一种从梨果肉中提取纯化木质素的方法

    公开(公告)号:CN102219909B

    公开(公告)日:2014-11-26

    申请号:CN201110104453.5

    申请日:2011-04-25

    Abstract: 本发明公开了一种从梨果肉中提取纯化木质素的方法,通过果肉组织切块、烘干、粉碎后,经苯-乙醇或丙酮预处理,用二氧六环-水进行回流提取,浓缩提取物再经吡啶-冰醋酸-水的混合液溶解,二氯甲烷萃取后乙醚沉淀获得精制纯化的木质素。本发明一方面解决梨果肉木质素提取得率和纯度低的问题,弥补了木质素研究主要集中在木材上,而对梨果实中木质素研究的空白;另一方面为梨果实中木质素的结构检测做了良好的准备,也为梨果实石细胞虽然有木质素的沉积,但木质素强度低、仍能食用的原因和特点的进一步研究提供了一个实验平台。

    一种拟南芥Mo敏感变异株筛选培养基及筛选方法

    公开(公告)号:CN104145811A

    公开(公告)日:2014-11-19

    申请号:CN201410406815.X

    申请日:2014-08-18

    Abstract: 一种拟南芥Mo敏感变异株的筛选方法以及筛选所用的培养基和培养方法。此方法筛选出拟南芥Mo敏感的突变体。筛选所用的培养基包括不含钼(-Mo)和含170nM钼(+Mo)的固体培养基。培养方法是:拟南芥M2种子先用75%的酒精浸泡30s,然后在1%次氯酸钠中浸泡10min,最后用无菌去离子水冲洗5-6次,消毒后的种子接种于-Mo或+Mo培养基上,经过4℃春化2天后,置于22℃、16h/8h光暗交替的光照培养箱中垂直培养。筛选方法是:以EMS诱变处理野生型拟南芥Col-0获得的M2代种子为试验材料,通过在-Mo和+Mo的培养基上进行反复筛选培养,根据拟南芥根系在两种培养基上的生长差异筛选出在-Mo培养基上根生长不好而在+Mo培养基上根生长很好的拟南芥Mo敏感变异株,并对其表型进行了分析。

    一种梨果肉中木质素含量的检测分析方法

    公开(公告)号:CN102608054B

    公开(公告)日:2014-02-12

    申请号:CN201210051961.6

    申请日:2012-03-01

    Abstract: 本发明公开了一种梨果肉中木质素含量的检测分析方法,其步骤包括首先对待检测的梨果肉的冷冻处理、然后进行匀浆粉碎、过筛,清洗以去除可溶性杂质,之后用酸化乙酰溴消化水解梨果肉细胞溶解木质素,再将消化水解后的溶液中加入氢氧化钠和盐酸羟胺终止反应,再将溶液离心处理以消除杂质和沉淀对吸光度测定的影响,最后用紫外分光光度计在280nm处测定吸光度值,代入公式计算木质素含量。本发明为梨果实果肉中含量相对较低的木质素提供了一种分析结果正确、分析速度快、操作简单、灵敏度高、重现性好的分析方法。

    一种快速鉴定烟草抗性基因的有效方法

    公开(公告)号:CN103409500A

    公开(公告)日:2013-11-27

    申请号:CN201310173307.7

    申请日:2013-05-10

    Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定烟草抗性基因的有效方法,本发明所用的农杆菌株系为GV3101(pMP90),属根癌农杆菌,在烟草的遗传转化中效果比较好。采用的转化方法是电击转化法,而不是常用的冻融法或热激法,使用伯乐公司的电转化仪,其转化参数为0.1cm电击杯、输出25mF、电压1.8kV和抗性200W,提高了转化效率;本发明所用的培养基是最常用的LB培养基,而不是较复杂的YEP或YEB培养基,且所加抗生素分别为25mg/mL卡那霉素和50mg/mL利福平,可以有效的杀死没有转化成功的农杆菌,节省了筛选时间。

    促进石斛移栽试管苗速生优质的石斛营养液配方及其应用

    公开(公告)号:CN103030466A

    公开(公告)日:2013-04-10

    申请号:CN201210591523.9

    申请日:2012-12-29

    Abstract: 本发明公开了促进石斛移栽试管苗速生优质的石斛营养液配方及其应用。该营养液以体积比含有如下组分:Knudson C培养基大量元素70-75%、微量元素8-15%;200mg/mL生长激素NAA 0.75-1.25%、质量分数0.6-0.7%的多菌灵抗菌剂15-20%。本发明通过对移栽前试管苗进行浸根处理,在移栽后每天喷雾水1次,每周喷石斛营养液1次,以促进栽培苗速生优质。本发明解决了试管苗移栽成活率低和生长缓慢两大难题,既提高了石斛试管苗移栽成活率,又促进石斛栽培苗速生、高产、稳产、优质,为建立石斛人工大面积栽培基地,实现石斛产业化生产提供了技术支持。

    一种松柏醇和松脂醇的同步检测方法

    公开(公告)号:CN109781905B

    公开(公告)日:2021-08-31

    申请号:CN201910196937.3

    申请日:2019-03-15

    Abstract: 本发明涉及物质分离检测领域,提供了一种松柏醇和松脂醇的同步检测方法,首先,采用高效液相色谱法测定待测样品中的松柏醇与松脂醇的吸光度,其中,检测波长为280nm;所述高效液相色谱法采用梯度洗脱,梯度洗脱中的洗脱剂包括甲醇和水;然后根据松柏醇的标准曲线和待测样品中松柏醇的吸光度,得到所述待测样品中松柏醇的浓度;根据松脂醇的标准曲线和待测样品中松脂醇的吸光度,得到所述待测样品中松脂醇的浓度。本发明提供的方法能够有效分离待测样品中的松柏醇与松脂醇,并分别检测出松柏醇与松脂醇的相应浓度。

    一种梨转录因子PbBP及其应用

    公开(公告)号:CN109161553A

    公开(公告)日:2019-01-08

    申请号:CN201811148204.4

    申请日:2018-09-29

    Abstract: 本发明公开了一种梨木质素合成调控PbBP基因,所述梨木质素合成调控PbBP基因具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,命名为PbBP,所述PbBP基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,核苷酸长度为1194bp,氨基酸长度为397个氨基酸。调控基因PbBP及其编码蛋白应用在植物中合成木质素基因表达方面。本发明PbBP基因具有负调控作用,可以直接通过抑制植物木质素合成基因的表达从而阻碍其木质素的生物合成,减缓细胞壁发育,降低木质化程度,以提高梨果肉品质。

    一种砀山酥梨直接器官发生型再生途径的构建方法

    公开(公告)号:CN109156359A

    公开(公告)日:2019-01-08

    申请号:CN201811244722.6

    申请日:2018-10-24

    Abstract: 本发明提供了一种砀山酥梨直接器官发生型再生途径的构建方法,步骤如下:(1)外植体的获取:来源两种,一种为叶龄在20~50d的砀山酥梨组培苗叶片;另一种,先利用梨种无菌播种,再采用无菌实生苗的叶片作为外植体;(2)外植体的预处理:在梨叶片中脉横切2~4个刀口,再置于预培养培养基暗培养;(3)不定芽的诱导及增殖:将叶片接种至诱导培养基上暗培养,再转至光周期培养室诱导不定芽;剪下不定芽,接种至增殖培养基。本发明首次建立了遗传稳定的砀山酥梨叶片直接再生体系,叶片再生率达78.6%,平均每叶产生不定芽数3.8,褐化率0;此方法不仅可由梨叶片器官直接产生大量不定芽,还具有遗传稳定、周期短、成本低等优势。

    基于UPLC/LTQ-Orbitrap Velos MS检测石斛生物碱成分的方法

    公开(公告)号:CN106501437B

    公开(公告)日:2017-11-24

    申请号:CN201611221950.2

    申请日:2016-12-27

    Abstract: 本发明提供了基于UPLC/LTQ‑Orbitrap Velos MS检测石斛生物碱成分的方法,通过超声处理,并用纯甲醇溶液进行提取,针对生物碱成分的化学性质,采用酸水溶解甲醇提取物,并进一步碱化,使生物碱盐转变为游离的生物碱,利用二氯甲烷溶液进行萃取,用超高效液相色谱分离所述游离生物碱待测样品,将分离后的生物碱成分用质谱检测;采用OSI/SMMS软件完成未知代谢物定性。本发明首次采用UPLC/LTQ‑Orbitrap Velos MS技术对石斛中生物碱成分进行定性检测,共鉴定出22种生物碱成分,且均首次在石斛中被分离检测出,明确了石斛生物碱成分的类型,为研究其药理作用奠定了理论基础。

    一种检测铁皮石斛中石斛酚的方法

    公开(公告)号:CN106680403A

    公开(公告)日:2017-05-17

    申请号:CN201611261842.8

    申请日:2016-12-30

    CPC classification number: G01N30/06

    Abstract: 本发明公开了一种检测铁皮石斛中石斛酚的方法,包括以下步骤:(1)标准品溶液的配制;(2)供试品溶液的配制:称取铁皮石斛样品,然后用甲醇水溶液作为提取溶剂对铁皮石斛样品进行提取,得到铁皮石斛提取液,之后将铁皮石斛提取液中的溶剂除干,再复溶于色谱级甲醇中,然后放置12~24小时,最后进行过滤处理,所得的滤液即为供试品溶液;(3)供试品溶液的测定:采用HPLC‑DAD检测方法对标准品溶液和供试品溶液进行检测。本发明工艺简单,操作方便、高效,应用成本低,而且检测灵敏度和准确度高。本发明采用甲醇水溶液作为提取剂,既能高效提取石斛酚,又能避免过多大极性杂质的干扰。本发明确定了石斛酚24.107min~24.352min,230nm~300nm处有最大吸收峰。

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