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公开(公告)号：CN104152475B
公开(公告)日：2019-08-16
申请号：CN201410405714.0
申请日：2014-08-18
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明公开了一种烟草ε‑番茄红素环化酶基因，其碱基序列如SEQ ID NO：1所示。本发明通过同源克隆的方式，从栽培烟草红花大金元体内克隆获得Ntε‑LCY基因序列，并且进行了表达模式及亚细胞定位分析。利用烟草脆裂病毒（Tobacco rattle virus，TRV）诱导基因沉默注射本氏烟草，结果表明ε‑LCY的部分沉默可以提高烟叶中类胡萝卜素含量，并且增强烟株抵御光抑制的能力。该研究结果能够为利用基因工程技术培育优良品种提供理论依据和基因资源。
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公开(公告)号：CN109183158A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201811009522.2
申请日：2018-08-31
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种酵母单杂交文库构建方法专利申请事宜。该方法用于烟草基因组全长转录因子文库构建，包括转录因子筛选及开放阅读框全长扩增引物设计、制备cDNA模板、PCR扩增、磷酸化处理、连接重组接头、构建全长转录因子的文库质粒、质粒转化并构建文库等步骤。本申请所提供全长转录因子酵母单杂交文库构建方法，是对现有构建方法的进一步综合性改进，具有转录因子阳性筛选率高、筛选准确性高、所构建文库质量高等优点，同时由于对于相关操作步骤有所优化，因而能够节省构建时间和构建成本，因此具有较好的实用价值和推广应用意义。
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公开(公告)号：CN108918710A
公开(公告)日：2018-11-30
申请号：CN201810776131.7
申请日：2018-07-16
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本申请属于烟草代谢组学技术领域，具体涉及一种新鲜烟叶中内源性植物激素的检测方法专利申请事宜。该方法可对新鲜烟叶中的SA、IAA、IBA、JA、ABA、GA、BR中一种或任意几种组合同时进行检测，该方法包括：对预处理后新鲜烟叶进行萃取，制备待检液，液相色谱-串联质谱检测分析等操作。本申请采用LC-MS/MS法进行检测时，灵敏度较高，且可单独测一种、或者同时测几种、甚至同时对7种内源性植物激素进行定性或定量测定。再者，由于正负离子选择性检测模式选择性好、干扰小、效率高，尤其是检测一个样本的时间仅10 min，因此本发明能有效地提高分析效率，非常适合复杂基质中低含量目标物的分析。
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公开(公告)号：CN104782582B
公开(公告)日：2018-07-17
申请号：CN201510205595.9
申请日：2015-04-28
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： A01K67/033 , A01M1/04
摘要： 本发明公开了一种平行式蚜虫饲养和转移装置和转移装置进行转移、收集蚜虫的方法，包括左右相邻设置的两个结构相同的矩形箱体，每个矩形箱体的顶板均为透明面板，每个矩形箱体的四个侧板均设置有纱网，两个矩形箱体相邻的两个侧板均为滑动侧板，滑动侧板与箱体滑动连接；两个矩形箱体接触面设置有密封装置且两个矩形箱体通过卡接装置连接；两个矩形箱体除相邻的滑动侧板外的一个侧板纱网上均连接有连通装置的一端，连通装置的另一端与蚜虫收集装置连接；蚜虫收集装置的一侧设置有昆虫诱集灯。本发明能够在饲养过程中简单方便地收集蚜虫，既提高了蚜虫收集效率，避免对蚜虫虫体的伤害，还能够在更换活体植物时有效防止蚜虫逃逸，保障了生态安全。
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公开(公告)号：CN107354203A
公开(公告)日：2017-11-17
申请号：CN201710557206.8
申请日：2017-07-10
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明涉及用于鉴定烤烟毕纳1号的引物组合及试剂盒、应用及检测方法，属于烟草品种鉴定技术领域。本发明利用烟草420K高密度SNP芯片对近年来我国烟草主栽品种进行全基因组SNP分型，根据品种间多态性SNP位点筛选获得了一套适用于鉴定烤烟毕纳1号的特异性SNP标记共15个，并对比栽培烟草参考基因组获得的15个SNP位点侧翼序列，其序列如SEQ ID NO:1～15所示，基于该序列设计引物；利用设计的引物，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对这些位点进行分型检测。根据检测结果获得SNP分型结果，鉴定样品是否为毕纳1号，本发明的检测方法检测时所需检测样品量少，检测通量高，鉴定结果准确。
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公开(公告)号：CN107354201A
公开(公告)日：2017-11-17
申请号：CN201710556639.1
申请日：2017-07-10
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明涉及用于鉴定烤烟云烟97的引物组合及试剂盒、应用及检测方法，属于烟草品种鉴定技术领域。本发明利用烟草420K高密度SNP芯片对近年来我国烟草主栽品种进行全基因组SNP分型，根据品种间多态性SNP位点筛选获得了一套适用于鉴定烤烟云烟97的特异性SNP标记共13个，并对比栽培烟草参考基因组获得的13个SNP位点侧翼序列，SNP位点侧翼序列如SEQ ID NO:1～13所示，基于该序列设计引物；利用设计的引物，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对这些位点进行分型检测。通过检测获得SNP分型结果，鉴定样品是否为云烟97，本发明的检测方法检测时所需检测样品量少，检测通量高，鉴定结果准确。
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公开(公告)号：CN105400793A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201510997440.3
申请日：2015-12-24
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院 , 郑州大学
CPC分类号： C07K14/415 , C12N15/10 , C12Q1/6851 , C12Q1/6895 , C12Q2600/166 , C12Q2531/113 , C12Q2563/107
摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及烟草ABCF（ATP-Binding CassetteF）内参基因的克隆方法及其应用。本发明所获得的ABCF基因的核苷酸序列可作为研究烟草功能基因或不同组织、不同生长发育阶段以及不同激素处理条件下的基因表达分析的内参基因。利用该内参基因设计的实时荧光定量PCR引物扩增特异性强，能够提高烟草基因表达分析研究的稳定性、可靠性和重复性。
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公开(公告)号：CN104231101A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201410454522.9
申请日：2014-09-09
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 一种臭椿多糖的制备方法及其在防治烟草病毒上的应用，其特征在于：所述臭椿多糖是以臭椿的茎皮为原料经水提醇沉制备而成。将本发明制得的臭椿多糖配制成水剂，施加到心叶烟上可以防治烟草花叶病毒。本发明的有益效果是，提供的一种具有防治烟草病毒作用的臭椿多糖的制备方法，以臭椿茎皮作为原料，原材料来源广泛，原料成本低；以水为提取试剂，无污染；提取过程简单、设备要求低、提取过程成本低；所制备的提取物对TMV具有体外抑制作用和侵染位点的抑制作用；提取物来源于植物，对人畜和环境安全性高，属于一种天然、绿色无污染的植物源抗病毒制剂。
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公开(公告)号：CN104152474A
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201410405713.6
申请日：2014-08-18
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明公开了一种烟草番茄红素β环化酶基因，其碱基序列如SEQIDNO：1所示。本发明研究了Ntβ-LCY基因在烟草不同时期不同器官中的转录水平表达模式，发现该基因主要表达在幼叶中；利用OE和RNAi两种方法研究了Ntβ-LCY基因在表达量变化情况下对烟草植株生长发育情况及色素含量的影响，分析了Ntβ-LCY基因在烟草中的重要功能。首先是先得到基因，可以明确而有针对性地对该基因开展研究；其次是采用稳定的转基因技术分析基因功能。
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公开(公告)号：CN102943091B
公开(公告)日：2014-04-09
申请号：CN201210440489.5
申请日：2012-11-07
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 一种利用RNAi技术培育抗多种病毒烟草的方法，通过对GenBank中4种病毒（CMV、PVY、PVX、TMV）的多条基因组全长序列进行比对，筛选到4种病毒在基因组范围内的相对保守区域；最终选定各病毒序列，人工合成800bp的嵌合基因；依此构建了嵌合基因的RNAi植物表达载体，通过农杆菌转化普通烟草，获得转基因植株。本发明的特点是：以我国四种主要烟草病毒为对象，利用植物基因工程技术将人为构建的包含四种病毒序列的发夹状结构转入烟草中，使烟草转录出的发夹状双链RNA结构在植物自身机制下剪切成小RNA（siRNA），特异性地干扰、降解或沉默靶标病毒基因在烟草植株体内的正常复制和积累，筛选获得抗多种烟草病毒的烟草新材料。
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