一种海藻糖酶、重组菌及其在酵母制品水解中的应用

    公开(公告)号:CN114891665A

    公开(公告)日:2022-08-12

    申请号:CN202210413478.1

    申请日:2022-04-14

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种海藻糖酶、重组菌及其在酵母制品水解中的应用,本发明的杓兰果胶杆菌,保藏编号为CGMCC No.17442。本发明首次报道了一种产海藻糖酶的杓兰果胶杆菌,海藻糖酶酶活为19U/mL。将该海藻糖酶基因在大肠杆菌体系中异源表达,重组菌在5 L罐发酵28 h达到最高酶活2150 U/mL。重组蛋白PCTre的最适反应温度和pH分别为35°C和5.5,在25‑55°C、pH 5‑8.5条件下均有较好的稳定性,对有机溶剂耐受性好,在10%乙醇溶液中16 h仍能保留70%的酶活。该海藻糖酶水解酵母粉中海藻糖,可在20 min内完全水解,体系中可利用糖比率从1.45%增加到10.31%。

    一种高效转化维生素D3为其活性形式的菌株及其应用

    公开(公告)号:CN112322549B

    公开(公告)日:2022-04-08

    申请号:CN202011330526.8

    申请日:2020-11-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种高效转化维生素D3为其活性形式的菌株及其应用,本发明属生物技术领域,涉及一株高效转化维生素D3的巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)H‑1及其应用,该菌株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.20362。巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)H‑1能转化维生素D3为25‑OH‑VD3和1α,25‑diOH‑VD3,在底物投料量为1.0g/L的条件下,底物转化率达95%,25‑OH‑VD3浓度达26mg/L,摩尔得率4.90%;1α,25‑diOH‑VD3浓度达23mg/L,摩尔得率4.25%。

    一株恶臭假单胞菌突变菌株及其在6-羟基烟酸生物制备中的应用

    公开(公告)号:CN112877264B

    公开(公告)日:2022-04-05

    申请号:CN202110398624.3

    申请日:2021-04-12

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一株恶臭假单胞菌突变菌株及其在6‑羟基烟酸生物制备中的应用。本发明的恶臭假单胞菌突变菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日期:2021年3月8日,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏号为CGMCC No.21876。本发明的突变株Pseudomonas putida S14 mut‑5,活性为2.68U·mL‑1,是野生型的2.4倍。该菌株底物耐受性明显提高,与腈水解酶联合应用,可以转化3‑氰基吡啶累积获得6‑羟基烟酸54.5g·L‑1,其最适pH为6.0,相较于大多数偏好中性及碱性的烟酸脱氢酶,更适应工业生产条件,在工业应用上具有广阔的开发前景。

    一种定点突变改造的褐藻胶裂解酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN111424027B

    公开(公告)日:2022-03-01

    申请号:CN202010245176.9

    申请日:2020-03-31

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种定点突变改造的褐藻胶裂解酶突变体及其应用,属于酶工程技术领域。本发明的褐藻胶裂解酶突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的褐藻胶裂解酶的第212位谷氨酸替换为组氨酸和/或第222位精氨酸替换为赖氨酸。本发明通过分子对接模拟确定褐藻胶裂解酶活性中心氨基酸并进行定点饱和突变改变蛋白质分子活性位点附近氨基酸残基,提高褐藻胶裂解酶催化效率,进一步提高褐藻胶裂解酶产量。本发明构建的褐藻胶裂解酶分泌能力增强的重组大肠杆菌可将褐藻胶裂解酶酶活较出发菌株提高2.83倍。改造后的基因工程菌产酶能力显著提高,摇瓶发酵生产褐藻胶裂解酶酶活达到15000U/mL,更适合工业应用,可降低生产成本,提高生产效率。

    一种提高角蛋白酶异源表达酶活的启动子

    公开(公告)号:CN111763678A

    公开(公告)日:2020-10-13

    申请号:CN202010700382.4

    申请日:2018-08-16

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高角蛋白酶异源表达酶活的启动子,属于工业生物技术领域。本发明成功构建了携带16种不同启动子序列的角蛋白酶重组菌,其中7种能够提高角蛋白酶表达量,PaprE启动子改造重组菌的酶活水平最高,达到2605U/mL,相比对照菌提高20倍。在5L发酵罐上发酵液中角蛋白酶活力高达7176U/mL,是目前文献报道重组角蛋白酶表达的最高水平,能更好地服务于实际应用。本发明为角蛋白酶的高效表达及产酶研究提供了一种有效策略。传统基因工程改造通常需构建高通量筛选方法,进行大量文库筛选,工作量大、周期长、成本高,该改造方法相比传统方法极大的减小了工作量,提高了高表达效率。

    一种提升角蛋白酶异源表达的启动子

    公开(公告)号:CN111763675A

    公开(公告)日:2020-10-13

    申请号:CN202010699002.X

    申请日:2018-08-16

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提升角蛋白酶异源表达的启动子,属于工业生物技术领域。本发明成功构建了携带16种不同启动子序列的角蛋白酶重组菌,其中7种能够提高角蛋白酶表达量,PaprE启动子改造重组菌的酶活水平最高,达到2605U/mL,相比对照菌提高20倍。在5L发酵罐上发酵液中角蛋白酶活力高达7176U/mL,是目前文献报道重组角蛋白酶表达的最高水平,能更好地服务于实际应用。本发明为角蛋白酶的高效表达及产酶研究提供了一种有效策略。传统基因工程改造通常需构建高通量筛选方法,进行大量文库筛选,工作量大、周期长、成本高,该改造方法相比传统方法极大的减小了工作量,提高了高表达效率。

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