑Cas12a系统构建一种新型Ⅲ型鲤疱疹病毒的检测方法,具有高灵敏、高特异、便捷检测,灵敏度可达到102copies/reaction,可以实现对Ⅲ型鲤疱疹病毒(CyHV‑3)的简便、快速、准确检测,避免依赖PCR等复杂仪器。
-
公开(公告)号:CN118600111A
公开(公告)日:2024-09-06
申请号:CN202410829888.3
申请日:2024-06-25
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所 , 上海海洋大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测II型草鱼呼肠孤病毒的RPA‑CRISPR/Cas12a试剂盒及其应用。所述试剂盒包含检测Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒的crRNA和/或扩增II型草鱼呼肠孤的引物对。基于试剂盒构建一种新型II型草鱼呼肠孤病毒的检测方法;该方法操作简便,环境和设备要求低、适用于现场的草鱼出血病快速诊断方法。而且,该方法仅对GCRV‑Ⅱ有扩增反应,特异性高;对感染临床样本的检测也具有诊断灵敏度高,重复性强的特点,其中检测限可达2×10‑6fg/μL;还具备操作简便,反应快速,可以避免依赖PCR等复杂仪器等特点。本发明的方法可很好的用于目前GCRV‑Ⅱ感染病毒定量分析和临床的快速检测。
-
公开(公告)号:CN118255850A
公开(公告)日:2024-06-28
申请号:CN202410354739.6
申请日:2024-03-27
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
Abstract: 本发明涉及生物医药技术领域,特别是涉及一种具有广谱免疫保护作用的维氏气单胞菌重组外膜孔蛋白及应用。本发明从维氏气单胞菌总外膜蛋白Omps中筛选出一种具有广谱免疫保护作用的外膜孔蛋白Porin OmpA,重组的外膜孔蛋白具有良好的抗原性,与油佐剂按适当比例乳化后,免疫草鱼等淡水鱼,能提高草鱼等淡水鱼抵抗维氏气单胞菌和嗜水气单胞菌2种细菌的能力,具有广谱免疫保护效果。该外膜孔蛋白及其基因核苷酸序列可作为淡水鱼细菌性败血症基因工程亚单位疫苗和核酸疫苗进一步研究开发。
-
公开(公告)号:CN116693693A
公开(公告)日:2023-09-05
申请号:CN202310521964.X
申请日:2023-05-09
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC: C07K19/00 , A61K39/15 , A61P31/14 , C12N15/62 , C12N15/74 , C12N1/21 , A23K20/147 , A23K50/80 , A23K10/16 , C12R1/01
Abstract: 本发明属于基因工程及分子免疫学技术领域,具体涉及一种融合表达GCRV VP6和LTB的重组乳酸菌及其制备方法与应用。本发明提供了一种融合蛋白,包含GCRV VP6蛋白和大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位蛋白;通过大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)蛋白可以进一步提升VP6蛋白被肠黏膜免疫组织抗原呈递细胞直接识别并呈递抗原,介导提高口服疫苗的黏膜免疫保护效果,增强鱼体抗病毒能力。
-
公开(公告)号:CN112280740A
公开(公告)日:2021-01-29
申请号:CN202011164484.5
申请日:2020-10-27
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
Abstract: 本发明公开了一株稀有鮈鲫脑细胞系,分类命名稀有鮈鲫脑细胞系GrB,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C2019247。该稀有鮈鲫脑细胞系对多种水生生物病毒具有敏感性,接毒后均出现细胞病变,可应用于病原特性研究、水体毒性评价、疫苗研制等方面。
-
公开(公告)号:CN111197067A
公开(公告)日:2020-05-26
申请号:CN202010035541.3
申请日:2020-01-14
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种采用嗜热四膜虫筛选抗鱼纤毛类寄生虫中草药成分的方法,S1、对嗜热四膜虫进行培养;S2、对嗜热四膜虫生长曲线的测定;S3、中草药水煮液或中药单体试液的制备;S4、通过药物对嗜热四膜虫进行培养暴露;S5、药物暴露处理的嗜热四膜虫试液,进行细胞计数,分析药物抑制嗜热四膜虫生长的半数抑制浓度;S6、CCK-8法测定细胞活力随药物浓度的变化,用SPSS软件计算CC50;S7、评估中草药对嗜热四膜虫的抑制杀灭效果;S8、设计药物浓度,添加入饲料中,评估鱼类对寄生虫的作用效果。采用可人工培养的嗜热四膜虫代替鱼纤毛类寄生虫,进行抗虫药物大通量筛选,受试材料随时可得,不受时间、温度、季节的限制,且具重复性好、经济适用快速。
-
公开(公告)号:CN108865974A
公开(公告)日:2018-11-23
申请号:CN201810669284.1
申请日:2018-06-26
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种罗非鱼脑细胞系的构建方法,其步骤是:取鲜活罗非鱼消毒取脑组织,剪碎块,用胶原酶处理后,加入胰蛋白酶;用含培养液充分悬浮,进行原代培养;细胞长满瓶底时,用胰酶‑EDTA消化,接种传代培养;传代培养60代后,于对数生长期加入秋水仙素处理并进行核型分析。本发明公开的罗非鱼脑细胞系的制备方法,方法简单方便;并且用该方法制备的罗非鱼脑细胞系,可以进行长时间的传代培养,对罗非鱼出血病病毒非常敏感,可以广泛应用于实验中。
-
公开(公告)号:CN107056898A
公开(公告)日:2017-08-18
申请号:CN201710076686.6
申请日:2017-02-13
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
CPC classification number: C07K14/005 , C07K16/065 , C07K16/085 , C12N15/70 , C12N2710/16022 , C12N2800/101
Abstract: 本发明公开了一种鲤疱疹病毒3型1301株ORF136基因重组表达蛋白、多克隆抗体及其应用。本发明提供的鲤疱疹病毒3型1301株ORF136基因重组表达蛋白,其全长氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,编码该蛋白的全长核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明选取ORF136部分基因序列构建pET32a‑ORF136重组原核表达载体,经IPTG诱导表达后得到重组表达蛋白,经免疫兔子获得多克隆抗体,将所得多克隆抗体用纯化的CyHV‑3病毒和感染CyHV‑3的KS细胞进行western blot分析,并进一步采用间接免疫荧光实验验证抗体的检测应用。ORF136基因重组表达蛋白多克隆抗体的制备为ORF136蛋白功能研究和CyHV‑3血清学诊断方法的建立提供了重要材料。
-
公开(公告)号:CN104667274A
公开(公告)日:2015-06-03
申请号:CN201510071454.2
申请日:2015-02-11
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所 , 广州市瑞洋表面活性剂有限公司
Abstract: 本发明公开了一种提高渔用疫苗浸泡免疫效果的佐剂及其应用方法。该佐剂为蓖麻油聚乙二醇单酯葡萄糖苷,或者为蓖麻油聚乙二醇单酯葡萄糖苷、氮酮和山莨菪碱组成的组合物。该佐剂的应用方法为:将适量佐剂溶于水后再与疫苗溶液按一定的体积比混匀,再将需要免疫的鱼体放入其中,充气浸泡15~30min即可。在本发明中,蓖麻油聚乙二醇单酯葡萄糖苷具有良好的生物降解性,无毒,界面张力低,水溶性好,具有分散、乳化等作用,使不溶于水的油类或不溶性抗原在溶液中分散更均匀,能够有效提高疫苗的免疫效果;且本发明佐剂施用方法简单,施用安全、环境友好,且在养殖生产中对鱼的生长无不良影响。
-
-
-
-
-
-
-
-
-