人乳腺癌细胞乙酰化p53蛋白同位素标记定量方法

    公开(公告)号:CN103743808A

    公开(公告)日:2014-04-23

    申请号:CN201410022161.0

    申请日:2014-01-17

    Abstract: 本发明属于分析领域,涉及乳腺癌细胞内源性生物大分子乙酰化p53蛋白同位素定量分析,利用免疫共沉淀,凝胶电泳等技术手段对细胞复杂基质样品中乙酰化p53蛋白进行提取分离纯化。步骤如下:利用重组人p53蛋白、乳腺癌细胞内p53蛋白经胰蛋白酶水解产生的特异性肽段进行定性定量的策略,以特异性肽段序列内氨基酸进行稳定碳13、氮15同位素标记的合成肽段为内标,实现了对乳腺癌细胞样品中DNA结合区特异性位点乙酰化p53蛋白的定量。本发明主要包括样品提取及凝胶电泳方法、Obitrap测定方法、标准曲线的制备和精密度测定。本发明方法线性关系良好、准确度高、重现性好,可用于乙酰化p53蛋白在细胞内的定量。

    瑞格列奈缓释制剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN103565768A

    公开(公告)日:2014-02-12

    申请号:CN201310418028.2

    申请日:2013-09-11

    Abstract: 本发明涉及一种日服1次的瑞格列奈缓释制剂及其制备方法。它包括给比格犬口服单位剂量的固体缓释制剂(含瑞格列奈3mg),在服用后1.1至3.1小时该制剂给出平均最大血药浓度120至300ng/mL,在服用12小时内该制剂具有显著的降血糖作用。该新颖口服制剂可实现瑞格列奈延迟释放,获得平稳的血药浓度;延长降血糖作用时间,减少服用次数,提高患者用药顺应性。

    一种新的基于同系/类似化合物结构-质谱响应关系研究的不依赖标准品的定量分析方法

    公开(公告)号:CN103018317A

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201310000004.5

    申请日:2013-01-04

    Abstract: 本技术发明属于分析领域,涉及同系/类似化合物的定量分析,特别是复杂基质样品中不存在标准品的化合物定量分析。步骤如下:1.选取一系列同系/类似化合物进行其质谱定量方法学研究及考证;2.根据在建立的各化合物的标准曲线,进行截距为零的线性拟合;3.用分子模拟软件对化合物进行结构优化,计算相关的分子描述符;4.用分子模拟软件进行化合物结构与质谱响应之间关系的建立及验证;5.应用相关质谱技术对复杂基质样品进行定性分析;6.根据先前建立的结构-质谱响应关系方程,计算所鉴定出系列化合物的线性拟合标准曲线的斜率;7.用该系列化合物的拟合标准曲线,求得其在复杂基质样品中的浓度,即实现不依赖于标准品的定量分析。

    丹参酮IIA通过FOXO1途径发挥抗肿瘤作用机制的应用

    公开(公告)号:CN103006669A

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201310000003.0

    申请日:2013-01-04

    Abstract: 本发明涉及天然药物领域,具体涉及丹参酮IIA介导FOXO1依赖途径抗肿瘤的机制。本发明公开了丹参酮IIA通过FOXO1依赖途径诱导人非小细胞肺癌细胞株A549的细胞凋亡作用。在人非小细胞肺癌细胞株A549中,丹参酮IIA可以时间依赖性的诱导FOXO1mRNA水平及蛋白水平的升高,促进FOXO1蛋白由细胞浆转运进入细胞核;用FOXO1siRNA将内源性FOXO1基因沉默后,丹参酮IIA的细胞毒作用、DNA损伤作用及诱导细胞凋亡的作用明显减弱。

    一种基于代谢组学技术的中药制剂制备工艺的评价方法

    公开(公告)号:CN102749409A

    公开(公告)日:2012-10-24

    申请号:CN201110101284.X

    申请日:2011-04-22

    Abstract: 本发明公开了一种基于代谢组学技术的中药制剂制备工艺的评价方法,主要技术路线包括:1.通过正交实验设计或平行对照实验设计获取不同制备工艺的中药制剂制品;2.对制备得各制品进行样品前处理;3.应用液相串联高分辨质谱仪,获得中药制剂制品的色谱图;4.根据质量亏损策略,在色谱图中找寻中药材归属性的成分;5.依据测定的精确质量数和源内诱导碰撞碎裂所得的碎片信息,推断各成分结构;6.定量分析各制品中所有归属性成分的含量;7.通过多变量的数据统计分析方法整体评价制备工艺对制剂的影响。该方法准确、灵敏、不依赖于标准化合物,从整体上跟踪制剂制品中药材归属性成分的变化,可广泛适用于中药制剂的制备工艺评价。

    细胞代谢物相对含量作为细胞数量指标进行数据校正的新方法

    公开(公告)号:CN102175809A

    公开(公告)日:2011-09-07

    申请号:CN201110027512.3

    申请日:2011-01-26

    Abstract: 本发明公开了“细胞代谢物相对含量作为细胞数量指标进行数据校正的新方法”。其特征在于采用简便的样品前处理方法实现细胞内生化代谢的快速猝灭;通过优化提取溶剂以高效提取细胞内小分子代谢物;再利用基于质谱、核磁共振等测定技术的代谢组学方法全面、半定量测定生物样本中小分子化合物,鉴定出的细胞内标志性代谢物作为细胞数量的定量指标,以此作为权重因子进行数据校正。与现有细胞数量的定量指标相比,该方法简便、快捷、重现性好,减少了额外的实验工作和由此引入的误差,增强了实验结果的准确性和可靠性,解决了体外培养细胞数相对定量的难题,为细胞代谢组学和相关研究提供了一个新的替代方法,可广泛用于细胞分子生物学领域的相关研究。

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