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公开(公告)号：CN108467858A
公开(公告)日：2018-08-31
申请号：CN201810110773.3
申请日：2018-02-05
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种α-L-鼠李糖苷酶及其应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明首次克隆并重组表达能特异性降解α-1,2糖苷键的α-L-鼠李糖苷酶BtRha，弥补了α-L-鼠李糖苷酶水解鼠李糖与鼠李糖之间的α-1,2糖苷键的空白；该酶能高效特异性降解朝霍定C转化为淫羊藿苷，在酶用量1.5 U/mL，pH 5.5，55℃的条件下水解1 g/L的朝霍定C 90 min,摩尔转化率高达90.5%以上。
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公开(公告)号：CN107641621A
公开(公告)日：2018-01-30
申请号：CN201710448315.6
申请日：2017-06-14
Applicant: 江苏康缘药业股份有限公司 , 南京林业大学
Abstract: 本发明涉及酶工程及生物医药技术领域，尤其涉及一种糖苷酶组合物及酶法制备淫羊藿苷元的方法。本发明筛选获得了一种能有效降解淫羊藿苷母核结构上鼠李糖残基的α-L-鼠李糖苷酶及能高效降解其母核结构中葡萄糖残基耐高温β-葡萄糖苷酶，随后通过双酶转化高效制备具有完全保持原有生物活性的淫羊藿苷元。本发明提供的组合物中，两种糖苷酶的最适反应温度都较高，底物溶解性较好，不需要助溶剂；并且酶解时间短，得率高。实验表明，采用本发明提供的糖苷酶组合物对淫羊藿苷进行酶解，摩尔转化率为98.3％，淫羊藿苷元的得率为90％。
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公开(公告)号：CN106954722A
公开(公告)日：2017-07-18
申请号：CN201710333065.1
申请日：2017-05-12
Applicant: 南京林业大学
IPC: A23F3/34
Abstract: 一种提高适口性和保健功效的银杏茶饮料及其制备方法和应用，在银杏茶饮料制备过程中的浸提步骤，添加β‑葡萄糖苷酶和α‑L‑鼠李糖苷酶。银杏茶可浸出总黄酮含量约0.4~0.8%，总内酯含量约0.03~0.15%，特征香气物质约占8~12%。本发明中运用生物酶制备银杏茶饮品，总黄酮浸出率提高约38%，黄酮苷元的比例大幅提高，特征香气物质的释放量提高约264%。通过本发明技术可提升银杏茶饮品的食用品质和保健功效，能显著提高银杏茶适口性、有效成分浸出率、抗氧化、抗炎和抗肿瘤活性。
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公开(公告)号：CN104312996B
公开(公告)日：2017-03-22
申请号：CN201410504753.6
申请日：2014-09-26
Applicant: 南京林业大学
Abstract: α-L-鼠李糖苷酶Rha1及其表达基因和应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.2 所示；编码所述 α-L-鼠李糖苷酶Rha1的基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1 所示。该α-L-鼠李糖苷酶在酶用量13U/mL，pH 6.5，35℃的条件下水解1.5 g/L的芦丁20 min,水解效率高达98%以上；该酶能在低温下生物催化和转化芦丁、柚皮苷等黄酮类化合物，大大降低了能耗。
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公开(公告)号：CN105695552A
公开(公告)日：2016-06-22
申请号：CN201610219039.1
申请日：2016-04-08
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12P33/20 , C12N9/2402 , C12N9/2445 , C12Y302/01021 , C12Y302/0104
Abstract: 一种酶法制备稀有人参皂苷Rh1的方法，利用来源于Thermotoga petrophila的β-葡萄糖苷酶和黑曲霉(Aspergillus niger)的α-鼠李糖苷酶，降解人参皂苷Re生产Rh1。本发明通过酶法催化人参皂苷Re生产稀有人参皂苷Rh1，生成的稀有人参皂苷Rh1纯度高，没有副产物。酶法转化的效率高，摩尔得率达到95％。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105567430A
公开(公告)日：2016-05-11
申请号：CN201510996304.2
申请日：2015-12-25
Applicant: 南京林业大学
IPC: C11B9/02
Abstract: 一种复合酶辅助制备桂花浸膏和精油的方法，采用β葡萄糖苷酶和果胶酶组成的复合酶，在添加桂花的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中水解反应而得。与传统的溶剂直接提取法相比，采用β葡萄糖苷酶和果胶酶复配对桂花进行处理，桂花浸膏得率由2.04%提高到3.27%，桂花浸膏得率提高了60%，高于文献报道的单一使用β葡萄糖苷酶处理的40%。桂花精油得率由直接提取的1.77%提高到2.71%，精油得率提高了53%，典型香气成分显著提高。复合酶效果优于使用单一酶。
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公开(公告)号：CN103055464B
公开(公告)日：2016-03-02
申请号：CN201210539590.6
申请日：2012-12-14
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种利用漆酶降解辛基酚的方法，步骤为：制备LacA酶液，调节辛基酚浓度在25～200 mg/L，加入漆酶为LacA的酶液浓度0.5～3U/mL，控制反应体系的pH3.5～6，温度保持在25～50℃条件下降解。本发明采用的是生物酶催化工艺，具有去除效率高，方便，安全无污染等突出特点；本发明比较不同的同工酶对辛基酚的专一性，选取对辛基酚专一性最强的漆酶，添加介体物质，能提高漆酶的反应效率，减少反应时间，从而降低漆酶的使用量，降低了运行成本。本发明能高效地降解辛基酚，当辛基酚浓度为100 mg/L时，在适宜催化条件下反应12 h降解率可以达到97.2%。
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公开(公告)号：CN104762281A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201510102927.0
申请日：2015-03-09
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种α-鼠李糖苷酶及其制备方法和应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；该重组酶最适反应温度高、热稳定性好，在优选条件下可高效表达目的蛋白，因此可在选择性水解芦丁、橘皮苷、柚皮苷、樱桃苷、柴胡皂苷及其它连接α-鼠李糖苷的黄酮类化合物或萜类香气前体化合物中的鼠李糖等领域中具有广泛的应用。
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公开(公告)号：CN104328098A
公开(公告)日：2015-02-04
申请号：CN201410510836.6
申请日：2014-09-28
Applicant: 江苏康缘药业股份有限公司 , 南京林业大学
CPC classification number: C12N9/2445 , C12P33/005 , C12P33/20 , C12Y302/01021
Abstract: 本发明属于基因工程技术及生物医药领域，具体涉及一种β-葡萄糖苷酶及其制备方法与应用，尤其是应用于酶法转化制备人参皂苷20(S)-Rg3的应用。本发明所述β-葡萄糖苷酶能耐受高温，在70℃下保温3h酶活力几乎不变；本发明所述β-葡萄糖苷酶对人参皂苷Rb1的转化能力强，本发明所述β-葡萄糖苷酶与人参皂苷Rb1孵育60min，人参皂苷Rb1几乎完全转化为人参皂苷20(S)-Rg3；本发明所述制备人参皂苷20(S)-Rg3的方法酶促转化反应中间产物少，转化后产物人参皂苷20(S)-Rg3纯度高。
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公开(公告)号：CN103263448B
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201310067394.8
申请日：2013-03-01
Applicant: 南京林业大学
IPC: A61K36/16 , A61P9/14 , A61P9/10 , A61P3/06 , A61P9/00 , A61P9/08 , A61P11/00 , A61P31/04 , A61P9/12 , A23L1/29 , A61K127/00
Abstract: 本发明公开了一种用于发酵预处理改进银杏叶黄酮提取的发酵菌种及应用方法，该发酵菌种是曲霉类真菌，专利菌株保藏号CCTCCM2012515。首先将银杏叶粉碎至20-60目；银杏叶加水混合，加水量45%-90%；混合物在115℃杀菌15分钟，装入发酵罐；按混合物中银杏叶的重量接种菌种，接种量为0.01%-0.02%；25-30℃条件下通气发酵2-11天；按最终参数固液比1：20，乙醇含量60%，适量添加醇和水，不断搅拌抽提黄酮类物质；过滤悬浮液，得到提取液；提取液经真空浓缩后得成品，或进一步干燥成固态。本发明采用一株黑曲霉对银杏叶进行发酵预处理，降解叶细胞，再采用传统的提取方法提取，使之改进银杏黄酮的提取率。与传统的醇溶剂提取法对比，银杏叶的黄酮提取量提高20-60%。
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