新城疫新型可视化重组酶聚合酶常温扩增核酸试纸条检测试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN108841996A

    公开(公告)日:2018-11-20

    申请号:CN201810354518.3

    申请日:2018-04-19

    Abstract: 本发明公开一种检测新城疫病毒的重组酶常温扩增(RT-RPA)核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.7所示的引物及探针和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法为:首先配置RT-RPA反应体系,进行常温恒温反应;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内;阴性结果仅在质控区一条红色条带,在检测区内无红色条带出现。本发明首次采用RPA-核酸试纸条技术建立快速检测新城疫病毒的方法,具有操作简单,特异性高,且反应结果易于观察,安全无污染等特点,非常适用于临床现场检测。

    一种猪细小病毒毒株及其应用

    公开(公告)号:CN107686833A

    公开(公告)日:2018-02-13

    申请号:CN201710254163.6

    申请日:2017-04-18

    Abstract: 本发明公开一种猪细小病毒毒株及其应用,属于疫苗领域。该病毒是从广东地区采集并分离得到的,经鉴定,命名为猪细小病毒PPVGD株,于2016年03月18日保藏于中国.武汉.武汉大学的中国典型培养物保藏中心,保藏编号:CCTCC NO:V201618。其全基因序列如SEQ ID NO:1所示。将PPVGD株制备的灭活疫苗接种豚鼠后,28d后,测HI抗体效价的几何平均为1:194;接种四月龄的猪细小病毒抗体阴性的猪,在免疫28d后,测HI,抗体效价的几何平均约为1:147。可知,本发明表明了以广东分离株PPVGD株制备的灭活疫苗接种豚鼠和后备母猪后具有良好的免疫原性,且略高于商品化的灭活疫苗。

    羊布鲁氏菌重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA及制备方法与应用

    公开(公告)号:CN103667334B

    公开(公告)日:2015-12-09

    申请号:CN201310542901.9

    申请日:2013-11-05

    Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA及制备方法与应用。本发明以羊布鲁氏菌M5基因组为模板,PCR得到znuA基因的上、下游同源臂,并将其连接,得到片段ΔznuA;将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上,得到重组质粒pRE-ΔznuA;将该质粒导入羊布鲁氏菌M5-Δbp26细胞中,分别通过氯霉素和蔗糖选择培养基筛选,得到同源重组双交换子,为重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA。该菌株较M5亲本菌株,生长特性一致,遗传稳定使其不易返祖,毒力小且免疫效果保持良好,并因bp26基因缺失标记可应用于区分检测自然感染或人工免疫。因此,该菌株可作为一种效果更佳的标记疫苗应用于临床。

    牛布鲁氏菌重组菌株S19-Δbp26-BL及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN103289986B

    公开(公告)日:2015-09-30

    申请号:CN201310153715.6

    申请日:2013-04-27

    Abstract: 本发明公开一种牛布鲁氏菌重组菌株S19-Δbp26-BL及其制备方法与应用。本发明以牛布鲁氏菌S19基因组DNA为模板,得到bp26基因的上游同源臂,BLS基因、L7/L12基因和bp26基因的下游同源臂;将前述基因片段依次连接,得到片段Δbp26-BL;分别对pRE112和Δbp26-BL双酶切,连接,得到自杀性同源重组质粒;将该质粒导入S19-Δbp26菌株的感受态细胞中,在氯霉素的选择压力下,得到同源重组单交换子,再将同源重组单交换子涂布于选择培养基上培养,获得牛布鲁氏菌重组菌S19-Δbp26-BL。该菌株具有良好的遗传稳定性,生长特性和毒力大小好,可作为一种标记疫苗株用于临床。

    抗口蹄疫病毒复制与感染的生物制剂及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN102512694B

    公开(公告)日:2013-11-13

    申请号:CN201210004296.5

    申请日:2012-01-06

    Abstract: 本发明公开一种抗口蹄疫病毒复制与感染的生物制剂及其制备方法与应用。该生物制剂的活性部分为siRNA-VP1和siRNA-2B;siRNA-VP1的转录模板的正义链的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;siRNA-2B的转录模板的正义链的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明通过将siRNA-VP1的转录模板和siRNA-2B的转录模板分别与U6启动子连接,克隆入人复制缺陷型5型腺病毒质粒载体pAdeno-X,得到能分别转录、串联结构的质粒;接着通过包装细胞包装,得到该重组腺病毒Adeno-2B-VP1。通过实验证实,重组腺病毒Adeno-2B-VP1的防治效果优于重组腺病毒Adeno-2B和Adeno-VP1分别单独应用或联合应用的效果。该生物制剂能有抑制口蹄疫病毒复制和抗口蹄疫病感染。

    抗口蹄疫病毒复制与感染的重组腺病毒及制备与应用

    公开(公告)号:CN102586198B

    公开(公告)日:2013-07-31

    申请号:CN201210016518.5

    申请日:2012-01-17

    Abstract: 本发明公开一种抗口蹄疫病毒复制与感染的重组腺病毒及其制备与应用。本发明通过将siRNA-3D的转录模板、siRNA-L的转录模板、siRNA-2B的转录模板与siRNA-VP1的转录模板分别与U6启动子连接,克隆入载体pAdeno-X,得到能分别转录、串联结构的质粒,再将该质粒线性化后通过包装细胞包装,得到重组腺病毒rAdeno-3D-L-2B-VP1。该重组腺病毒rAdeno-3D-L-2B-VP1的防治效果优于重组腺病毒rAdeno-2B-VP1应用的效果。可见,本发明提供的重组质粒能有效抑制口蹄疫病毒复制和抗口蹄疫病感染。

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