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公开(公告)号:CN115902217A
公开(公告)日:2023-04-04
申请号:CN202310215284.5
申请日:2023-03-08
IPC分类号: G01N33/569 , G01N33/58
摘要: 本发明公开了一种牛副结核病间接ELISA检测试剂盒及其应用。本发明属于微生物检测技术领域。本发明成功筛选出具有良好抗原性的包被原,同时应用该抗原建立了牛副结核病间接ELISA检测试剂盒及其检测方法。本发明通过对100份MAP阳性血清的检测,得出本发明方法的敏感性为93.0%。通过对200份MAP阴性血清的检测得出本发明方法的特异性为95.5%,明显高于其他检测方法。总之,本发明建立的牛副结核病间接ELISA检测的方法具有快速准确,敏感性和特异性高的特点。本发明的提出为预防和清除牛副结核病,保护我国畜牧业健康快速的发展提供了技术支撑。
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公开(公告)号:CN110195093B
公开(公告)日:2023-03-10
申请号:CN201910318209.5
申请日:2019-04-19
摘要: 本发明公开了一种基于表达绿色荧光蛋白的重组寨卡病毒的药物筛选系统及其应用。本发明的一种药物筛选系统由表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组寨卡病毒(报告型寨卡病毒)以及表达DC‑SIGNR的BHK‑21细胞系组成。本发明的报告型寨卡病毒表达绿色荧光蛋白,荧光号强,且在胞浆内均匀着色,易于观察,易于高通量筛选分析。稳定表达DC‑SIGNR的BHK‑21细胞系提高了对报告型寨卡病毒感染的敏感性,提高了病毒复制效率,减少了病毒复制压力,也提高了重组病毒的稳定性。通过本发明的药物筛选系统可在活细胞状态下对药物作用前后的病毒复制情况进行直接观察与分析,不需要对细胞进行固定与免疫染色,使整个操作流程更简便快捷,且减少了活病毒操作步骤,提高了整个操作流程的安全性。
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公开(公告)号:CN115704819A
公开(公告)日:2023-02-17
申请号:CN202110904538.5
申请日:2021-08-06
IPC分类号: G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/58 , A61K39/12 , A61P31/20
摘要: 本发明公开了p34蛋白作为诊断抗原在检测非洲猪瘟病毒中的用途。本发明首先对p34蛋白的抗原性进行了分析,发现原核及真核表达的p34蛋白均能同ASFV阳性血清发生反应,其中原核表达的p34蛋白产量和纯度高,其抗体可有效抑制ASFV复制,表明其可作为ASFV的候选保护性抗原。本发明以p34蛋白为诊断抗原建立了检测非洲猪瘟病毒间接ELISA方法,其敏感性为1:800,且同其他常见猪源病毒血清无交叉反应。批间及批内的变异系数在2.13%‑8.83%之间,与法国ID.VET ASFV抗体检测试剂盒符合率为96.83%,该间接ELISA检测方法敏感性、特异性以及稳定性良好,可应用于ASFV感染血清的检测。
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公开(公告)号:CN115287270B
公开(公告)日:2023-01-06
申请号:CN202211223789.8
申请日:2022-10-09
IPC分类号: C12N7/00 , A61K39/155 , A61P31/14 , A61P11/02 , C12R1/93
摘要: 本发明公开了一种B亚型禽偏肺病毒传代致弱株及其应用。本发明通过在Vero细胞中连续传代来致弱LN16‑V毒株,获得了致弱株LN16‑A,命名为LN16‑A株,其保藏号为:CGMCC NO.45261。将传代致弱株LN16‑A免疫3周龄SPF鸡并进行了系统的免疫保护评价,结果表明LN16‑A免疫机体后,可以诱导产生较高水平的aMPV特异性抗体和中和抗体,对强毒的攻击可提供100%的免疫保护,具有良好的免疫保护效果,可以有效预防强毒攻击造成的病理损伤。本发明为B亚型禽偏肺病毒病的防控提供了新的技术手段,对家禽业健康发展具有重要意义。
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公开(公告)号:CN110564697B
公开(公告)日:2022-11-29
申请号:CN201910867234.9
申请日:2019-09-12
IPC分类号: C12N5/20 , C07K16/28 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
摘要: 本发明公开了鸭MHCI类分子单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明将MHC I类分子uaa基因α2和α3保守区域片段进行原核表达,将所表达的蛋白产物纯化后作为免疫原采用细胞融合技术制备融合细胞,通过IFA筛选共获得5株IFA阳性杂交瘤细胞;利用DuLMSC细胞表面表达MHC I类分子的性质,采用流式细胞术比较各单抗的亲和力,结果发现G1株检测到的阳性DuLMSC细胞数最高,因此将G1株所分泌的单抗作为鸭MHC I类分子的单克隆抗体。通过各种常规的免疫学方法,本发明所提供的MHCI类分子单克隆抗体能够应用于检测鸭细胞表面的MHC I类分子或MHC I类分子表达量的变化。
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公开(公告)号:CN115161333A
公开(公告)日:2022-10-11
申请号:CN202210724417.7
申请日:2022-06-23
摘要: 本发明公开了一种猪链球菌的反向筛选标记、含有该反向筛选标记的猪链球菌及其应用。所述的反向筛选标记为突变后的编码猪链球菌苯丙氨酸tRNA合成酶α亚基的pheS基因,突变后的pheS基因导致了编码的猪链球菌苯丙氨酸tRNA合成酶α亚基发生了T261S和A315G双取代突变,PheS突变体通过与菌株自身的野生PheS蛋白竞争,翻译过程中将p‑Cl‑Phe错误地掺入到合成的蛋白质中,从而在p‑Cl‑Phe存在条件下,表达PheS突变体的菌株死亡,不表达PheS突变体的菌株生存。利用这一高效反向筛选标记,本发明还建立了高效的猪链球菌无痕基因操作方法,用于实现猪链球菌的无痕基因缺失、基因融合和基因突变等无痕基因操作,在研究猪链球菌生理和病理机制、制备疫苗株方面具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN115128268A
公开(公告)日:2022-09-30
申请号:CN202210404918.7
申请日:2022-04-18
IPC分类号: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/68 , G01N33/543
摘要: 本发明公开了一种马流产沙门氏菌病4种致病病原菌通用型间接ELISA抗体检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有截短表达的沙门氏菌外膜重组蛋白OmpA包被的酶标板,所述的截短表达的沙门氏菌外膜重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明利用Pull down技术成功筛选到了马流产沙门氏菌病4种病原的共同优势抗原,并将其克隆到表达载体通过截短分段表达实现了对该OmpA蛋白的可溶性表达,同时建立了马流产沙门氏菌病4种致病病原菌通用型间接ELISA抗体检测试剂盒以及相应的iELISA抗体诊断方法,实验证明,使用该试剂盒建立的方法具有特异性强、敏感性高的优点,将成为马流产沙门菌病抗体检测的一种有效工具,也为未来疫苗研发的抗体监测奠定了方法学基础。
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公开(公告)号:CN115040644A
公开(公告)日:2022-09-13
申请号:CN202111189847.5
申请日:2021-10-12
IPC分类号: A61K39/215 , A61K39/205 , A61P31/14 , C07K19/00 , C07K14/165
摘要: 本发明提供一种包含改造的SARS‑CoV‑2的刺突蛋白(S’)的疫苗组合物,用于预防新型冠状病毒的感染,尤其是针对哺乳动物的新型冠状病毒的感染。
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公开(公告)号:CN112680421B
公开(公告)日:2022-09-13
申请号:CN202110136987.X
申请日:2021-02-01
IPC分类号: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
摘要: 本发明公开了一株具有广谱性中和猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体及其应用。所述的单克隆抗体是由保藏编号为CGMCC No.13840的杂交瘤细胞分泌产生。所述的单克隆抗体具有广谱性,能够有效中和PEDV‑LNCT2、PEDV‑LNSY和PEDV‑Hjms等G2基因亚型毒株,使其失去感染细胞的能力,也能够中和CV777毒株(G1基因亚型)。鉴于该单克隆抗体的生物学特性以及所具有的广谱性中和PEDV毒株的能力,该单克隆抗体可用于建立一系列包括阻断ELISA、捕获ELISA、间接ELISA、竞争ELISA和胶体金试纸条等方法在内的PEDV诊断方法,具备广阔的应用价值和研究价值。
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公开(公告)号:CN114891095A
公开(公告)日:2022-08-12
申请号:CN202210382554.7
申请日:2022-04-13
IPC分类号: C07K16/10 , C07K19/00 , G01N33/569 , G01N33/68
摘要: 本发明公开了一种用于检测PRRSV抗原的纳米抗体对、试剂盒及其应用,属于生物技术检测技术领域。为了提供一种特异性检测PRRS病毒的抗体对。本发明提供了一种用于检测PRRSV抗原的Nb12抗体和N35抗体,Nb12抗体的可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7‑9,N35抗体可变区序列如SEQ ID NO:10‑12。抗体对能特异性识别PRRSV抗原,最低检测1.0×103TCID50/100μL病毒。
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