一种病毒诱导的基因沉默系统及其应用

    公开(公告)号:CN101418313A

    公开(公告)日:2009-04-29

    申请号:CN200810041437.4

    申请日:2008-08-07

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种特别是一种以烟草花叶病毒TMV为载体的病毒诱导的基因沉默系统。该系统是将目标基因DNA片段插入到烟草花叶病毒TMV外壳蛋白CP的终止密码子与3’非翻译区之间,并在烟草花叶病毒TMV外壳蛋白CP的终止密码子与3’非翻译区之间引入了多克隆限制性内切酶切位点,用于目标基因DNA片段的插入;在3’非翻译区前引入一段CP 3’末端的碱基序列,以增强沉默载体的稳定性。所述的目标基因DNA片段不大于1kb。利用本发明的基因沉默系统对目标基因进行沉默将更为经济可行、方便、有效。

    玉米Opaque1基因的分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN103695550A

    公开(公告)日:2014-04-02

    申请号:CN201310718089.0

    申请日:2013-12-24

    Applicant: 上海大学

    CPC classification number: C12Q1/6895 C12Q2600/156

    Abstract: 本发明涉及一种玉米Opaque1基因的分子标记及其应用。该分子标记是通过PCR扩增特异性引物,得到的一种共显性分子标记MYO-PD,所述的特异性引物为SEQIDNO.1~SEQIDNO.2所示的碱基序列。利用这个与o1基因完全连锁的分子标记能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定,检测杂交育种子代各单株中o1基因的存在与否以及杂合或纯合状态。同时,利用这个分子标记能区分突变体与10种国内主要育种亲本,能够在任何育种背景群体中准确检测到o1基因的存在,且错选率为0。这种检测方法的准确性高,操作简单,为利用o1基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。

    提高玉米种子活力和抗寒能力的方法

    公开(公告)号:CN102612890B

    公开(公告)日:2013-10-16

    申请号:CN201210102312.4

    申请日:2012-04-09

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高玉米种子活力和抗寒能力的方法。玉米种子按常规方法表面消毒后,清水洗净,18-30℃浸种12-24小时,所用浸种液为5-10μg/ml Hrf蛋白溶液。然后按常规方法播种。本发明使用的浸种方法简单易行,纯生物制剂绿色环保,无农药或化学试剂污染,是理想的浸种液及浸种处理方法。

    快速克隆细菌谷氨酰胺合成酶基因的方法

    公开(公告)号:CN102787127A

    公开(公告)日:2012-11-21

    申请号:CN201210184123.6

    申请日:2012-09-07

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种快速克隆细菌谷氨酰胺合成酶(GS)基因的方法。该方法的主要内容包括:(1)针对细菌类群的GS基因序列设计嵌套式兼并引物;(2)使用嵌套引物中的外引物和内引物下游引物对土壤DNA进行第一轮扩增,扩增产物纯化后作为模版,用内引物上下游引物进行第二轮PCR扩增;(3)对第二轮扩增后的特异片段进行纯化,连接pMD18-T载体,转化大肠杆菌Top10,挑取正确的阳性克隆;(4)对阳性克隆的插入片段进行测序和序列分析,确定基因的正确性;(5)用大肠杆菌GS缺陷型ET6017的功能互补实验来验证所克隆基因的功能。本发明所描述的基因克隆方法具有很高的成功率和较好的准确性。

    用于分离和鉴定Ac/Ds转座子侧翼序列的特异性引物

    公开(公告)号:CN102649959A

    公开(公告)日:2012-08-29

    申请号:CN201210162980.6

    申请日:2012-05-24

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种用于分离和鉴定Ac/Ds转座子侧翼序列的引物及方法。该引物为:a.用于分离Ac/Ds5’端侧翼序列的Ac末端特异性引物为SEQIDNO:1~SEQIDNO:7所示的碱基序列;b.用于分离Ac/Ds3’端侧翼序列的Ac末端特异性引物为SEQIDNO:8~SEQIDNO:14所示的碱基序列。本发明涉及一种用于鉴定区分Ac和Ds侧翼序列的特异性引物及方法,其特征在于该引物为:SEQIDNO:15~SEQIDNO:18所示的碱基序列。利用这些Ac特异性引物可以很好扩增获得基因组中的Ac或Ds的侧翼序列。这种检测方法操作简单,为大规模的获得Ac突变体的Ac侧翼序列和分离Ac插入突变体的基因的重要的技术手段。

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