-
公开(公告)号：CN105647835A
公开(公告)日：2016-06-08
申请号：CN201610146280.6
申请日：2014-08-08
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种海洋菌株催化不对称还原制备手性苯丙氨酸的方法，涉及手性苯丙氨酸。将菌种接入2216L培养基中培养，得发酵液，离心获得细胞，用缓冲液重悬、洗涤，配制成细胞液；所述菌种为南海芽孢杆菌(Bacillus nanhaiensis)DSF-15A2，保藏中心登记入册编号为CGMCC No.8969；在细胞液中，加入苯丙酮酸和氨基供体作为底物，再加入辅助底物用于辅酶循环再生，反应后得到含有产物L-苯丙氨酸的反应液，离心去除沉淀，上清液加入等量的甲醇，震荡混合均匀，离心去除沉淀，上清液稀释后进行测定，苯丙酮酸的浓度用高效液相色谱检测，产物L-苯丙氨酸的浓度和对映体过量值用高效液相色谱测定。
-
公开(公告)号：CN105154488A
公开(公告)日：2015-12-16
申请号：CN201510690731.8
申请日：2015-10-22
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种基于生物砖串联双酶制备L-叔亮氨酸的方法，包括如下步骤：(1)构建能够串联表达亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的串联生物砖元件；(2)将上述串联生物砖元件导入大肠杆菌，构建基于串联表达亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的E.coli工程菌；(3)将上述E.coli工程菌接种于含氯霉素的液体扩大培养基中进行培养及诱导表达，获得发酵液，冷冻离心获得细胞，用缓冲液重悬、洗涤、配制成细胞液；(4)将上述细胞液、三甲基丙酮酸、氨基供体、辅酶和用于辅酶再生的辅助底物置于缓冲体系中震荡反应，利用全细胞催化不对称还原胺化得到产物L-叔亮氨酸。本发明的方法产品转化率高，手性选择性较好，反应条件温和，操作简单，昂贵的辅酶可再生，单细胞表达双酶节约成本。
-
公开(公告)号：CN104726514A
公开(公告)日：2015-06-24
申请号：CN201510165635.1
申请日：2015-04-09
Applicant: 厦门大学
CPC classification number: Y02P20/584
Abstract: 本发明公开了一种酶催化不对称还原制备手性苯丙氨酸的方法，包括以下步骤：(1)基因组DNA的提取；(2)基因克隆及工程菌的制备；(3)细胞液制备：(4)全细胞催化反应：在步骤3)的细胞液中，加入苯丙酮酸和氨基供体作为底物，加入辅助底物用于辅酶循环再生，利用全细胞催化不对称还原胺化得到产物手性苯丙氨酸。本发明的方法采用全细胞催化苯丙酮酸不对称还原胺化获得手性苯丙氨酸，具有反应路线简洁，易实现辅酶再生等优点。
-
公开(公告)号：CN104131018A
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201410373158.3
申请日：2014-07-31
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/63
Abstract: 一种细胞内蛋白自诱导表达的方法，涉及基因工程领域。将费氏弧菌(Vibrio fischeri)群体感应相应的启动子和结构基因克隆到质粒里，构建了一个自诱导的基因通路，该通路为：lux pR-RBS-luxI-TT-lux pL-RBS-luxR-TT-lux pR，它不依赖诱导物就能通过通路本身的正反馈实现后续的目的蛋白在较高的菌体浓度下自动地大量诱导表达，实现了细胞生长期与产物表达时间的分开，进而提高了产物产率。由于不用添加诱导物，节约了成本和简化操作过程，另一方面还可以通过特殊的启动子设计，使通路在检测重金属离子、农业污染菌、检测环境变化等方面具备应用前景。
-
公开(公告)号：CN102250811B
公开(公告)日：2013-03-13
申请号：CN201110198853.7
申请日：2011-07-15
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种转化甘油制备乳酸的方法，涉及一种乳酸。提供一种制备乳酸的菌种戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)R3-8。将戊糖乳杆菌R3-8接入含有甘油的种子培养基中培养，将种子液加入发酵培养基中微氧发酵，发酵过程中通入空气搅拌，流加废甘油，同时流加6～8M碱溶液，控制pH值为5.0～7.0，发酵过程中测定菌体干重浓度、甘油和乳酸浓度，当菌体干重浓度低于1.5g/l时，停止流加甘油，结束发酵。发酵培养基无需进行灭菌，直接用于发酵；所用菌种为益生菌，无生物安全性方面的隐患；减少了能耗，降低了生产成本。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101974510A
公开(公告)日：2011-02-16
申请号：CN201010536533.3
申请日：2010-11-09
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N11/18
Abstract: 一种对辅酶和辅酶依赖性酶进行偶联固定的方法，涉及酶。提供一种对辅酶和辅酶依赖性酶进行偶联固定的方法，包括以下步骤：将辅酶加入缓冲液中得溶液A，将辅酶辅酶依赖性酶加入缓冲液中得溶液B；将携带活性基团的载体加入到所述溶液A中，得溶液C；将所述溶液C离心，收集载体并将所得载体加入所述溶液B中，混匀得溶液D；将溶液D进行孵育，离心或过滤、洗涤、冷冻干燥即得固定化酶。此固定方法可最大限度的保护酶的活性位点，提高辅酶与酶的结合率，减小传质位阻。有效避免传统固定方法中出现的辅酶丢失、随机固定、活性位点堵塞、回收率低和稳定性差等问题。
-
公开(公告)号：CN105647835B
公开(公告)日：2019-01-08
申请号：CN201610146280.6
申请日：2014-08-08
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种海洋菌株催化不对称还原制备手性苯丙氨酸的方法，涉及手性苯丙氨酸。将菌种接入2216L培养基中培养，得发酵液，离心获得细胞，用缓冲液重悬、洗涤，配制成细胞液；所述菌种为南海芽孢杆菌(Bacillus nanhaiensis)DSF‑15A2，保藏中心登记入册编号为CGMCC No.8969；在细胞液中，加入苯丙酮酸和氨基供体作为底物，再加入辅助底物用于辅酶循环再生，反应后得到含有产物L‑苯丙氨酸的反应液，离心去除沉淀，上清液加入等量的甲醇，震荡混合均匀，离心去除沉淀，上清液稀释后进行测定，苯丙酮酸的浓度用高效液相色谱检测，产物L‑苯丙氨酸的浓度和对映体过量值用高效液相色谱测定。
-
公开(公告)号：CN105112468B
公开(公告)日：2019-01-08
申请号：CN201510661106.0
申请日：2015-10-14
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种多酶耦联体系制备手性胺的方法，属于生物催化不对称转化技术领域。本发明构建了胺脱氢酶与甘油脱氢酶、胺脱氢酶与甲酸脱氢酶以及胺脱氢酶与甘油脱氢酶、甲酸脱氢酶的多酶耦联体系，实现手性胺的不对称制备和辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的再生。本发明所提供的多酶耦联体系及其制备手性胺的方法，具有产品转化率高，反应条件温和，操作简单，辅酶可再生等优势，成本低、酶利用率高，适合工业化生产。
-
公开(公告)号：CN104404026B
公开(公告)日：2017-07-18
申请号：CN201410748389.8
申请日：2014-12-09
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种包埋胺脱氢酶的聚乙烯亚胺‑氧化钛及其制备方法，属于固定化酶技术领域。该包埋有胺脱氢酶的聚乙烯亚胺(PEI)‑氧化钛固定化颗粒，粒径为100～600nm，其中PEI在固定化过程中具有催化和模板双重作用，即PEI通过分子中的氨基基团与钛前驱体分子之间的静电和氢键作用促进氧化钛的形成，又能通过PEI的结构为模板诱导并调控氧化钛粒子的生成。其制备方法过程包括：配置PEI(直链和支链)及含有胺脱氢酶混合液；配置钛的前驱体二‑(2‑羟基丙酸)二氢氧化二铵合钛(Ti‑BALDH)溶液；将钛的前驱体溶液逐滴加入到PEI及胺脱氢酶的混合液，搅拌生成包埋胺脱氢酶的PEI‑氧化钛固定化颗粒。本发明的优点在于：制备条件温和，工艺简单易行，所得包埋固定化颗粒具有固定化能力强，重复使用稳定性好且能够明显提高胺脱氢酶的温度稳定性。
-
公开(公告)号：CN106191207A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610548837.9
申请日：2016-07-13
Applicant: 厦门大学
IPC: C12Q1/26
Abstract: 本发明公开了一种高通量检测菌株耐有机溶剂氧化还原酶的方法，涉及酶检测和生物催化剂的高通量筛选。包括菌株培养、细胞破胞、进一步统一多种酶的反应条件(有机溶剂、温度、缓冲液及激活因子)、构建多种有机溶剂体系酶活性高通量检测平台等。通过在粗酶液中加入不同浓度的氯化钠，稳定耐盐、嗜盐酶的结构，使其正确折叠，减少假阴性的结果；并通过加入聚乙烯亚胺，提高氧化还原酶的稳定性，提高筛选效率。运用所建立平台可对大量菌株同时进行多种氧化还原酶耐多种有机溶剂耐受性的检测，有利于最大限度地同时挖掘所考察菌株的应用潜力,获得工业生物催化应用所需的耐有机溶剂的氧化还原酶，并提高筛选效率，减少人力、物力及时间成本的投入。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
65
records
(took 0.018 seconds)
