公开(公告)号：CN113817764A

公开(公告)日：2021-12-21

申请号：CN202111261808.1

申请日：2021-10-28

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈瑞爱 ,  兰虹 ,  熊挺 ,  何献铭 ,  杨泽坤

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N15/34 ,  C07K14/075 ,  C12N1/21 ,  C07K1/22 ,  A61K39/235 ,  A61P31/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种I群4型禽腺病毒Fiber‑2蛋白的制备及应用。所述制备方法包括：以FAdV‑4毒株DNA为模板，设计引物扩增出fiber2序列，测序正确后，将fiber2序列进行密码子优化，然后将其构建到pMal‑c2X载体上，得到重组质粒pMal‑c2X‑FAV4‑fiber2；最后转化大肠杆菌BL21进行诱导表达，得到I群4型禽腺病毒Fiber‑2蛋白。本发明方法只需要在37℃诱导3h即可，时间短，操作简单，其表达的目的蛋白是有利于纯化的可溶性蛋白，只需要一步镍柱层析，便可获得大量目的蛋白，而且成本低，易放大。

公开(公告)号：CN109517809B

公开(公告)日：2022-03-22

申请号：CN201811449640.5

申请日：2018-11-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 冯涛声 ,  刘定祥 ,  陈瑞爱 ,  李淑敏 ,  李延鹏 ,  梁佳琪 ,  袁丽霞 ,  朱庆春 ,  罗琼 ,  熊挺

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/50 ,  C12N15/63

Abstract: 本发明公开了一株缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明将野生型传染性支气管炎病毒的E蛋白的第26位氨基酸由丙氨酸突变为苯丙氨酸，得到的缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒。本发明通过构建缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒，以及获得了回复突变体，对突变后的病毒进行分离纯化方法及其特性分析，有助于开发特异性的抗病毒药物和预防病毒感染的有效疫苗，对冠状病毒的研究具有重大的公共卫生和经济意义。

公开(公告)号：CN113088539A

公开(公告)日：2021-07-09

申请号：CN202110217088.2

申请日：2021-02-26

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈瑞爱 ,  李淋雨 ,  熊挺

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/40 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种表达IBDV VP2蛋白的重组腺病毒及制备与应用。通过PCR扩增IBDV的VP2基因片段与穿梭质粒pAdtrack‑GOI的双酶切产物进行同源重组得到穿梭质粒pAdTrack‑GOI‑VP2，将穿梭质粒线性化后与携带了腺病毒骨架质粒pAdEasy‑1的BJ5183感受态细胞进行菌内同源重组得到重组腺病毒载体pAd‑VP2；最后将pAd‑VP2线性化后转染HEK293A细胞得到重组腺病毒rAd‑VP2。本发明重组腺病毒rAd‑VP2纯化后滴度可达6.72×109GFU/mL，接种动物后能够有效刺激特异性抗体的产生，为IBDV亚单位疫苗的研发奠定一定的基础。