一种CRISPR系统及其在高山被孢霉中的应用

    公开(公告)号:CN112592926A

    公开(公告)日:2021-04-02

    申请号:CN202011576687.5

    申请日:2020-12-28

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种CRISPR系统及其在高山被孢霉中的应用,属于生物工程技术领域技术领域。本发明采用的核酸酶为毛螺科菌(Lachnospiraceae bacterium)的LbCpf1,所使用的诱导型启动子为里氏木霉(Trichoderma reesei)中的cbh1,所选靶向基因为尿嘧啶基因ura5,所用的出发菌株为高山被孢霉尿嘧啶营养缺陷型MAU1,本发明提供的基于CRISPR技术的高山被孢霉系统,可实现生物量和产脂含量与野生菌无显著性差异,并可以实现多基因表达,此方法将为构建高工业价值的重组高山被孢霉提供技术手段。

    一种提高高山被孢霉产不饱和脂肪酸能力的方法

    公开(公告)号:CN108841734B

    公开(公告)日:2021-01-29

    申请号:CN201810724106.4

    申请日:2018-07-04

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高高山被孢霉产不饱和脂肪酸能力的方法,属于微生物以及基因工程技术领域。本发明以亚甲基四氢叶酸脱氢酶(MTHFDL)基因为目的基因,以pBIG2‑ura5s‑ITs为表达载体,以高山被孢霉尿嘧啶营养缺陷型菌株CCFM501为宿主菌株,通过根癌农杆菌介导的方法过表达MTHFDL基因,构建了一种生产不饱和脂肪酸能力提升的重组高山被孢霉工程菌,其总脂含量相比原养型高山被孢霉提高了35.6%,同时NADPH的含量提高了26.2%。本发明深入解析高山被孢霉脂质合成机理,为生产功能性脂质的细胞工厂提供理论依据。

    一种3-磷酸甘油醛脱氢酶及其应用

    公开(公告)号:CN110029092B

    公开(公告)日:2020-09-04

    申请号:CN201910354968.7

    申请日:2019-04-29

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种3‑磷酸甘油醛脱氢酶及其应用,属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的3‑磷酸甘油醛脱氢酶具有促进微生物产甘油三酯(TAG)的功能,将含有本发明3‑磷酸甘油醛脱氢酶的重组高山被孢霉摇床培养7d,可使含有本发明3‑磷酸甘油醛脱氢酶的高山被孢霉中的总脂肪酸含量以及多不饱和脂肪酸含量分别较不含本发明3‑磷酸甘油醛脱氢酶的高山被孢霉提升12.56%以及12.79%,该结果为通过基因工程手段进一步提升高山被孢霉等产油微生物产甘油三酯(TAG)的能力,进而提高微生物产多不饱和脂肪酸(PUFAs)的能力提供了充实的理论支持。

    一种3-磷酸甘油醛脱氢酶及其应用

    公开(公告)号:CN110029092A

    公开(公告)日:2019-07-19

    申请号:CN201910354968.7

    申请日:2019-04-29

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种3-磷酸甘油醛脱氢酶及其应用,属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的3-磷酸甘油醛脱氢酶具有促进微生物产甘油三酯(TAG)的功能,将含有本发明3-磷酸甘油醛脱氢酶的重组高山被孢霉摇床培养7d,可使含有本发明3-磷酸甘油醛脱氢酶的高山被孢霉中的总脂肪酸含量以及多不饱和脂肪酸含量分别较不含本发明3-磷酸甘油醛脱氢酶的高山被孢霉提升12.56%以及12.79%,该结果为通过基因工程手段进一步提升高山被孢霉等产油微生物产甘油三酯(TAG)的能力,进而提高微生物产多不饱和脂肪酸(PUFAs)的能力提供了充实的理论支持。

    一种二酰甘油酰基转移酶1及其在生产甘油三酯中的应用

    公开(公告)号:CN109837256A

    公开(公告)日:2019-06-04

    申请号:CN201910216803.3

    申请日:2019-03-21

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种二酰甘油酰基转移酶1及其在生产甘油三酯中的应用,属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的二酰甘油酰基转移酶1具有催化甘油三酯(TAG)合成的功能,将含有本发明二酰甘油酰基转移酶1的重组酿酒酵母诱导培养48h,可使含有本发明二酰甘油酰基转移酶1的重组酿酒酵母中的总脂肪酸含量以及甘油三酯含量分别较不含本发明二酰甘油酰基转移酶1的酿酒酵母提升1.94倍以及12.09倍,该结果为通过基因工程手段进一步提升高山被孢霉等产油微生物产甘油三酯(TAG)的能力,进而提高微生物产多不饱和脂肪酸(PUFAs)的能力提供了充实的理论支持。

    一种基于溶氧与pH调控高山被孢霉产EPA的发酵方法

    公开(公告)号:CN109811017A

    公开(公告)日:2019-05-28

    申请号:CN201910205750.5

    申请日:2019-03-18

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于溶氧与pH调控高山被孢霉产EPA的发酵方法,属于微生物发酵领域。本发明采用适宜的富氧空气策略满足菌体生长及产物积累的溶氧需求;在菌体生长期利用氨水调控pH,同时也起到了部分N源的作用,促使菌体快速生长;此外,采用分阶段调控pH的策略在菌体生长阶段与脂质积累阶段分阶段调控适宜的pH,进一步提高了EPA产量。整个发酵采用分批补料的发酵方式,其中初始葡萄糖浓度为30g/L,通过补料维持残糖浓度10-30g/L。在7.5L发酵罐中发酵10天最终得到DCW 41.2g/L,总脂占菌干重31.5%,EPA占总脂26.7%,EPA产量可高达3.47g/L。

    n-3多不饱和脂肪酸在制备预防沙门氏菌感染药物中的应用

    公开(公告)号:CN109646430A

    公开(公告)日:2019-04-19

    申请号:CN201811602033.8

    申请日:2018-12-26

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了n-3多不饱和脂肪酸在制备预防沙门氏菌感染药物中的应用,属于预防沙门氏菌感染领域。本发明通过沙门氏菌感染动物模型验证,n-3多不饱和脂肪酸可显著降低死亡率,使得小鼠感染沙门氏菌的存活率从对照组的56%提高到了75%,提升33%。此外,n-3多不饱和脂肪酸价格低廉,来源广泛,是常用的营养补品,安全稳定,还有重多健康益,如可预防心脑血管疾病、肥胖、代谢综合症等;可在沙门氏菌爆发期,但尚未出现感染症状时补充n-3多不饱和脂肪酸来预防沙门氏菌感染或减缓病程,减少抗生素使用,避免抗生素带来的负面作用,且易于操作,具有很好的应用前景。

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