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公开(公告)号:CN106244618A
公开(公告)日:2016-12-21
申请号:CN201610812891.X
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
CPC classification number: C12N15/80 , C12N2800/10
Abstract: 本发明公开了一种转化外源脱氧核糖核酸进入葡枝根霉休眠孢子的方法,包括葡枝根霉培养和孢子收集、葡枝根霉孢子预处理以及使用HDEN法电击葡枝根霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的葡枝根霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入葡枝根霉休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。
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公开(公告)号:CN106244616A
公开(公告)日:2016-12-21
申请号:CN201610812859.1
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
CPC classification number: C12N15/80 , C12N2800/10
Abstract: 本发明公开了一种使外源DNA穿透细胞屏障进入点青霉休眠孢子的方法,包括点青霉培养和孢子收集、点青霉孢子预处理以及使用HDEN法电击点青霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的点青霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入点青霉休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。
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公开(公告)号:CN106191122A
公开(公告)日:2016-12-07
申请号:CN201610813626.3
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
CPC classification number: C12N15/87
Abstract: 本发明公开了一种在串珠镰刀菌休眠孢子中表达蛋白质的方法,包括串珠镰刀菌培养和孢子收集、串珠镰刀菌孢子预处理以及使用HDEN法电击串珠镰刀菌孢子三个步骤,该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤,采用HDEN电转化技术,将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜,在串珠镰刀菌休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速,效果极佳,转化率达到90%以上。
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公开(公告)号:CN106191098A
公开(公告)日:2016-12-07
申请号:CN201610812876.5
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
CPC classification number: C12N15/80
Abstract: 本发明公开了一种让外源DNA穿越卷枝毛霉未萌发孢子细胞壁和细胞膜的方法,包括卷枝毛霉培养和孢子收集、卷枝毛霉孢子预处理以及使用HDEN法电击卷枝毛霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的卷枝毛霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入卷枝毛霉休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。
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公开(公告)号:CN106148387A
公开(公告)日:2016-11-23
申请号:CN201610812878.4
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
IPC: C12N15/80
CPC classification number: C12N15/80 , C12N2800/10
Abstract: 本发明公开了直接对扩展青霉休眠孢子转化外源脱氧核糖核酸的方法,包括扩展青霉培养和孢子收集、扩展青霉孢子预处理以及使用HDEN法电击扩展青霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的扩展青霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入扩展青霉休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。
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公开(公告)号:CN115125224B
公开(公告)日:2023-07-18
申请号:CN202210959921.5
申请日:2022-08-11
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明公开了一种可规模化生产具有活性的DNA聚合酶的方法。所述方法包括以下步骤:1)将携带有目的基因的菌种划线于带氨苄抗性的LB平板上,挑取单菌落培养后作为种子液;2)配置高密度发酵培养基,加入发酵罐中;3)将种子液转接到步骤2)的发酵罐中进行培养;4)当培养至溶氧下降至30%以下时,开始加入补料培养基,控制溶氧为30%以上;5)当培养至细菌菌体湿重距最大菌体湿重4g/L时,一次性加入IPTG诱导,使IPTG终浓度为1±0.1 mM;6)达到最佳诱导时长后停止发酵,放罐,获取菌体。本发明提高了目标产物的发酵稳定性,并且减少了包涵体的产生,可实现规模化生产DNA聚合酶。
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公开(公告)号:CN108384868A
公开(公告)日:2018-08-10
申请号:CN201810483056.5
申请日:2018-05-18
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明公开了一种用于同时检测四种致病弧菌的多重PCR引物组及检测方法和试剂盒,其检测引物组包含检测副溶血性弧菌、创伤弧菌、哈氏弧菌和拟态弧菌的引物对。本发明还建立了一种用于同时检测四种致病弧菌的多重PCR检测方法及试剂盒,利用设计得到的所述引物组,对待测样品中提取的细菌的基因组DNA,在同一反应体系中进行多重PCR反应,通过对反应产物的电泳分析来判定样品中是否含有上述致病弧菌,具有快速准确、成本低、特异性和灵敏度高的优点。
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公开(公告)号:CN106381305A
公开(公告)日:2017-02-08
申请号:CN201610812886.9
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
CPC classification number: C12N15/80 , C12N2800/10
Abstract: 本发明公开了转化外源ssRNA到米根霉休眠孢子中并表达蛋白质的方法,包括米根霉培养和孢子收集、米根霉孢子预处理以及使用HDEN法电击米根霉孢子三个步骤,该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤,采用HDEN电转化技术,将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜,在米根霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速,效果极佳,转化率达到90%以上。
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公开(公告)号:CN106381304A
公开(公告)日:2017-02-08
申请号:CN201610812881.6
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
CPC classification number: C12N15/80 , C12N2800/10
Abstract: 本发明公开了一种使用外源单链RNA在米曲霉休眠孢子中表达蛋白质的方法,包括米曲霉培养和孢子收集、米曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击米曲霉孢子三个步骤,该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤,采用HDEN电转化技术,将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜,在米曲霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速,效果极佳,转化率达到90%以上。
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