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公开(公告)号：CN111955419B
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN202010894845.5
申请日：2020-08-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: A01K67/02
Abstract: 本发明属于家畜流行病领域，涉及猪流行性腹泻病毒（PEDV）与猪δ冠状病毒（PDCoV），特别是指PDCoV和PEDV共感染仔猪发病模型及其建立方法和应用。建立方法步骤如下：PDCoV和PEDV毒株的选择；选用5日龄健康仔猪，通过口服途径接种PDCoV毒株和PEDV毒株细胞的混合液；攻毒后每天测量体重、观察临床症状、并通过荧光定量PCR方法分别检测粪便排毒情况和小肠组织中的病毒载量并进行综合评价，建立PDCoV和PEDV共感染仔猪发病模型。本申请成功建立了PDCoV和PEDV共感染仔猪模型，为后续PDCoV与PEDV协同致病机理研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN104774935B
公开(公告)日：2017-06-16
申请号：CN201510154093.8
申请日：2015-04-02
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测TLR2/4介导的NF‑κB信号通路中关键分子含量的特异性引物，序列如下：用于对TLR2进行定量PCR的特异性引物，序列如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2所示，该序列与猪TLR2mRNA的一段互补。本发明的有益效果是：TLR2/4介导的MyD88依赖型NF‑κB信号通路中关键分子的差异表达在抗病毒的研究中有着至关重要的作用，对病毒性疾病的防治具有重要意义。通过本发明设计，各种引物的反应温度都进行了标准化，片段长度也进行了标准化，所有的mRNA定量均可以在相同条件下完成，使不同的实验间具有可比性。
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公开(公告)号：CN105483291A
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201511021732.X
申请日：2015-12-31
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2537/143 , C12Q2521/107
Abstract: 本发明公开了一种猪德尔塔冠状病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒多重RT-PCR检测引物。本发明多重RT-PCR对这3种病毒的最低检测量分别是4.05×101拷贝/μL、4.52×103拷贝/μL和5.47×103拷贝/μL，而对猪细小病毒（PPV），猪伪狂犬病毒（PRV）的扩增结果均为阴性。57份临床样品的多重RT-PCR检测结果显示，有1份同时感染这3种病毒，11份样品感染PDCoV，15份样品感染PEDV，1份样品感染TGEV，5份样品感染PDCoV和PEDV，1份样品感染PDCoV和TGEV。
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公开(公告)号：CN104946777A
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201510406020.3
申请日：2015-07-10
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q1/6851 , C12Q1/6883 , C12Q2600/158 , C12Q2561/101 , C12Q2545/114 , C12Q2531/113 , C12Q2545/101
Abstract: 本发明公开了一种检测TLR2/4介导的NF-κB信号通路中关键分子含量的特异性引物，序列如下：用于对TLR9进行定量PCR的特异性引物，序列如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2所示，该序列与猪TLR9 mRNA的一段互补。本发明有效的缩短实验时间、减少经费的使用等。通过优化的实验反应体系和反应条件，组成检测灵敏、方便的试剂盒，为TLR9介导的MyD88依赖型NF-κB信号通路中关键分子提供可靠的检测技术。
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公开(公告)号：CN103276010A
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201310241920.8
申请日：2013-06-19
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪α-干扰素复合制剂的制备方法，它的步骤如下：（1）人工合成150bp的短小乳酸杆菌信号肽序列，构建出pUCK-SP载体；（2）构建出pUCK-SP-IFN-α质粒，pUCK-SP-IFN-α质粒经NdeⅠ和EcoRI酶切，回收SP-IFN-α片段；（3）构建干酪乳酸杆菌复制型表达质粒pIAbeta8-plac-SP-IFN-α；（4）通过电转化方法，得到猪α-干扰素复合制剂；本发明拟将猪IFN-α基因导入干酪乳酸杆菌中，从而获得能表达猪IFN-α的干酪乳酸杆菌。这样的菌株集抗病毒、抗菌作用于一身，且可通过口服途径饲喂动物，十分方便。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102373299B
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201110221752.7
申请日：2011-08-04
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种PCV2、PRV与SIV H9亚型多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法，SIV H9亚型引物的序列如下：上游引物P1：5′-GGAACAACGCTTACCCTG-3′；下游引物P2：5′-GAGACCATTGACAAGAGGC-3′；PRV引物的序列如下：上游引物P3：5′-GGCATCGGCGACTACCT-3′；下游引物P4：5′-CGTCGTGCAGCGTGTAGAG-3′；PCV2引物的序列如下：上游引物P5：5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′；下游引物P6：5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′。本发明分别设计扩增SIV H9亚型、PCV2和PRV的特异性引物，通过三重SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法能够同时检测SIV H9亚型、PCV2和PRV。SIV H9亚型、PCV2和PRV同时检出的极限拷贝数分别为184拷贝/μL，207拷贝/μL，193拷贝/μL。本发明的特异性试验结果良好，只出现三个特异性的峰值，重复性试验具有很好的稳定性并且本试验的最大优势在于能够同时检测SIV H9亚型、PCV2和PRV3种DNA病毒，有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒的鉴别。
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公开(公告)号：CN103045543A
公开(公告)日：2013-04-17
申请号：CN201210522326.1
申请日：2012-12-07
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪传染性胃肠炎病毒毒株，其特征在于：猪传染性胃肠炎病毒（swine transmissible gastroenteritis virus），CCTCC NO：V201216。本发明的猪传染性胃肠炎病毒灭活后免疫猪只，可以给猪提供有效的保护，是一株比较理想的制苗候选毒株。
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公开(公告)号：CN102071256B
公开(公告)日：2012-08-29
申请号：CN200910172716.9
申请日：2009-11-25
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了猪伪狂犬病毒与猪圆环病毒2型二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法，设计与合成出引物，利用引物检测猪伪狂犬病毒与猪圆环病毒2型的二重SYBRGreen I实时荧光PCR检测方法，包括提取样品的DNA后，利用SYBR Green I实时荧光PCR反应体系和SYBR Green I实时荧光PCR扩增程序对样品进行检测。本发明能够同时检测出猪伪狂犬病毒与猪圆环病毒2型两种DNA病毒，不能检测出猪细小病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流感病毒。本发明具有较好的敏感性、重复性与稳定性，有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒病的鉴别与诊断。
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公开(公告)号：CN102373296A
公开(公告)日：2012-03-14
申请号：CN201110221712.2
申请日：2011-08-04
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种PRRSV、SIV H9亚型与PCV2多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR·引物，SIV H9亚型引物的序列如下：上游引物P1：5′-GGAACAACGCTTACCCTG-3′；下游引物P2：5′-GAGACCATTGACAAGAGGC-3′；PRRSV引物的序列如下：上游引物P3：5′-AAACCAGTCCAGAGGCAAG-3′；下游引物P4：5′-CCACAGTGTAACTTATCCTC-3′；PCV2引物的序列如下：上游引物P5：5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′；下游引物P6：5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′。本发明分别设计扩增PRRSV、SIV H9亚型和PCV2的特异性引物，通过三重SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法能够同时检测出PRRSV、SIV H9亚型和PCV2，PRRSV、SIV H9亚型和PCV2同时检出的极限拷贝数分别为187拷贝/μL，191拷贝/μL，203拷贝/μL。本发明的特异性试验结果良好，只出现三个特异性的峰值，重复性试验具有很好的稳定性并且本试验的最大优势在于能够同时检测PRRSV、SIV H9亚型和PCV23种DNA病毒，有利于这3种病毒的鉴别。
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公开(公告)号：CN102274523A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110221729.8
申请日：2011-08-04
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明的技术方案是：一种猪圆环病毒II型核酸疫苗，在真核表达载体pIRES的2个多克隆位点中分别插入了猪圆环病毒II型LY株ORF2和猪IL-18基因，所述核酸疫苗共表达猪圆环病毒II型LY株Cap和猪IL-18蛋白。本发明经PCR、双酶切及测序鉴定，证明成功构建了共表达质粒pIRES-ORF2/PIL18。将构建成功的重组质粒pIRES-ORF2/PIL18用脂质体法转染猪肾PK-15细胞，以RT-PCR和间接免疫荧光检测目的蛋白的表达情况。经RT-PCR检测到两种目的基因的转录；间接免疫荧光试验检测到ORF2蛋白在细胞浆和细胞核中观察到了特异性的亮绿色荧光，证明蛋白得到表达。
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