一种微生物转化法制备达木林B的方法

    公开(公告)号:CN108410940B

    公开(公告)日:2019-03-05

    申请号:CN201810243934.6

    申请日:2018-03-23

    申请人: 娄志春

    发明人: 娄志春

    摘要: 本发明公开了一种微生物转化法制备达木林B的方法,包括孢子和种子制备、微生物转化、转化产物收集和分离纯化。本发明发现,转化原料为绞股蓝皂苷LI时,短刺小克银汉霉AS3.153菌株会将其基本都转化为达木林A;转化原料为绞股蓝皂苷L时,短刺小克银汉霉AS3.153菌株会将其基本都转化为达木林B。绞股蓝皂苷LI、绞股蓝皂苷L的C20位羟基的构型决定了短刺小克银汉霉AS3.153菌株的脱水选择性,短刺小克银汉霉AS3.153菌株对该位置的脱水具有选择性,可以选择性制备达木林A或达木林B,原料利用率高。

    以低共熔物作为促溶剂利用静息细胞转化制备胆甾烯酮的方法

    公开(公告)号:CN104357526B

    公开(公告)日:2018-05-18

    申请号:CN201410522163.6

    申请日:2014-09-30

    IPC分类号: C12P33/02

    摘要: 本发明涉及一种以低共熔物作为促溶剂利用静息细胞转化制备胆甾烯酮的方法,⑴静息细胞在发酵培养基中培养好以后,离心,加入无菌磷酸缓冲液重悬作为转化液;所述静息细胞具有将胆固醇氧化生成胆甾烯酮的能力;⑵在转化液中投入胆固醇,并添加低共熔物为促溶剂,乙酸乙酯萃取转化液,采用HPLC法检测产物胆甾‑4‑烯‑3‑酮的产率;⑶用柱层析分离法将底物胆固醇与产物胆甾烯酮进行分离,并纯化得到胆甾烯酮纯品。本发明采用低共熔物(DES)代替甲醇等有机溶剂作为绿色添加剂,添加低共熔物后,提高底物的分散率,有效促进底物胆固醇与菌体的接触,有效提高了静息细胞的转化效率,在加入和转化过程中操作条件温和,步骤简单。

    竹黄分离真菌瓶生顶孢霉及其在生产麦角甾酮中的应用

    公开(公告)号:CN105154338B

    公开(公告)日:2018-04-24

    申请号:CN201510601408.9

    申请日:2015-09-18

    IPC分类号: C12N1/14 C12P33/02 C12R1/645

    摘要: 本发明公开了一种竹黄分离真菌瓶生顶孢霉(Acremonium cavaraeanum及其在生产麦角甾酮中的应用。所述瓶生顶孢霉菌株编号为CA01,保藏号为CGMCC No:10816.该菌株从竹黄子实体中分离获得,通过固体发酵方法获得发酵物经烘干和粉碎用有机溶剂浸提,经硅胶柱层析分离,在甲醇中重结晶获得目标产物为黄绿色晶体(甲醇),分子量:392,分子式:C28H40O,在365nm紫外灯下显蓝色荧光,分析证明是麦角甾酮,经测定绿色结晶是麦角甾酮纯品。本专利的瓶生顶孢霉CA01菌株及其固体发酵获得麦角甾酮的方法可提供于扩大化的工业生产。

    一组糖基转移酶及其应用

    公开(公告)号:CN107058446A

    公开(公告)日:2017-08-18

    申请号:CN201710413622.0

    申请日:2013-12-06

    摘要: 本发明涉及一组糖基转移酶及其应用。具体地,提供了糖基转移酶gGT25、gGT13、gGT30、gGT25‑1、gGT25‑3、gGT25‑5,gGT29、gGT29‑3、gGT29‑4,gGT29‑5,gGT29‑6,gGT29‑7、3GT1、3GT2、3GT3、3GT4及其衍生多肽在萜类化合物糖基化催化及新皂苷合成中的应用,其中,糖基转移酶能特异和高效地催化四环三萜化合物底物的C‑20位和/或C‑6位和/或C‑3的羟基糖基化,和/或将来自糖基供体的糖基转移到四环三萜类化合物的C‑3位的第一个糖基上以延伸糖链。本发明糖基转移酶还可应用于构建人工合成稀有人参皂苷及多种新人参皂苷及其衍生物。

    雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮的制备方法及所用发酵培养基

    公开(公告)号:CN106282289A

    公开(公告)日:2017-01-04

    申请号:CN201510249629.4

    申请日:2015-05-15

    摘要: 本发明公开了一种雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮的制备方法和所用的发酵培养基。制备方法包括如下步骤:(1)发酵:向发酵培养基中接种分枝杆菌,发酵获得发酵液;(2)粗提:破碎处理发酵液,固液分离将上清液过大孔吸附树脂A填充的色谱柱,之后对色谱柱进行洗脱,收集得到洗脱液I;(3)精提:将洗脱液I浓缩后湿法上样过骨架为苯乙烯-二乙烯苯的大孔吸附树脂填充的色谱柱,以甲醇水溶液梯度洗脱,收集洗脱液,得到洗脱液II;(4)将洗脱液II浓缩结晶,再以有机溶剂溶解后重结晶,即得纯品。所述的方法全面改进了ADD的发酵提取工艺使发酵产物损失少,使用的有机溶剂较少,更加环保。