一种特异于禽类原始生殖细胞的基因转移系统及方法

    公开(公告)号:CN105524941A

    公开(公告)日:2016-04-27

    申请号:CN201610035065.9

    申请日:2016-01-19

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种特异于禽类原始生殖细胞的基因转移系统和方法。该基因转移系统包括含有具有如SEQ ID No.1所示核苷酸序列的vasa启动子的转座酶辅助质粒。该基因转移方法包括:(1)使用生物工程方法,构建含有vasa启动子或者含有vasa启动子和通用增强子元件的转座酶辅助质粒;(2)使用生物工程方法,构建含有需要转移的目的基因表达盒的转座子供体质粒;(3)提取质粒后,将上述转座子供体质粒和转座酶质粒按1:2比例混合均匀,调整其终浓度为500ng—1.5μg/μL;(4)将步骤(3)中所得的混合质粒使用包埋剂包裹后,转染禽类早期胚胎血液中PGCs细胞。通过本发明,可以实现外源基因在禽类胚胎PGCs基因组中高效特异整合,从而达到提高转基因禽的制备效率的目的。

    一种苏姜猪品种的培育方法

    公开(公告)号:CN101828539B

    公开(公告)日:2012-07-25

    申请号:CN201010178093.9

    申请日:2010-05-19

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种苏姜猪的培育方法,属于畜牧工业化生产领域。该苏姜猪的培育方法是:以姜曲海猪、枫泾猪为母本,以杜洛克猪为父本进行复杂杂交获得零世代基础群,经过6个世代的群体继代选育,获得含有18.75%姜曲海猪血统,18.75%枫泾猪血统,62.5%杜洛克猪血统的苏姜猪品种。它是采用现代常规育种技术和多基因聚合辅助育种技术相结合,持续进行了多个世代的选育。苏姜猪具有窝产仔数多、胴体瘦肉率高,肉质优良,可生产优质商品猪肉产品。

    一种转基因动物的制备方法

    公开(公告)号:CN101289671B

    公开(公告)日:2010-12-22

    申请号:CN200810123956.5

    申请日:2008-05-30

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种转基因动物的制备方法。具体是先构建含目标基因cDNA的转基因表达盒,再将其插入睡美人转座子载体中获得含转基因表达盒的睡美人转座子表达载体,然后使用睡美人转座系统介导,采用双侧睾丸多点注射法,将含转基因表达盒的睡美人转座子表达质粒和睡美人转座酶表达质粒注射雄性动物体内;再与雌性动物交配,动物分娩后,利用聚合酶链式反应和Southern印迹技术分析确定转基因阳性个体。本发明在转基因动物的制备过程中使用“睡美人”转座系统介导,采用双侧睾丸三次多点注射法,所建立的转基因动物制备方法具有阳性率高、节省时间、试验成本低、实用、操作简单等优势。

    一种利用猪TLR6基因ERV插入多态提高仔猪天然免疫力的分子标记及其育种方法

    公开(公告)号:CN112522424B

    公开(公告)日:2024-02-20

    申请号:CN202011502063.9

    申请日:2020-12-18

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供一种利用猪TLR6基因ERV插入多态提高仔猪天然免疫力的分子标记及其育种方法,涉及分子遗传学领域。192bp的ERV插入后TLR6基因的启动子活性显著升高,且天然免疫相关的TLR信号通路中的TLR6、TLR1、下游的MyD88,Rac1,TOLLip,TIRAP及细胞因子IL‑6,IL‑8和TNFα基因在30日龄仔猪重要免疫器官中的表达及血液中IL‑6和TNFα因子水平升高。可见通过检测猪TLR6基因的192bpERV插入多态可以作为提高仔猪天然免疫力的分子标记,不仅方法简便快速,而且不受环境影响,可实现早期选种选配。

    一种与猪背膘厚关联的CA5B基因内SINE转座子多态分子标记、检测方法及应用

    公开(公告)号:CN116590425A

    公开(公告)日:2023-08-15

    申请号:CN202310433591.0

    申请日:2023-04-21

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于动物遗传育种领域,公开了一种与猪背膘厚关联的CA5B基因内SINE转座子多态分子标记、检测方法及应用。所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其来自CA5B基因,该序列的257到586位点之间是一个测序发现的330bp反向SINE转座子的插入多态性位点,该位点表现为SINE+/+、SINE+/‑或SINE‑/‑三种基因型,纯合插入基因型(SINE+/+)的个体背膘厚显著高于纯合无插入基因型(SINE‑/‑)的个体。本发明的CA5B基因内SINE转座子多态分子标记可以用于家系选育的早期选择,也可在选配中提供分子依据。

    一种与猪生长速度关联的SINE转座子多态分子标记及其检测方法和应用

    公开(公告)号:CN112094923B

    公开(公告)日:2022-07-12

    申请号:CN202011057170.5

    申请日:2020-09-30

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于动物遗传育种领域和分子标记选育领域,公开了一个与猪生长速度关联的LEPROT基因内的SINE转座子多态分子标记检测方法及应用。本发明的方法是检测待测猪的LEPROT基因的第一内含子区是否存在一个276bp的SINE转座子反向插入多态标记,该分子标记显著影响猪的100kg体重日龄的性状。本发明还提供了一种用于鉴定该分子标记位点的引物对,利用该分子标记和引物对可建立高效准确的分子标记辅助育种技术,将其应用于种猪生长速度性状遗传改良中,可以提高生产效益。

    一种PS转座子系统及其介导的基因转移方法

    公开(公告)号:CN110257425A

    公开(公告)日:2019-09-20

    申请号:CN201910366530.0

    申请日:2019-05-05

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开一种PS转座子系统及其介导的基因转移方法,包括可插入目的基因盒的两个末端重复序列的转基因供体质粒和提供转座活性的转座酶辅助质粒。通过PS转座子系统将目的基因导入受体基因组。本发明提供的基于PS转座子系统的基因转移方法,经过细胞和胚胎水平验证能够高效介导基因转移,可应用于多个生物技术领域:1)使用本发明中给出的方法可有效地将目的基因盒插入到宿主基因组中,提高基因转移效率;2)与基因捕获技术结合可以有效开展动物基因功能研究;3)可以介导进行人类基因治疗等。

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