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公开(公告)号：CN115851693B
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202211305811.3
申请日：2022-10-24
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于微生物基因工程和蛋白质工程改造技术领域，具体涉及葡萄糖异构酶突变体及其高产葡萄糖异构酶的地衣芽胞杆菌工程菌及应用。申请人将葡萄糖异构酶第235位氨基酸由亮氨酸变为丙氨酸，通过构建重组表达载体，发现突变体TogI‑L235A的比活力达到了158.7U/mg，相比对照至少提高了16.4%。进一步通过筛选不同信号肽实现葡萄糖异构酶的胞外高效表达，酶活高达42.5U/mL，为工业生产葡萄糖异构酶奠定基础。
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公开(公告)号：CN117947012A
公开(公告)日：2024-04-30
申请号：CN202410207807.6
申请日：2024-02-26
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于酶基因工程技术领域，公开了高活力高热稳定性褐藻胶裂解酶突变体及应用。本发明针对野生型褐藻胶裂解酶，将第76、120、155、263位氨基酸分别替换为S、T、L、E，所得的褐藻胶裂解酶突变体酶活提高了87.41%，在60°C下热处理30 min，相对剩余酶活还有75.54%，显著优于野生型褐藻胶裂解酶，为褐藻胶裂解酶的大规模生产及应用提供理论基础。
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公开(公告)号：CN114807100B
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202210471439.7
申请日：2022-04-28
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种新的高效表达碱性蛋白酶的地衣芽胞杆菌工程菌株的构建及应用。本发明通过对克劳氏芽胞杆菌（Bacillus clausii）来源的碱性蛋白酶进行改造和筛选，获得了适用于地衣芽胞杆菌表达的碱性蛋白酶基因，所述基因为SEQ ID NO.7所示。将该基因在地衣芽胞杆菌BL10中进行表达，使用国标法检测，构得的地衣芽胞杆菌工程菌株的蛋白酶酶活力，该突变株的碱性蛋白酶酶活力达到29114.85 U/mL，相比原始的碱性蛋白酶生产株的酶活提高了19.41%，本发明促进了碱性蛋白酶应用水平的提高。
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公开(公告)号：CN113957072B
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202111174896.1
申请日：2021-10-09
申请人： 湖北大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/75 , C12N15/67 , C12N9/26 , C12R1/10
摘要： 本发明属于基因工程和微生物代谢工程领域，公开了适用于地衣芽孢杆菌的简短终止子及其在高效表达目的产物中的应用。本发明提供了3个适用于地衣芽孢杆菌的简短终止子（T1、T2、T3）。接着，以绿色荧光蛋白GFP、红色荧光蛋白RFP和α‑淀粉酶为目的蛋白为例，进行蛋白表达，与终止子TamyL相比，发现终止子T1均可有效提高蛋白产量，其分别使GFP、RFP和α‑淀粉酶产量提高43.6%、48.0%和34.5%。最后，将终止子T1应用于代谢工程中，与对照菌株相比，通过将其应用于代谢途径强化使聚γ‑谷氨酸产量提高了33.8%。
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公开(公告)号：CN115058400B
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202210409803.7
申请日：2022-04-19
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于生物技术领域，具体公开了来自于玫瑰的糖基转移酶RrUGT3在生物合成天麻素中的应用，所述的糖基转移酶RrUGT3的序列为SEQ ID NO.2所示。将编码SEQ ID NO.2的基因转入地衣芽胞杆菌中，在发酵培养基中添加对羟基苯甲醇进行发酵，即可获得生物发酵的天麻素，能高效且专一性转化对羟基苯甲醇合成天麻素，为微生物转化法工业化生产天麻素奠定基础。
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公开(公告)号：CN115851693A
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202211305811.3
申请日：2022-10-24
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于微生物基因工程和蛋白质工程改造技术领域，具体涉及葡萄糖异构酶突变体及其高产葡萄糖异构酶的地衣芽胞杆菌工程菌及应用。申请人将葡萄糖异构酶第235位氨基酸由亮氨酸变为丙氨酸，通过构建重组表达载体，发现突变体TogI‑L235A的比活力达到了158.7U/mg，相比对照至少提高了16.4%。进一步通过筛选不同信号肽实现葡萄糖异构酶的胞外高效表达，酶活高达42.5U/mL，为工业生产葡萄糖异构酶奠定基础。
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公开(公告)号：CN114921431A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210490385.9
申请日：2022-05-05
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及糖基转移酶突变体及其在发酵生产芳香醇糖苷中的应用，所述突变体的氨基酸为SEQ ID NO.1所示。相比野生型，突变体T9(A13W/I67F/A80W)或者表达其的微生物可催化酪醇，对羟基苯甲醇通过糖基转移反应来制备高纯度的芳香醇糖苷，区域选择性大于90％，因此本发明提供的突变体在芳香醇糖苷的合成方面具有应用价值，可减少分离纯化目标产物的成本。
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公开(公告)号：CN113106095B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202110392656.2
申请日：2021-04-13
申请人： 湖北大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/75 , C12N15/77 , C12N15/67
摘要： 本发明属于基因工程和微生物工程技术领域，公开了用于增加革兰氏阳性菌翻译起始位点的序列及其在提高蛋白表达效率中的应用，所述的序列为SEQ ID NO.1所示。本发明通过改造启动子的5’非翻译区，从而促使目的基因从多个翻译起始位点进行翻译。在地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌中，绿色荧光蛋白的表达量较原始启动子P43启动子分别提高了约150倍和126倍。在谷氨酸棒杆菌中，绿色荧光蛋白的表达量较原始启动子提高了36倍。同时，该mRNA前导序列也显著提高了地衣芽孢杆菌中角蛋白酶的表达量，证明了该序列对于提高革兰氏阳性菌蛋白表达效率的普适性。
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公开(公告)号：CN111926013B
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202010829306.3
申请日：2020-08-18
申请人： 湖北大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N9/50 , C12P21/00 , C12P13/02 , C12R1/10
摘要： 本发明涉及基因工程和微生物代谢工程领域，公开了适用于地衣芽胞杆菌的启动子及其在高效表达目的产物中的应用，本发明人工设计了四种适用于地衣芽胞杆菌的启动子（R1‑R4）。接着，以绿色荧光蛋白GFP、角蛋白酶KER为目的蛋白，与启动子P43相比，研究发现启动子R2效果最佳，显著提高了GFP、KER的表达水平，其中GFP产量提高63.5倍，KER酶活提高7.8倍。最后，将启动子R2应用于代谢工程中，与对照菌株相比，通过将其应用于代谢途径强化使聚γ‑谷氨酸、杆菌肽的产量分别提高了52.09％和20.39％。
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公开(公告)号：CN113106095A
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN202110392656.2
申请日：2021-04-13
申请人： 湖北大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/75 , C12N15/77 , C12N15/67
摘要： 本发明属于基因工程和微生物工程技术领域，公开了用于增加革兰氏阳性菌翻译起始位点的序列及其在提高蛋白表达效率中的应用，所述的序列为SEQ ID NO.1所示。本发明通过改造启动子的5’非翻译区，从而促使目的基因从多个翻译起始位点进行翻译。在地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌中，绿色荧光蛋白的表达量较原始启动子P43启动子分别提高了约150倍和126倍。在谷氨酸棒杆菌中，绿色荧光蛋白的表达量较原始启动子提高了36倍。同时，该mRNA前导序列也显著提高了地衣芽孢杆菌中角蛋白酶的表达量，证明了该序列对于提高革兰氏阳性菌蛋白表达效率的普适性。
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