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公开(公告)号:CN101368216A
公开(公告)日:2009-02-18
申请号:CN200810200931.0
申请日:2008-10-09
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开一种生物工程技术领域的用荧光标记核苷酸反转录检测菌体RNA转录水平的方法,步骤为:根据菌体目的基因序列设计并合成上游引物,提取总RNA后,运用反转录酶将荧光标记核苷酸整合到cDNA中,通过异丙醇沉淀得到DNA,并用乙醇洗涤游离荧光标记核苷酸,以使DNA信号测定准确,用荧光分析仪测定荧光信号。本发明方法新颖,与其他运用荧光标记探针测定菌体转录水平的方法相比,步骤简单,节约时间,不需要复杂的仪器。
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公开(公告)号:CN101302508A
公开(公告)日:2008-11-12
申请号:CN200810038830.8
申请日:2008-06-12
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明涉及的是一种生物工程技术领域的假单胞菌M18的RNA快速提取方法。包括如下步骤:收集106~107个细胞假单胞菌M18,加入变性液和氯仿,混匀,离心,菌液在管中分为三层;吸取500μl上层液体转移至硅膜柱中,并加入异丙醇,离心;加入乙醇至硅膜柱中,离心;重复上一步;再离心,保证硅膜柱内无液体;加入双蒸水、洗脱液至硅膜柱内;离心,用一干净离心管收集洗脱液。本发明提取时间大大缩短,从提取RNA的方法中可以看出:提取的时间在6min之内;没有DNA污染;提取过程易于自动化。对过柱条件优化后,提取出的RNA纯度很高;通过分光光度计测定提取出的RNA其吸光值A260/A280=1.93。
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公开(公告)号:CN101260432A
公开(公告)日:2008-09-10
申请号:CN200810035831.7
申请日:2008-04-10
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开一种利用S1酶切割单链核酸特性的RNA定量检测方法,主要包括以下步骤:首先,将合适浓度的捕获探针固定于预先包被有链亲和素的酶标板上,备用;然后,超声裂解细胞释放胞内RNA,加入信号探针与目标RNA杂交;杂交后加入S1酶切割单链RNA、DNA和RNA/信号探针杂交体中的单链部分,剩下完全互补的目标RNA/信号探针杂交体;变性剩余的杂交体后捕获探针与信号探针杂交,再利用辣根过氧化物酶放大信号。本发明操作简单,特异性强,在常规的实验条件下即可完成对RNA的定量检测。
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公开(公告)号:CN101182581A
公开(公告)日:2008-05-21
申请号:CN200710170770.0
申请日:2007-11-22
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开一种利用分子信标在线检测菌体转录水平的方法,步骤为:通过测定分子信标在不同缓冲溶液里的热力学特征,记录荧光值-温度变化曲线,选出对信号反应灵敏的备选缓冲液,分子信标和过量的cDNA在备选缓冲溶液里杂交,得到荧光值-时间变化曲线,信号噪声比最大者为最佳杂交缓冲溶液;在选定杂交缓冲溶液中,测定分子信标、以及分子信标和cDNA杂交体的热力学特征,获得荧光值-温度变化曲线,选出分子信标低背景,信标和cDNA杂交体有最大荧光值的温度段,在该温度段下,获得荧光值-时间变化曲线,具有最快反应速度者为最优反应温度;菌体mRNA定量。本发明在10min-30min内完成,实现发酵过程的在线控制。
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公开(公告)号:CN100372872C
公开(公告)日:2008-03-05
申请号:CN200610026662.1
申请日:2006-05-18
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种利血平分子印迹聚合物的制备方法,属于生物工程技术领域。具体为:首先将交联剂、功能单体、模板分子和引发剂溶解在致孔剂中,得到混合溶剂;将混合溶剂超声脱气;混合均匀后,通入氮气,氮气状态或抽真空状态下密封;进行聚合反应,分子印迹聚合物采用热引发;聚合反应结束后,将合成的分子印迹聚合物取出研磨、过筛后用有机溶剂除去模板分子,通过高效液相色谱-紫外检测,直到检测不到模板分子;将除去模板分子的聚合物,真空干燥,得到利血平特异的分子印迹聚合物。本发明制得的分子印迹聚合物能够简单、快速、高效分离纯化、富集生物样品中的利血平残留,可直接用于对利血平的特异选择性分离、高效富集。
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公开(公告)号:CN101092353A
公开(公告)日:2007-12-26
申请号:CN200710043693.2
申请日:2007-07-12
Applicant: 上海交通大学 , 深圳市利世隆科技有限公司
Abstract: 本发明涉及的是一种生物能源技术领域的无废物排放可全循环利用的动植物油脂转化脂肪酸单酯的制备方法。本发明包括:将动植物油脂原料、一元醇原料和催化剂用泵输送到耐压力反应罐中;将耐压力反应罐密封,搅拌混合,加热至酯交换反应温度后,恒温至转酯反应完成;将转酯反应混合物从耐压力反应罐中直接喷入蒸发器中,过量的原料醇和催化剂挥发成蒸汽,引入冷凝器冷凝成液体,回收循环;醇和催化剂完全挥发后剩余的母液分层,比重轻的层为脂肪酸单酯,比重大的层为甘油副产物。本发明的原料来源广泛、催化剂回收循环容易、生产条件温和、反应时间短、工艺简单,适于大规模工业化生产。
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公开(公告)号:CN101016703A
公开(公告)日:2007-08-15
申请号:CN200710037882.9
申请日:2007-03-08
Applicant: 上海交通大学 , 上海拟生生物科技有限公司
IPC: D21C5/00
Abstract: 一种生物工程技术领域的用生物质原料炼制生产纤维素、木质素和木糖的方法,具体为:生物质原料粉碎过筛后,用低沸点有机酸浸泡,使生物质原料分解成木糖及低聚木糖,纤维素和木质素而液化,反应后将该液化生物质冷却,并加入有机溶剂,混匀后静置,待沉淀析出完全,将沉淀分离、洗涤、干燥得到无定型纤维素,将纤维素沉淀母液蒸馏,回收有机酸及生成的易挥发有机物,蒸馏母液冷却后静置,待沉淀析出完全,将沉淀分离、洗涤、干燥得到木糖及低聚木糖,蒸馏回收上述木糖及低聚木糖沉淀母液中的有机溶剂,并将该蒸馏母液中析出的沉淀分离、干燥得到木质素。本发明中有机酸和有机溶剂得到全循环,无废物排放,是一种绿色炼制方法。
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公开(公告)号:CN1661100A
公开(公告)日:2005-08-31
申请号:CN200410093092.9
申请日:2004-12-16
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 一种棕囊藻的检测探针,属于核酸检测领域。用于对该藻进行S1酶保护分析和夹心杂交检测,具体包括三条相互关联的寡核苷酸探针:S1酶保护分析探针,在进行生物信息学比对分析时,仅与棕囊藻核糖体小亚基210~280区域核苷酸互补,而与其它藻核糖体RNA无同源性,长度为58bp,在一定的条件下可特异性结合于棕囊藻的rRNA上,序列为:5’-CGATTCGAGCAGTTATTATGACTCAGCACACAACCGGGCGAACCCGAGAAGGTTTCTT。本发明探针适用性好,大大方便了特异探针的寻找和实现。本发明的稳定性远远高于夹心杂交技术。
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公开(公告)号:CN1635154A
公开(公告)日:2005-07-06
申请号:CN200410067807.3
申请日:2004-11-04
Abstract: 一种赤潮异弯藻的检测探针,属于核酸检测领域。用于对该藻进行S1酶保护分析和夹心杂交检测,具体包括三条相互关联的寡核苷酸探针:S1酶保护分析探针,在进行生物信息学比对分析时,仅与赤潮异弯藻核糖体小亚基150~300区域核苷酸互补,而与其它藻核糖体RNA无同源性,长度为59bp,在一定的条件下可特异性结合于赤潮异弯藻的rRNA上,序列为:5’-GGCAGAAACTTGAATGAACCATCGACCGAAGTCGATTCGCACAGTTACTATGATTCACC。本发明探针适用性好,大大方便了特异探针的寻找和实现。本发明的稳定性远远高于夹心杂交技术。
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公开(公告)号:CN1635152A
公开(公告)日:2005-07-06
申请号:CN200410067805.4
申请日:2004-11-04
Abstract: 一种微型原甲藻的检测探针,属于核酸检测领域。用于对该藻进行S1酶保护分析和夹心杂交检测,具体包括三条相互关联的寡核苷酸探针:S1酶保护分析探针,在进行生物信息学比对分析时,仅与微型原甲藻核糖体大亚基430~520区域核苷酸互补,而与其它藻核糖体RNA无同源性,长度为58bp,在一定的条件下可特异性结合于微型原甲藻的rRNA上,序列为:5’-ACAGTCCGCAAATGAGTTCTGCCAA GGCTATTCACTCACCCGTAGACGAGCTACCATGA。本发明探针适用性好,大大方便了特异探针的寻找和实现。本发明的稳定性远远高于夹心杂交技术。
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