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公开(公告)号:CN118773339A
公开(公告)日:2024-10-15
申请号:CN202411195114.6
申请日:2024-08-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于高通量单细胞V(D)J测序的牛源BCR序列引物组及其应用。牛源BCR序列引物组的核苷酸如SEQ ID No.1~SEQ ID No.12所示。本发明提供的牛源BCR序列测序引物,可快速、高效率地获得不同组织来源的B细胞受体文库信息。该方法能特异性的获取配对的抗体序列信息,能够更好地了解牛免疫疫苗或感染病原后的B细胞应答多样性,为生物制品的设计、优化以及效果评价等提供了重要的数据支持。
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公开(公告)号:CN118344473B
公开(公告)日:2024-08-30
申请号:CN202410667088.6
申请日:2024-05-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫病毒O型和A型广谱中和性猪源单克隆抗体及其应用。本发明公开了口蹄疫病毒O型和A型广谱中和性猪源单克隆抗体pOA‑2,其重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明获得1株猪源O型和A型FMDV广谱中和抗体,并鉴定其识别的关键抗原位点,为FMDV抗体药物开发和血清学检测方法建立提供了有力工具。
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公开(公告)号:CN118108837A
公开(公告)日:2024-05-31
申请号:CN202410081359.X
申请日:2024-01-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Inventor: 李坤 , 黄书伦 , 卢曾军 , 董开恒 , 张强 , 包慧芳 , 曹轶梅 , 李平花 , 付元芳 , 袁红 , 孙普 , 白兴文 , 马雪青 , 赵志荀 , 张婧 , 王健 , 李冬
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒Asia1型中和性猪源单克隆抗体及其应用。本发明公开了口蹄疫病毒Asia1型中和性猪源单克隆抗体PD3,包括重链可变区和轻链可变区,所述重链可变区包含3个重链互补决定区HCDR1、HCDR2、HCDR3。本发明还公开了口蹄疫病毒Asia1型中和性猪源单克隆抗体PD7,包括重链可变区和轻链可变区;所述重链可变区包含3个重链互补决定区HCDR1、HCDR2、HCDR3。本发明首次获得自然宿主源Asia1型FMDV特异性中和抗体,并鉴定其识别的关键抗原位点,为Asia1型FMDV抗原解析和血清学检测方法建立提供了有力工具。
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公开(公告)号:CN117683738A
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202410093132.7
申请日:2024-01-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种交叉反应性提高、抗原谱拓展的重组O型口蹄疫疫苗毒株及其构建方法和应用,属于生物制品技术领域。一种O型口蹄疫疫苗毒株,在O型口蹄疫病毒rHN/TURVP1的基础上对VP1结构蛋白进行以下改造:重组表达插入有Cathay拓扑型流行毒株VP1的G‑H环基因的口蹄疫病毒O/TUR/5/2009株VP1结构蛋白。利用反向遗传学手段在口蹄疫病毒VP1基因中插入Cathay拓扑型流行毒株G‑H环基因,成功构建了含双G‑H环的重组病毒,该病毒遗传稳定,制备的疫苗免疫猪显著提高对Cathay型流行病毒的交叉反应性,拓展重组口蹄疫病毒的抗原谱,有潜力作为疫苗候选株用于我国当前流行O型口蹄疫的有效防控。
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公开(公告)号:CN117106076A
公开(公告)日:2023-11-24
申请号:CN202311351302.9
申请日:2023-10-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗塞内卡病毒猪源Fab基因工程抗体及其制备方法和应用。利用单个B细胞抗体技术,从感染和免疫SVA的猪外周血中分选特异性结合SVA的单个B细胞,然后扩增获得SVA抗体IgG的VH和VL基因,并将其插入含CH1和CL的真核表达质粒中,在CHO‑S细胞中表达获得SVA特异性猪源Fab抗体,然后利用ELISA、病毒中和实验、WB和免疫荧光实验验证筛选出SVA高亲和力的特异性猪源Fab基因工程抗体。该技术获得抗体保留了重链和轻链可变区的天然配对,具有基因多样性好,效率高,自然宿主(猪)来源,需要细胞量少等优势。该技术获得的Fab抗体对研究SVA宿主特异性抗原位点的鉴定提供了重要支撑。
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公开(公告)号:CN114675024B
公开(公告)日:2023-08-15
申请号:CN202210205821.3
申请日:2022-03-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/10
Abstract: 本发明提供了一种猪A型塞内卡病毒中和性抗体,利用上述抗体制备的SVA竞争ELISA检测试剂盒及相应检测方法,所述检测试剂盒包括:包被有猪A型塞内卡病毒中和性单克隆抗体1M5并捕获抗原的反应板,生物素标记的猪A型塞内卡病毒中和性单克隆抗体1M25,阳性对照血清,阴性对照血清,血清稀释液,底物溶液,终止液,洗涤液。本发明利用SVA中和性抗体用于ELISA检测,相比SVA特异性抗体,中和性抗体更能准确反应SVA感染或者疫苗免疫水平;且本发明试剂盒和检测方法具有良好的特异性、敏感性、重复性和稳定性;检测操作简便,检测周期短,单次检测时间约为90min。
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公开(公告)号:CN115896043B
公开(公告)日:2023-06-20
申请号:CN202210793288.7
申请日:2022-07-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种O型口蹄疫疫苗候选株及其构建方法和应用,属于生物制品技术领域。本发明利用口蹄疫病毒的反向遗传操作技术,以嵌合口蹄疫当前流行毒株O/XJ/CHA/2017L+P1基因感染性克隆为骨架,进一步用口蹄疫病毒O/SCGH/CHA/2016株的G‑H环基因替换其对等基因,构建重组病毒rHN/XJ/SCGH。和亲本病毒rHN/XJ相比,重组病毒rHN/XJ/SCGH引起100%感染细胞病变的时间缩短到12h,复制滴度显著提高,重组病毒疫苗免疫猪能够对口蹄疫O型四个谱系流行毒产生高水平、保护性的交叉中和抗体,拓展了抗原谱。因此,本发明利用反向遗传操作技术构建的重组病毒rHN/XJ/SCGH适合做FMD疫苗候选株,用于我国当前O型口蹄疫的有效防控。
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公开(公告)号:CN112029735B
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202010893827.5
申请日:2020-08-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/86 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种口蹄疫病毒非结构蛋白3B优势表位缺失标记毒株及其制备方法和应用,属于生物技术和生物制品技术领域。口蹄疫病毒非结构蛋白3B优势表位缺失标记毒株,在非结构蛋白3B基础上发生优势表位完全缺失得到的口蹄疫病毒;所述非结构蛋白3B基础上发生优势表位完全缺失包括3B1中由GPYAGP突变为GPAAP、3B2中由GPYAGP突变为GPAAP和3B3中GPYEGP突变为GPYEAA。所述标记毒株在制备区分感染和疫苗免疫的口蹄疫标记疫苗中的应用,可以满足免疫预防和鉴别诊断的目的,用于我国FMD的有效预防、控制和净化。
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公开(公告)号:CN113337476A
公开(公告)日:2021-09-03
申请号:CN202110589782.7
申请日:2021-05-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/00 , C12N15/42 , C12N15/63 , A61K39/295 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种口蹄疫O型PanAsia‑2谱系储备疫苗毒株及其构建方法和应用,属于兽药生物制品技术领域。口蹄疫重组病毒rHN/TUR09/VP1以O/HN/CHA/93病毒株为骨架,嵌合O/TUR/5/2009的VP1基因所得。rHN/TUR09/VP1不仅与遗传关系较近的口蹄疫O型PanAsia谱系和Ind‑2001谱系毒株的抗原高度匹配,而且与遗传关系较远的口蹄疫O型Cathay谱系和Mya‑98谱系毒株的抗原匹配,表明rHN/TUR09/VP1不仅能很好的免疫防控我国当前O型多谱系FMD病毒株的流行,而且可作为战略储备疫苗毒株用于我国边境地区O/Panasia‑2谱系口蹄疫的有效防控。
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公开(公告)号:CN113061587A
公开(公告)日:2021-07-02
申请号:CN202110479816.7
申请日:2021-04-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种抗原谱拓展O型口蹄疫病毒株及其构建方法和应用,属于兽药生物制品技术领域。rHN/NXVP1/G‑H是以重组病毒rHN/NXVP1为骨架,嵌合了O/HB/HK/99的G‑H环抗原表位基因;所述重组病毒在O/HN/CHA/93基础上嵌合了O/NXYCh/CHA/2018的VP1基因所得。O/HN/CHA/93和rHN/NXVP1与Cathay谱系病毒抗原不匹配,而rHN/NXVP1/G‑H能与PanAsia、Mya98和Ind‑2001谱系病毒抗原高度匹配,也能与Cathay谱系病毒抗原匹配,G‑H环的替换拓展了口蹄疫病毒的抗原谱,制备灭活疫苗可用于防控O型多谱系FMDV的流行。
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