一种牛乳中乳铁蛋白竞争法纳米花免疫测流层析检测卡

    公开(公告)号:CN110068688B

    公开(公告)日:2020-08-14

    申请号:CN201910429625.2

    申请日:2019-05-22

    Abstract: 本发明属于抗体工程与免疫检测领域,具体涉及一种牛乳中乳铁蛋白竞争法纳米花免疫测流层析检测卡。该纳米花免疫测流层析检测卡包括样品垫、纳米花金标垫、硝酸纤维素膜(NC膜)、吸水垫和塑料卡壳。所述的NC膜上设置有C线和T线,所述的C线上喷有羊抗鼠的IgG抗体,而所述的T线上包被有牛乳铁蛋白抗原。所述的金标垫上含有纳米花金标记的鼠源单克隆IgG抗体。本发明能够通过竞争法纳米花免疫检测卡,对牛奶中乳铁蛋白进行快速检测,其检测灵敏度为2.4 ng/mL,对牛奶中主要的酪蛋白、血清白蛋白和脱脂牛奶均无交叉反应,所建立的检测方法方便快捷可以直接用于乳产品中乳铁蛋白含量的快速检测。

    基于体外反应体系筛选黄曲霉SUMO化靶蛋白的方法

    公开(公告)号:CN107389945B

    公开(公告)日:2019-02-22

    申请号:CN201710647254.6

    申请日:2017-08-01

    Abstract: 本发明涉及基于体外反应体系筛选黄曲霉SUMO化靶蛋白的方法,该体系由SUMO化反应溶液体系组成,其中包含了原核表达的黄曲霉SUMO化酶系中的修饰分子AfSumO,SUMO E1活化酶AfAosA‑AfUbaB,SUMO E2结合酶AfUbcI,SUMO E3连接酶以及待检测的蛋白或药物。利用该体系一方面可以快速鉴定/筛选影响黄曲霉SUMO化修饰过程的药物分子或小分子化合物;同时利用该体系在体外方便快速的检测某种蛋白是否能被黄曲霉的SUMO化体系修饰,进而鉴定/筛选潜在的SUMO化靶标蛋白。

    一株能稳定表达抗干扰素γ的基因工程单链抗体株及应用

    公开(公告)号:CN108060113A

    公开(公告)日:2018-05-22

    申请号:CN201711338429.1

    申请日:2017-12-14

    Abstract: 本发明属于抗体工程领域,具体涉及一株能稳定表达抗干扰素γ(IFN‑γ)的基因工程单链抗体株及其应用。本发明通过基因工程手段在体外克隆干扰素γ的基因,构建原核表达载体,IPTG诱导表达纯化获得可溶的干扰素抗原蛋白。利用噬菌体展示技术,淘选出能稳定分泌表达抗(IFN‑γ)的基因工程单链抗体株,并通过构建原核表达载体表达纯化出具有功能的单链抗体,利用竞争ELISA方法,实现对人血液中IFN‑γ的定性与定量检测,为商品化的开发生产高质量的酶联免疫检测试剂盒和金标抗体检测卡奠定了基础。

    基于体外反应体系筛选黄曲霉SUMO化靶蛋白的方法

    公开(公告)号:CN107389945A

    公开(公告)日:2017-11-24

    申请号:CN201710647254.6

    申请日:2017-08-01

    CPC classification number: G01N33/68 C40B50/06

    Abstract: 本发明涉及基于体外反应体系筛选黄曲霉SUMO化靶蛋白的方法,该体系由SUMO化反应溶液体系组成,其中包含了原核表达的黄曲霉SUMO化酶系中的修饰分子AfSumO,SUMO E1活化酶AfAosA-AfUbaB,SUMO E2结合酶AfUbcI,SUMO E3连接酶以及待检测的蛋白或药物。利用该体系一方面可以快速鉴定/筛选影响黄曲霉SUMO化修饰过程的药物分子或小分子化合物;同时利用该体系在体外方便快速的检测某种蛋白是否能被黄曲霉的SUMO化体系修饰,进而鉴定/筛选潜在的SUMO化靶标蛋白。

    一种黄曲霉致病基因AfsumO及应用

    公开(公告)号:CN105907771A

    公开(公告)日:2016-08-31

    申请号:CN201610467379.6

    申请日:2016-06-24

    Inventor: 聂鑫怡 汪世华

    CPC classification number: C07K14/38 C12Q1/025

    Abstract: 本发明公开了一种黄曲霉致病基因AfsumO及在筛选防治黄曲霉污染药物的应用。本发明还公开了一种筛选抑制黄曲霉致病性或筛选防治黄曲霉污染的药物的方法。更加具体地,该方法包含,在黄曲霉的培养体系中添加待筛选的候选物,并用针对AfSumO蛋白或蛋白片段的抗体检测黄曲霉体内的AfSumO蛋白的表达水平和SUMO化修饰水平,并与不添加候选物的对照组进行比较,如果测试组中AfSumO蛋白的表达水平和SUMO化修饰水平在统计学上低于对照组,就表明该候选物是抑制黄曲霉的致病性的潜在药物。

    利用基因工程单链抗体检测μ-芋螺毒素的试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN102095849B

    公开(公告)日:2014-10-29

    申请号:CN201010604210.3

    申请日:2010-12-24

    Abstract: 本发明提供了一种利用基因工程单链抗体检测μ-芋螺毒素的试剂盒及方法,本发明的试剂盒中,其试剂包括其试剂包括:样品提取液、标准试剂、酶标抗原试剂、洗涤液、BSA试剂、显色底物、终止液。通过样品处理、试剂平衡、洗涤、加样、孵育、洗涤、显色、终止,计算样品中μ-CTX的含量。本发明可以在大肠杆菌中高效表达抗μ-CTX小分子基因工程单链抗体并大规模生产,整个生产过程变得非常简单,省时省力省钱。使用方便快捷,成本低廉。

    一种活性多糖产品加工工艺优化方法

    公开(公告)号:CN102295708B

    公开(公告)日:2013-06-05

    申请号:CN201110163783.1

    申请日:2011-06-17

    Abstract: 本发明涉及一种活性多糖产品加工工艺优化方法,该方法通过引入活性跟踪技术,将多糖得率和活性保持综合评价应用于活性多糖提取工艺的条件试验过程;将多糖保存率、蛋白脱除率和活性保持综合评价应用于活性多糖的脱蛋白纯化条件试验过程;通过纤维素、葡聚糖凝胶柱层析,对脱蛋白活性多糖产品进行纯化分离过程研究,活性试验跟踪,了解主要活性分离部各峰的组成、多糖分子量,实现生产过程质量控制,提出科学合理的活性多糖生产工艺优化方法。采用本发明提出的技术方法,可以方便、快速、合理的实施活性多糖提取工艺条件和脱蛋白纯化工艺条件的探索,评价和选择活性多糖的加工工艺,实现高质、高效开发生产不同原料活性多糖产品。

    一种茶树菇活性多糖及其制备方法

    公开(公告)号:CN102276744A

    公开(公告)日:2011-12-14

    申请号:CN201110163784.6

    申请日:2011-06-17

    Abstract: 本发明涉及一种茶树菇活性多糖及其制备方法,该方法以茶树菇为基础材料,引入活性评价指标,经提取、脱蛋白条件试验,对多指标进行综合分析,评价和筛选既能很好保持茶树菇多糖生物活性,又具备较高茶树菇多糖得率的提取加工工艺,以优化的工艺条件制备茶树菇活性粗多糖和茶树菇脱蛋白活性多糖,通过茶树菇脱蛋白活性多糖样品柱层析分离、活性跟踪、主要活性部位分子量测定,明确茶树菇活性多糖抗肝组织脂质过氧化作用的主要活性成分是分子量为300000酸性多糖,该多糖对促进小鼠巨噬细胞吞噬作用也表现出较好的生物活性。该方法可以避免提取,分离多糖工艺评价选择的盲目性,通过以生物活性为指标制备的茶树菇活性多糖,具有良好的经济效益。

    一种基因工程单链抗体检测河豚毒素的试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN102175847A

    公开(公告)日:2011-09-07

    申请号:CN201110027079.3

    申请日:2011-01-26

    Abstract: 本发明提供了一种基因工程单链抗体检测河豚毒素的试剂盒及方法,本发明的试剂盒中,其试剂包括其试剂包括:样品提取液、标准试剂、酶标抗原试剂、洗涤液、BSA试剂、显色底物、终止液。通过样品处理、试剂平衡、洗涤、加样、洗涤、显色、终止,计算样品中河豚毒素的含量。本发明的试剂盒中采用的抗河豚毒素单链抗体可以在大肠杆菌中高效表达,并可大规模生产,制备过程简便易行,省时省力省钱。利用本发明的试剂盒检测河豚毒素,在1.5-2h内即可确定样品是否受河豚毒素污染,以及计算所含河豚毒素的量,使用方便快捷,成本低廉。

    一株能稳定分泌抗芋螺毒素μ-KIIIA-CTX单克隆抗体的杂交瘤细胞株

    公开(公告)号:CN115948346A

    公开(公告)日:2023-04-11

    申请号:CN202211280518.6

    申请日:2022-10-19

    Abstract: 本发明具体涉及一株能分泌芋螺毒素μ‑KIIIA‑CTX单克隆抗体的杂交瘤细胞株3E11。杂交瘤细胞株3E11的分类命名为抗芋螺毒素μ‑KIIIA‑CTX单克隆抗体杂交瘤细胞株,其已于2021年12月03日在中国普通微生物菌种保藏管理中心登记保藏,保藏编号为CGMCC No.45004。杂交瘤细胞株3E11分泌的抗芋螺毒素μ‑KIIIA‑CTX单克隆抗体特异性强、亲和力大、效价高,基于杂交瘤细胞株3E11及其所分泌的单克隆抗体,本发明建立了一种ELISA免疫检测方法,该检测方法可应用于芋螺毒素μ‑KIIIA‑CTX的检测中,且具有准确性强、灵敏度高、操作简便的优势。

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