一种基于重组表达提高纳豆激酶产量的方法

    公开(公告)号:CN117947007B

    公开(公告)日:2025-05-09

    申请号:CN202311508829.8

    申请日:2023-11-13

    Abstract: 本发明公开了一种基于重组表达提高纳豆激酶产量的方法,通过构建表达质粒pMA5‑NK,将其转化到枯草芽孢杆菌WB800中,得到重组枯草芽孢杆菌菌株。将基因工程菌接种至种子培养基中进行种子活化,种子培养基包括如下组分:蛋白胨10~15 g/L,酵母提取物20~25 g/L,K2HPO4 1~5 g/L,KH2PO4 1~5 g/L,甘油4~8 g/L,pH值为6.0~8.0;将活化后的种子液接种至发酵培养基中进行发酵培养,得到发酵菌液,发酵培养基包括如下组分:乳糖10~15 g/L,糖蜜10~15 g/L,豆粕粉10~15 g/L,蛋白胨10~15 g/L,K2HPO4 1~2 g/L,KH2PO4 1~2 g/L,MgSO4 0.5~1 g/L,CaCl2 0.2~1 g/L,ZnSO4 0.01~0.05 g/L,pH值为pH值为6.0~8.0。本发明通过发酵后期添加氨基酸和食品级吐温‑80,使纳豆激酶的产酶量达到9763.8 IU/mL,为纳豆激酶的生产的提供了新方法,具有广阔应用前景。

    一种发酵-分离耦合提高丁酸梭菌活菌数的方法

    公开(公告)号:CN119372100A

    公开(公告)日:2025-01-28

    申请号:CN202411567324.3

    申请日:2024-11-05

    Abstract: 本发明公开了一种发酵‑分离耦合提高丁酸梭菌活菌数的方法,采用阴离子交换树脂原位分离发酵过程中产生的有机酸,提高丁酸梭菌的活菌数。本发明采用恒pH(7.0)补料分批发酵的方式对丁酸梭菌进行培养,当发酵液中的葡萄糖含量低于5 g/L时,添加一定量的新鲜培养基使葡萄糖浓度达到10~15g/L;当发酵环境pH低于6.5时,向培养基中加入适量的阴离子交换树脂,调节发酵液的pH至7.0。使用离子交换树脂建立发酵‑分离耦合工艺,解除了发酵过程中有机酸对丁酸梭菌的生长抑制,提高了活菌数,为其菌剂制备过程奠定了良好的基础。离子交换树脂洗脱后可循环利用,达到了降低成本的目的。

    一种能提高枯草芽孢杆菌纳豆激酶产量的大豆蛋白肽的制备与应用

    公开(公告)号:CN112746091B

    公开(公告)日:2024-06-25

    申请号:CN202011619990.9

    申请日:2020-12-30

    Abstract: 本发明公开了一种能提高枯草芽孢杆菌纳豆激酶产量的大豆蛋白肽的制备与应用,将大豆蛋白粉过筛得到大豆蛋白微粉,加入去离子水搅拌均匀配制大豆蛋白溶液A,向悬浊液A中加入碱性蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶进行分段水解,第一阶段采用碱性蛋白酶酶解,第二阶段通过复合蛋白酶及木瓜蛋白酶进行复合酶解得到大豆蛋白酶解液B,将酶解液离心取上清液C,进行超滤分离得到大豆肽D,采用大孔吸附树脂脱盐纯化得到大豆肽E,采用活性碳吸附色谱对大豆肽E进一步纯化,得到具有对枯草芽孢杆菌纳豆激酶产量具有明显促进效果的大豆肽F。本发明可应用于发酵领域,且制备方法简单可控,适用于工厂量产。

    一种利用油莎豆固态发酵生产纳豆激酶的方法

    公开(公告)号:CN117511919A

    公开(公告)日:2024-02-06

    申请号:CN202311483584.8

    申请日:2023-11-08

    Abstract: 本发明公开了一种利用油莎豆固态发酵生产纳豆激酶的方法,利用油莎豆作为唯一基质,将纳豆激酶生产菌接种于该固体培养基上生产纳豆激酶,包括清洗、粉碎、浸泡、灭菌、接种、发酵、浸提等工艺。发酵过程中控制温度在30‑40℃,湿度在60‑80%,培养基厚度在1‑5 cm,发酵16‑32 h,纳豆激酶的产酶量达到8628.3 IU/g。与使用大豆为原料的传统发酵方法相比,油莎豆发酵过程中产生的氨味低,生产的纳豆激酶更容易被接受。本发明利用油莎豆固态发酵生产纳豆激酶,简化了发酵过程,降低了纳豆激酶的生产成本,为纳豆激酶的生产的提供了新方法,具有广阔的应用前景。

    一种双菌共培养体系利用混糖原料生产L-鸟氨酸的方法

    公开(公告)号:CN114854661B

    公开(公告)日:2024-01-30

    申请号:CN202210614119.2

    申请日:2022-06-01

    Abstract: 本发明公开了一种双菌共培养体系利用混糖原料生产L‑鸟氨酸的方法,以鸟氨酸高产菌株Corynebacteriumglutamicum jp‑07092为出发菌株构建木糖利用菌株Corynebacterium glutamicum  GX01和阿拉伯糖利用菌株Corynebacterium glutamicum GA01;利用双菌共培养体系发酵生产L‑鸟氨酸。本发明方法可以利用木糖和阿拉伯糖,使其能够生产鸟氨酸的同时也在一定程度上解决了只能利用单一葡萄糖而造成的发酵成本高的问题;通过双菌共培养体系的构建,可实现谷氨酸棒杆菌利用木糖、阿拉伯糖、葡萄糖的复杂碳源生产鸟氨酸,减少了环(56)对比文件李燕军;赵岩;黄龙辉;李娟;谢希贤;陈宁.微生物同步利用葡萄糖和木糖代谢工程概述.发酵科技通讯.2017,(第01期),第54-59页.

    一种利用火麻籽粕固态发酵生产纳豆激酶的方法

    公开(公告)号:CN115404227A

    公开(公告)日:2022-11-29

    申请号:CN202211162541.5

    申请日:2022-09-22

    Abstract: 本发明公开了一种利用火麻籽粕固态发酵生产纳豆激酶的方法,利用火麻籽粕作为唯一基质,将纳豆激酶生产菌接种于该固体培养基上,控制温度在30‑40℃,湿度在60‑80℃,发酵16‑24 h,纳豆激酶的产酶量达到9592.8IU/g。本发明利用榨油废弃物火麻籽粕作为唯一发酵基质,极大地降低了纳豆激酶生产成本,简化了发酵过程,同时实现了火麻籽粕的高价值利用。火麻籽清香味很好地中和了纳豆激酶发酵过程中产生的氨味,使纳豆激酶更易被接受。该方法是首次使用火麻籽粕固态发酵生产纳豆激酶,为纳豆激酶的生产的提供了新方法,具有广阔应用前景。

    一种利用丁酸液态发酵紫红曲霉的方法

    公开(公告)号:CN113005043B

    公开(公告)日:2022-06-03

    申请号:CN202110340840.2

    申请日:2021-03-30

    Abstract: 本发明公开了一种利用丁酸液态发酵紫红曲霉的方法。发酵培养基为豆渣10~50 g/L,硫酸铵10~30 g/L,磷酸二氢钾1~10 g/L,氯化钾0.1~1 g/L,七水合硫酸亚铁0~0.1 g/L,氯化钙0.1~1 g/L,丁酸0.02~0.2 g/L,pH 3~5.5。丁酸可以增强组蛋白乙酰化的水平,催化形成多聚酮的活性分子,有效促进紫红曲霉聚酮体代谢途径生产色素、莫纳克林K等次级代谢产物。本发明方法可以显著提高紫红曲霉色素和莫纳克林K的产量,并且促进紫红曲霉自身分泌纤维素酶和蛋白酶,可有效分解豆渣,实现废弃资源再利用,有效降低生产成本,兼具环保和经济价值。

    一种包含废弃豆腐黄浆水和废弃豆渣的发酵培养基及其应用

    公开(公告)号:CN108410782B

    公开(公告)日:2022-04-22

    申请号:CN201810513826.6

    申请日:2018-05-25

    Abstract: 本发明公开了一种包含废弃豆腐黄浆水和废弃豆渣的发酵培养基及其应用,所述每升发酵培养基中包括如下组分:处理后的废弃豆腐黄浆水500 mL‑1000 mL,终处理的废弃豆渣60~80 g,无机盐为0.25~30 g,pH 6.5‑7.5。本发明采用酶解与陶瓷膜过滤相结合的处理方式处理废弃豆腐黄浆水,可得到蛋白质截留率为78%~85%,总糖透过率为92%~96%;通过处理将废弃豆渣中的大量纤维素水解成为葡萄糖,供谷氨酸棒杆菌发酵中所需的碳源。本发明可以将豆腐黄浆水和豆渣这些生产中的废弃物得以利用,不仅可以降低工业生产的成本、避免了废弃物资源的浪费还可以减少了废弃材料对环境的污染,同时提高了谷氨酸棒杆菌的生物量及L‑鸟氨酸的产量。

    一种利用豆腐黄水发酵生产的生物农药及其制备方法

    公开(公告)号:CN108271785B

    公开(公告)日:2021-08-06

    申请号:CN201810088052.7

    申请日:2018-01-30

    Abstract: 本发明公开了一种利用豆腐黄水发酵生产的生物农药及其制备方法,所述生物农药是由微生物利用豆腐黄浆水作为发酵原料发酵得到的,发酵产物中含有γ‑聚谷氨酸和抗菌肽。所述生物农药对植物病原性真菌有明显的抑菌效果。取豆腐生产中沥出的黄浆水,调节豆腐黄浆水的pH=6.5~7.5;将微生物种子液按2%~10%(V/V)的接种量接入豆腐黄浆水中,发酵温度25℃~40℃,好氧发酵20 h~72 h;发酵产物中含有γ‑聚谷氨酸和抗菌肽作为生物农药。本发明方法可以充分回收利用废弃物豆腐黄浆水,综合利用,减少环境污染,同时变废为宝,提高经济效益;利用豆腐黄浆水粗原料降低成本,能耗低,污染小,生产效率高,工艺简单,操作方便。

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