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公开(公告)号:CN102226203B
公开(公告)日:2013-01-09
申请号:CN201110127319.7
申请日:2011-05-17
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及双chU6启动子双shRNA表达质粒的构建及应用,属于生物制药领域。构建鸡U6启动子(chU6),设计两个靶向分别针对IBDVVP1和VP2基因的小发夹RNA(shRNA):VP1-shRNA2550和VP2-shRNA392。构建表达质粒pSilencer2.1+2chU6+VP1VP2shRNA,转染鸡胚成纤维细胞(CEF),接种IBDV,可抑制病毒复制。将表达质粒pSilencer2.1+2chU6+VP1VP2shRNA与IBDV混合,接种于10日龄SPF鸡胚尿囊腔,可保护鸡胚免受IBDV感染。本发明构建的双chU6启动子双shRNA表达质粒是一种新型IBDV防治制剂,具有良好的实用价值和推广前景。
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公开(公告)号:CN102417912A
公开(公告)日:2012-04-18
申请号:CN201110307176.8
申请日:2011-10-11
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N15/35 , C12N15/861 , C12N7/01 , A61K48/00
Abstract: 本发明涉及猪细小病毒样颗粒B细胞表位插入位点的分子设计,属于基因工程疫苗领域。使用生物信息学软件对猪细小病毒(PPV)衣壳蛋白VP2结构建模,经三维结构分析确定VP24个突出的Loop结构所在区;首先在分子模拟和文献支持的基础上,我们推测loop 2,4区可作为外源表位基因插入位点。试验证明,分别缺失PPV VP2 Loop2(212aa~245aa),Loop4(413aa-424aa)内的相应基因,再用腺病毒表达系统表达,结果Loop2,4缺失突变重组病毒均能装配出规则的病毒样颗粒[PPV:ΔVLPs]。本发明还涉及该重组病毒表达外源基因的重组PPVΔVP2病毒样颗粒在疫苗免疫等方面的应用。
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公开(公告)号:CN101624421A
公开(公告)日:2010-01-13
申请号:CN200910184043.9
申请日:2009-08-12
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及传染性法氏囊病病毒变异株VP2基因病毒样颗粒重组蛋白,属于生物制药领域。将IBDV变异株(AH1)VP2基因,克隆、转化、转染,获得重组杆状病毒vBac-VP2。感染的Sf9昆虫细胞具有特异性荧光,抗原效价在1.6×10 3 以上,重组VP2蛋白分子量53kDa,在感染细胞中呈病毒样颗粒形态。用纯化的重组VP2蛋白为包被抗原建立的IBDV抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性和敏感性;免疫鸡,可抵抗IBDV强毒攻击,保护率达到100%。本发明用IBDV变异株VP2基因制备的新型病毒样颗粒重组VP2蛋白对当前IBDV流行毒株的免疫预防针对性更高,具有良好的实用价值和推广前景。
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公开(公告)号:CN112831476A
公开(公告)日:2021-05-25
申请号:CN202110233930.1
申请日:2021-03-03
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 新城疫病毒VII‑NJ株及其应用,属于微生物技术领域。本发明的目的是提供一株具有优良生物学特性的新城疫病毒VII‑NJ株,用其制备新城疫病毒抗原,用于制备新城疫疫苗,具有与流行株抗原性相匹配的优势,同时所制备的新城疫卵黄抗体,具有高效价、高中和活性的特点。本发明的新城疫病毒VII‑NJ株,于2019年7月9日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为:CCTCCNO:V201945。本发明的新城疫病毒VII‑NJ株在制备新城疫病毒灭活抗原中的应用。本发明的新城疫病毒VII‑NJ株在制备新城疫灭活疫苗中的应用。本发明的新城疫病毒VII‑NJ株在制备新城疫卵黄抗体中的应用。
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公开(公告)号:CN112553168A
公开(公告)日:2021-03-26
申请号:CN202011534381.3
申请日:2020-12-23
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 分泌抗猫细小病毒VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞3A6株及其应用,属于生物领域,该杂交瘤细胞3A6株于2020年12月10日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCC NO:C2020248。该杂交瘤细胞3A6株既能与真核表达的VP2蛋白反应又能与猫细小病毒反应,生物学性能十分优良,制备的小鼠腹水单克隆抗体对病毒的中和效价高达5×108、对VP2蛋白的反应效价高达108,且对多种猫细小病毒毒株的中和能力相当,用于猫细小病毒感染发病猫的临床治疗,有效率达到100%。
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公开(公告)号:CN110777121A
公开(公告)日:2020-02-11
申请号:CN201911239891.5
申请日:2019-12-06
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , A61K39/395 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种能分泌高中活性抗犬瘟热病毒H蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞3B5株,属于生物技术领域。从建立的127株杂交瘤细胞库中筛选出一株具有较高中和活性的杂交瘤细胞株3B5,抗原表位在犬瘟热病毒的H蛋白第228~237位氨基酸。单克隆抗体3B5与单克隆抗体1D7和2G3组成的抗体组合治疗剂中和效价为213,比单独使用3B5、1D7、2G3的中和效价提高8-32倍中和病毒能力,单克隆抗体组合治疗剂的临床应用试验结果比联合使用单克隆抗体1D7和2G3效果从98%提高到100%,治疗周期从4天缩短为2天。可用于犬瘟热(CD)发病动物的临床治疗,降低生产成本,提高治疗效果。
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公开(公告)号:CN105802920B
公开(公告)日:2019-07-05
申请号:CN201610165397.9
申请日:2016-03-22
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明公开了一株传染性法氏囊病病毒A11株及其应用,属于微生物技术领域。从近年来传染性法氏囊病疫苗免疫失败鸡群中分离传染性法氏囊病病毒,对获得的病毒分离株进行生物学特性分析,从中筛选到一株具有优良生物学特性的传染性法氏囊病病毒株A11,为当前流行的超强毒力传染性法氏囊病病毒。用鸡胚和细胞连续传代方法使其毒力致弱培育A11弱毒株,在细胞中具有超强的复制能力,细胞中的病毒产量高达1011TCID50/0.1ml,免疫接种雏鸡,可快速产生抗传染性法氏囊病病毒的免疫保护,1周后即可获得免疫保护,具有研制新特异性传染性法氏囊病疫苗的巨大应用价值。
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公开(公告)号:CN103773735A
公开(公告)日:2014-05-07
申请号:CN201310565243.5
申请日:2013-11-13
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种高表达gga-miR-9*的鸡胚成纤维传代细胞株DF-miR-9*,属于生物技术领域。将细胞内源性gga-miR-9*运用慢病毒病毒表达系统构建含有pri-gga-miR-9*的重组慢病毒VL+miR-9*,用VL+miR-9*感染鸡胚成纤维传代细胞系DF-1,获得高表达gga-miR-9*的鸡胚成纤维传代细胞株DF-miR-9*。用DF-miR-9*培养传染性法氏囊病病毒(IBDV),IBDV滴度比用正常DF-1细胞培养的病毒滴度高10倍以上。本发明的高表达gga-miR-9*鸡胚成纤维传代细胞株DF-miR-9*用于IBDV抗原制备和疫苗生产,病毒滴度高,具有巨大的生产应用价值。
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公开(公告)号:CN103232974A
公开(公告)日:2013-08-07
申请号:CN201310085194.5
申请日:2013-03-18
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及一种分泌高中和活性传染性法氏囊病毒(IBDV)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,属于生物技术领域。本发明从建立的分泌IBDV单克隆抗体的杂交瘤细胞库中筛选出一株杂交瘤细胞C128株,用其制备的小鼠腹水单克隆抗体对IBDV的中和效价高达1010。本发明的杂交瘤细胞C128株分泌高中和活性IBDV单克隆抗体不仅中和效价高而且抗IBDV毒株范围广,用于传染性法氏囊病(IBD)发病动物的临床治疗,疗效显著,安全无不良副反应。本发明的杂交瘤细胞C128株制备的单克隆抗体治疗剂,保存二年后中和效价不降低,稳定性好。
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公开(公告)号:CN102417912B
公开(公告)日:2013-05-22
申请号:CN201110307176.8
申请日:2011-10-11
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N15/35 , C12N15/861 , C12N7/01 , A61K48/00
Abstract: 本发明涉及猪细小病毒样颗粒B细胞表位插入位点的分子设计,属于基因工程疫苗领域。使用生物信息学软件对猪细小病毒(PPV)衣壳蛋白VP2结构建模,经三维结构分析确定VP24个突出的Loop结构所在区;首先在分子模拟和文献支持的基础上,我们推测loop 2,4区可作为外源表位基因插入位点。试验证明,分别缺失PPV VP2 Loop2(212aa~245aa),Loop4(413aa-424aa)内的相应基因,再用腺病毒表达系统表达,结果Loop2,4缺失突变重组病毒均能装配出规则的病毒样颗粒[PPV:ΔVLPs]。本发明还涉及该重组病毒表达外源基因的重组PPVΔVP2病毒样颗粒在疫苗免疫等方面的应用。
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