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公开(公告)号：CN100362103C
公开(公告)日：2008-01-16
申请号：CN200410065878.X
申请日：2004-12-21
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种人表皮生长因子核酸序列，以及在大肠杆菌和家蚕中表达。根据人表皮生长因子的氨基酸序列，按照家蚕密码子偏爱性，并参照大肠杆菌优选密码子设计并人工合成了新的HCEGF核酸序列，该序列能够在大肠杆菌和家蚕体内高效表达人表皮生长因子。在大肠杆菌中表达量可达菌体总蛋白的30%以上，在家蚕中可达到28.4μg/ml蛹血淋巴。此合成序列不同于人表皮生长因子基因序列，但所表达的产物同天然人表皮生长因子的表达产物完全相同，因而具有天然人表皮生长因子的全部特性。
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公开(公告)号：CN1670215A
公开(公告)日：2005-09-21
申请号：CN200510037759.8
申请日：2005-01-31
Abstract: 本发明公开了一种制备带有人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子的转基因家蚕的方法，通过基因工程操作将家蚕核型多角体病毒基因启动子控制下的人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子基因克隆进以转座子piggyBAC因子为基础的带有报告基因的载体，构建重组转基因载体，在辅助质粒作用下，用精子介导法获得带有报告基因的家蚕，并检测到人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子基因，育种制成所述转基因家蚕。利用该转基因家蚕的幼虫或蛹或蛾经冷冻干燥后可获得生白细胞药物。本发明方法实现转基因家蚕制备生白细胞药物，生产成本低，不涉及具有潜在危害的病毒基因组，安全性高，药物效果尤其是口服效果良好，具有十分重大的实施价值。
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公开(公告)号：CN114181969A
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202111499178.1
申请日：2021-12-09
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明涉及固定化蛋白领域，具体涉及一种制备包裹外源蛋白的多角体的方法。通过基因工程方法利用杆状病毒表达系统在家蚕培养细胞或家蚕中共表达家蚕质型多角体蛋白、带有家蚕质型多角体病毒结构蛋白VP5标签以及蛋白酶特异性断裂位点的融合外源蛋白，从而形成包裹外源蛋白质的多角体。形成的多角体可以通过简单的差速离心实现纯化；多角体对其包裹的外源蛋白有保护和缓释作用。纯化的多角体在碱性条件下裂解后，用盐酸溶液调pH至多角体蛋白等电点，可以通过离心使多角体蛋白沉淀，而融合外源蛋白留存在上清中，从而可以快速、方便地获得融合外源蛋白；融合外源蛋白通过相应的蛋白酶酶切移除VP5标签可以方便地获得更接近天然的外源蛋白。
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公开(公告)号：CN106834352B
公开(公告)日：2020-06-16
申请号：CN201710109641.4
申请日：2017-02-27
Applicant: 苏州大学
IPC: C12N15/866 , C12N7/04 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12N15/62
Abstract: 本发明涉及抗原蛋白表达技术，具体涉及基于杆状病毒表达系统制备包裹鲤疱疹病毒II型抗原的多角体的方法，通过设计重组家蚕核型多角体病毒BmNPV‑VP3‑cyHV‑polh，ORF72、ORF66、ORF81和ORF82的1‑186、993‑1197、603‑783、85‑186区域序列与家蚕质型多角体病毒结构蛋白VP3基因1‑279区域的编码序列串联融合序列由杆状病毒P10启动子控制；家蚕质型多角体蛋白基因由杆状病毒的多角体蛋白基因启动子控制。用该病毒接种家蚕或家蚕培养细胞，重组病毒表达的鲤疱疹病毒II型的抗原蛋白可包裹进家蚕质型多角体内。形成的多角体可以通过简单的差速离心实现纯化；纯化的多角体在碱性条件下裂解后，可以通过离心使多角体蛋白沉淀，而鲤疱疹病毒II型抗原留存在上清中，从而可以快速、方便地获得鲤疱疹病毒II型抗原。
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公开(公告)号：CN110628958A
公开(公告)日：2019-12-31
申请号：CN201911095969.0
申请日：2019-11-11
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种用于中华绒螯蟹茧蜂病毒PCR检测的引物对及试剂盒。本发明提供了一种用于中华绒螯蟹茧蜂病毒PCR检测的引物对，本发明的引物对根据如SEQ ID NO.3所示的中华绒螯蟹茧蜂病毒特异性序列进行设计，实现了中华绒螯蟹茧蜂病毒的PCR检测。本发明实现了中华绒螯蟹茧蜂病毒的快速检测，从模板制备至PCR产物的电泳检测通常在5小时左右完成，由于PCR技术已非常普及，因此在一般的生物学实验室均可实现，可广泛应于养殖生产中中华绒螯蟹茧蜂病毒的检测。与宏基因组、宏转录组检测相比，速度快、费用低、针对性强，应用性好。
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公开(公告)号：CN108660157A
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201810535576.6
申请日：2018-05-30
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种基于DNA载体的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法。具体而言，本发明的方法包括下列步骤：1）获得家蚕质型多角体病毒基因组；2）设计并合成引物；3）获得病毒基因组S1至S10片段的cDNA；4）对cDNA进行PCR扩增；5）将扩增产物进行酶切，然后克隆到质粒载体中，获得重组质粒；6）将重组质粒进行酶切、线性化；以及7）将线性化质粒等摩尔混合，使用脂质体进行包裹并转染表达T7 RNA聚合酶的宿主细胞，进而获得体外构建的家蚕质型多角体病毒。本发明的一种基于DNA载体的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法不但对家蚕质型多角体病毒基因组各片段的功能研究有促进作用，为体外获取家蚕质型多角体病毒提供新方法，而且也可以为构建重组质型多角体病毒生物杀虫剂的研发提供理论指导和技术支撑。
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公开(公告)号：CN104789597B
公开(公告)日：2018-03-30
申请号：CN201510209183.2
申请日：2015-04-28
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种家蚕质型多角体病毒的体外构建方法。具体而言，本发明的方法包括下列步骤：1）获得家蚕质型多角体病毒基因组；2）设计并合成引物；3）获得病毒基因组S1至S10片段的cDNA；4）对cDNA进行PCR扩增；5）将扩增产物进行酶切，然后克隆到质粒载体中，获得重组质粒；6）将重组质粒进行酶切、线性化后，经过体外转录，获得RNA；以及7）将RNA等摩尔混合，使用脂质体进行包裹并转染宿主，进而获得体外构建的家蚕质型多角体病毒。本发明的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法不但对家蚕质型多角体病毒基因组各片段的功能研究有促进作用，也可以为重组质型多角体病毒生物杀虫剂的研发提供技术支持。
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公开(公告)号：CN104789598A
公开(公告)日：2015-07-22
申请号：CN201510209184.7
申请日：2015-04-28
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种表达红色荧光蛋白的重组家蚕质型多角体病毒的构建方法。具体而言，本发明的方法包括下列步骤：1）获得病毒基因组；2）设计并合成引物；3）获得病毒基因组的cDNA；4）对cDNA进行PCR扩增；5）将扩增产物进行酶切，获得重组质粒；6）将重组质粒pT-S1至pT-S9进行酶切，体外转录获得对应的RNA；7）构建带有红色荧光蛋白基因的重组质粒pT-S10-DsRed并获得S10-DsRed RNA；以及8）将上述RNA等摩尔混合，包裹并转染宿主，进而获得病毒。利用本发明建立的方法可以在家蚕细胞中表达红色荧光蛋白，进而有可能获得人们所需的重组质型多角体病毒生物杀虫剂。
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公开(公告)号：CN103310684B
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201310272562.7
申请日：2013-07-01
Applicant: 苏州大学
IPC: G09B23/00
Abstract: 本发明公开了一种拆装式固定化酶或固定化细胞模型教具，其包括圆盘形的盆体、活动设置在所述盆体上方的盖体、第一连接体、第二连接体、第三连接体、第四连接体，所述盖体顶面为镂空网，所述第一连接体为球体，所述第二连接体为底部设置有连接杆的球体，所述第三连接体为底部设置有倒T形的连接体的球体，所述第四连接体为结点圆球底部设置有连接杆的环形珠串。本发明结构简单，能生动形象的演示酶或细胞的多种固定化方式。
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