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公开(公告)号：CN108753671A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810570043.1
申请日：2018-06-05
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/18 , C12Y301/01074
Abstract: 本发明公开了一种高产角质酶的重组大肠杆菌工程菌及其发酵工艺，属于基因工程以及发酵工程技术领域。本发明以Humicola isnolens来源的角质酶基因为目的基因，pET‑20b(+)为表达载体，E.coli BL21(DE3)为表达载体，成功构建了可高效活性表达角质酶的基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET‑20b(+)/hic；同时，本发明创造性地以重组大肠杆菌基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET‑20b(+)/hic为生产菌株，采用两阶段温度控制工艺、恒定溶氧控制工艺、pH控制工艺、补料分批发酵工艺、高诱导菌体浓度结合高诱导强度的诱导控制工艺相结合的生产工艺以生产角质酶，具有产量高，原料来源广泛，生产成本较低等优势。
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公开(公告)号：CN108707634A
公开(公告)日：2018-10-26
申请号：CN201810569402.1
申请日：2018-06-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种多酶偶联生产海藻糖的方法及其应用，属于酶技术领域。本发明以大米淀粉为底物，利用4‑α糖基转移酶和环糊精葡萄糖基转移酶的歧化活性，采用普鲁兰酶、麦芽寡糖基海藻糖合成酶(MTSase)、麦芽寡糖基海藻糖水解酶(MTHase)、4‑α糖基转移酶(TaAM)以及环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)进行多酶偶联提高底物利用率，从而提高海藻糖的产量。
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公开(公告)号：CN104878033B
公开(公告)日：2018-08-28
申请号：CN201510213072.9
申请日：2015-04-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种促进目标蛋白胞外表达的方法及其应用，属于生物工程技术领域。是将Bacillus cereus磷脂酶C和目标蛋白(包括胞内定位蛋白和胞外定位蛋白)在大肠杆菌中共表达，可提高胞外定位目标蛋白生产强度，实现胞内定位目标蛋白胞外表达，提高生产效率、简化后提取工艺，具有较高的学术意义和应用价值。
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公开(公告)号：CN108384740A
公开(公告)日：2018-08-10
申请号：CN201810145577.X
申请日：2018-02-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种用于高密度发酵的枯草芽孢杆菌，属于生物工程技术领域。本发明采用CRISPR/Cas9基因编辑系统，敲除枯草芽孢杆菌WSH11和CICIM B0629的ppsE、sfp这两个基因，得到突变菌株WSH13和CICIM2。制备枯草芽孢杆菌WSH11、WSH13、CICIM和CICIM24种菌感受态，转化环糊精葡萄糖基转移酶表达质粒，得到4种环糊精葡萄糖基转移酶重组菌，经过摇瓶和3-L罐上罐测定酶活和发酵过程中产泡沫的情况，结果表明以CICIM2为宿主时环糊精葡萄糖基转移酶的表达稍有下降，且发酵过程中，泡沫产量减少不显著。以WSH13为宿主时环糊精葡萄糖基转移酶的表达较好，且发酵过程中，泡沫产量明显减少。
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公开(公告)号：CN108102995A
公开(公告)日：2018-06-01
申请号：CN201810145983.6
申请日：2018-02-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶生产菌株及其固定化方法，属于生物工程技术领域。本发明构建了产D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶的重组枯草芽孢杆菌pHY300PLK‑DPEase，以该重组菌作为生产菌株，固定化细胞后酶活回收率达64％，固定化细胞的最适温度较全细胞提高了5℃，最适pH无明显变化；以300g/L的果糖为底物连续转化7次，转化率仍可达28％，残留酶活还有81％。该固定化方法简单易行，固定化颗粒性能优异，具有很高的工业化应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107236696A
公开(公告)日：2017-10-10
申请号：CN201710637427.6
申请日：2017-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种表达L.mesenteroides来源的蔗糖磷酸化酶重组枯草芽孢杆菌，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过人工合成SPase基因、设计引物、PCR获得Leuconostoc mesenteroides来源蔗糖磷酸化酶目的基因，构建重组质粒pBSMuL3‑SP，并转化至枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(CCTCC M2016536)，得到重组枯草芽孢杆菌。以此枯草芽孢杆菌为菌种，发酵生产SPase。将重组蔗糖磷酸化酶应用于制备α‑熊果苷具有比较好的效果。本发明以食品安全的枯草芽孢杆菌为表达宿主重组表达蔗糖磷酸化酶，产酶水平高，便于分离纯化，且发酵原料来源广泛，生产成本较低。
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公开(公告)号：CN104531652B
公开(公告)日：2017-09-15
申请号：CN201410733876.7
申请日：2014-12-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种添加维生素B6提高谷氨酸脱羧酶产量的方法及应用，属于酶工程和发酵工程技术领域。本发明采用导入了L‑谷氨酸脱羧酶GAD基因的重组大肠杆菌，以半合成培养基、分批补料的发酵方式控制一定的比生长速率，在OD600值为20‑80时进行流加一定浓度乳糖进行诱导产酶，并在诱导过程中添加2‑25mM维生素B6，诱导24h胞内谷氨酸脱羧酶酶活由对照(发酵过程中未添加维生素B6)1293U/mL提高到3300U/mL；本发明还公布了一种利用该发酵工艺的重组酶进行无需添加辅酶生产γ‑氨基丁酸的合成工艺，GABA积累量由对照的190g/L增加到374g/L。
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公开(公告)号：CN104531629B
公开(公告)日：2017-07-21
申请号：CN201410779194.X
申请日：2014-12-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高AA‑2G转化率的环糊精葡萄糖基转移酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。本发明是将嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus NO2)的环糊精葡萄糖基转移酶活性中心附近第228位的赖氨酸突变为精氨酸得到突变体K228R，第367位的天冬氨酸突变成丝氨酸得到突变体D367S，并在此基础上进行双突变得到突变体D367S/K228R。突变体实现了AA‑2G转化效率的提高，具有较高的工业价值。
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公开(公告)号：CN106520634A
公开(公告)日：2017-03-22
申请号：CN201611166592.X
申请日：2016-12-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种根瘤菌及其在海藻糖制备中的应用，属于生物工程和酶工程领域。本发明得到了一株表达麦芽寡糖基海藻糖合成酶及麦芽寡糖基海藻糖水解酶的根瘤菌，该菌所产麦芽寡糖基海藻糖合成酶及麦芽寡糖基海藻糖水解酶最适温度分别为45℃和50℃，在55℃下水浴30h残留酶活菌依然高于50％，两者的最适pH都为7.0，在pH5.0-9.0具有良好的稳定性。用该菌生产的麦芽寡糖基海藻糖合成酶及水解酶制备海藻糖，具有反应温度范围广、低能耗、物料成本低的优势。
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公开(公告)号：CN105386352A
公开(公告)日：2016-03-09
申请号：CN201510791033.7
申请日：2015-11-17
Applicant: 江南大学
CPC classification number: D21C5/027 , D21C5/005 , Y02W30/648 , C09D9/00
Abstract: 本发明公开了一种利用角质酶和化学试剂共同脱墨的方法，属于酶工程技术领域。本发明包括：碎浆，酶处理，化学处理，浆料洗涤脱水，浮选；酶处理使用的是角质酶，用量为10-20U/g绝干浆；所述化学处理是添加0.5-4％的Na2SiO3、0.1-0.8％的MgSO4、0.1-0.8％的EDTA、0.1-4％的H2O2进行处理。本发明通过酶法和化学法的联合脱墨，不仅可以解决目前酶法脱墨存在的酶用量大、成本大的问题，而且化学试剂种类和用量的选择，使酶法和化学试剂法发生协同作用，显著增强了脱墨处理的效果，此外，也不需要使用碱性物质，解决了常规化学法脱墨存在的污水处理的问题。
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