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公开(公告)号：CN110129246B
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN201910355278.3
申请日：2019-04-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一株供体菌、其构建方法与应用以及质粒抑制剂筛选方法。所述的供体菌包含自杀型荧光质粒和pCRISPR‑LUX质粒，该供体菌本身不表达荧光；而所述的自杀型荧光质粒可通过接合转移进入受体菌，由于接合子脱离了失去核酸内切酶活性的Cas9蛋白的抑制而可以表达荧光。本发明还提供了所述的供体菌的构建方法及应用，所述的应用为通过分析接合子的荧光表达情况对接合转移效率进行定量分析或质粒抑制剂的筛选。同时，本发明还提供了一种基于CRISPR/dCas9筛选质粒抑制剂的方法，可实现高通量筛选抑制耐药质粒接合转移的物质，筛选过程高效、方便、快捷，适用范围较为广泛，为克服细菌耐药性提供新的思路和方法。
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公开(公告)号：CN112229896A
公开(公告)日：2021-01-15
申请号：CN202010862590.4
申请日：2020-08-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N27/626 , C12Q1/10 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种快速检测菌株携带tet(X)基因的方法，本研究基于tet(X)基因表达的酶能降解替加环素的功能，开发了一种使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI‑TOF MS)的方法，本发明的检测方法操作简便、快速，准确性和特异性高；相比较于传统的CIM方法，本发明所公开的方法的检测时间由原来的18～24小时大大缩短至4～5小时，同时，本发明的检测方法的准确性和特异性与CIM方法相当。
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公开(公告)号：CN111893068A
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN202010803862.3
申请日：2020-08-11
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/20 , C02F3/34 , B09C1/10 , C12R1/01 , C02F101/38
Abstract: 本发明属于抗生素的生物降解技术领域，公开了一种Elizabethkingia.anophelis 279-2菌株及其在降解四环素类抗生素中的应用，本发明提供一种Elizabethkingia.anophelis 279-2菌株，该菌株于2020年7月23日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:61096，该菌株的16S rDNA具有如SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列，其对四环素类抗生素的多西环素、米诺环素和伊瓦拉环素具有良好的降解作用，能够在16小时后降解64.2％的伊瓦拉环素，为四环素类抗生素的多西环素、米诺环素和伊瓦拉环素残留问题提供了安全、环保的解决途径。
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公开(公告)号：CN107460119B
公开(公告)日：2020-10-23
申请号：CN201610375781.1
申请日：2016-05-30
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12M1/38 , C12M1/34 , C12M1/22 , C12M1/00 , C12Q1/06 , C12Q1/04 , G06T7/00 , G06T11/20 , G06T13/00
Abstract: 本发明提供的一种监测细菌生长的设备监测方法，设备包括恒温培养箱、扫描仪、计算机，以及于计算机CPU安装的细菌生长监测处理系统，所述恒温培养箱内装有通过数据线和集线器与计算机连接的若干个扫描仪，每个扫描仪内安放有若干培养皿；于所述计算机CPU安装的细菌生长监测系统，由图像采集模块、图像处理模块、图像分析模块、结果呈现模块组成。本发明监测方法通过扫描仪获得菌落大小和像素面积的一致性，进而得到细菌生长情况，相比于传统通过分光光度计的方法测细菌量，该方法大大减少了系统误差和偶然误差；本发明监测方法不仅可以应用于细菌计数，细菌分离和鉴定。还可以用作混合样品检测，高通量筛选质粒抑制剂等，并且具有微生物成像的功能。
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公开(公告)号：CN108090501B
公开(公告)日：2020-08-18
申请号：CN201711190762.2
申请日：2017-11-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于平皿实验和深度学习的抑菌程度识别方法，包括下述步骤：S1、确定药敏纸片位置；S2、测定抑菌圈大小；S3、构造样本集：给深度学习模型构造带标签的样本集，用于训练模型；S4、构建及训练模型：构建能够用来识别药敏纸片的模型，并用训练样本集进行训练；S5、使用模型识别药敏纸片；S6、判定药物的抑菌程度：通过模型识别出的药物种类，从数据库中查询对应的抑菌标准，再确定抑菌圈的直径属于标准中的哪一个区间，从而得到药物的抑菌程度。本发明的方法，使得操作人员只需拍摄平皿图像，就能从图像中识别出每个药敏纸片所属的药物种类，以及其对应的抑菌圈的大小，使得自动化抑菌程度识别成为可能。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111172180A
公开(公告)日：2020-05-19
申请号：CN202010010949.5
申请日：2020-01-06
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种四环素类抗生素降解基因tet(X)的优化及其在真核表达系统中的应用，为构建一种可分泌四环素类抗生素降解酶的真核表达系统，从而为四环素类抗生素的降解提供了一种新的途径，本发明在基因tet(X)序列的基础上经过优化得到适用于真核表达系统的tet(X)*序列，并首次使用pPIC9K载体将优化后的基因稳定的转入到毕赤酵母GS115中，构建得到一种工程酵母，该工程酵母具有表达Tet(X)蛋白的能力。通过工程酵母的表达效果试验可见，该工程酵母外源基因所表达的蛋白质在NADPH、Mg2+、O2的参与下表现出生物功能，对四环素类抗生素具有高效的降解作用。
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公开(公告)号：CN110467603A
公开(公告)日：2019-11-19
申请号：CN201910610738.2
申请日：2019-07-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D403/06 , C07D401/06 , C07D249/04 , A61K31/496 , A61K31/5377 , A61P31/04
Abstract: 本发明属于药物化学领域，特别涉及一种具有哌嗪及1,2,3-三氮唑仲胺侧链的截短侧耳素衍生物及制备与应用。所述的具有哌嗪及1,2,3-三氮唑仲胺侧链的截短侧耳素衍生物，为式2化合物或其药学上可接受的盐，以及所述的式2化合物或其药学上可接受的盐的溶剂化合物、对映异构体、非对映异构体、互变异构体或其任意比例的混合物，包括外消旋混合物：该类化合物不仅具有良好的体外抗菌活性，还具有较沃尼妙林及瑞它莫林制备成本低的优势，因而特别适合作为新型抗菌药物用于防治人或动物细菌感染性疾病，尤其是耐药金黄色葡萄球菌引起的感染性疾病。
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公开(公告)号：CN106699690B
公开(公告)日：2019-09-10
申请号：CN201611115910.X
申请日：2016-12-07
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D295/185 , C07D295/192 , C07D295/15 , A61K31/495 , A61K31/496 , A61P31/04
Abstract: 本发明属于药物化学领域，公开了一种具有酰基哌嗪基侧链的截短侧耳素类化合物及其制备方法和用途。该截短侧耳素衍生物是具有如式3、式4和式5所示结构的化合物及其可药用盐。其中，R1、R2、R3各自独立地选自氢原子、羟基、氨基、巯基、羟甲基、胺甲基、硝基、卤素、三卤代甲基、甲基、天然氨基酸酰氨基和碳原子数为1～6的烷氧基中的一种。本发明具有酰基哌嗪基侧链的截短侧耳素类化合物具有良好的抑制金黄色葡萄球菌和支原体活性，特别适合作为新型抗菌药物用于防治人或动物经支原体或多药耐药菌感染引起的感染性疾病。
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公开(公告)号：CN110129349A
公开(公告)日：2019-08-16
申请号：CN201910282838.7
申请日：2019-04-10
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了基于ISApl1插入序列构建能表达荧光的自杀型质粒及菌株的方法。该自杀型质粒的构建方法如下：通过AflII和XhoI双酶切pUC19-tpm质粒和pUC19-RP4质粒，然后将电泳后回收的产物用连接酶连接，构建pTFX-RP4质粒；然后通过EcoRI和Spel双酶切pTFX-RP4质粒和pBBR1MCS4-LuxCDAB质粒，再将电泳后回收的产物用连接酶连接，构建能表达荧光的自杀型质粒。再进一步将自杀型质粒转化大肠杆菌WM3064感受态细胞，并将获得的荧光标记的大肠杆菌与目标菌株混合培养，可构建荧光菌株。本发明方法效率高、成本低，适用于构建耐药菌株、药动药效学评价或筛选药物。
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公开(公告)号：CN110066820A
公开(公告)日：2019-07-30
申请号：CN201910355729.3
申请日：2019-04-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种荧光菌株E.coli C600及构建方法与应用。通过构建含有R6k复制子、以两个ISApl1夹着Lux基因簇和亚碲酸盐耐药基因形成的转座单元以及RP4接合转移基因的重组质粒，将所述重组质粒转入其能够复制的宿主菌中得到重组菌株，再将所述的重组菌株与E.coli C600混合培养，即可筛选得到所述的荧光菌株E.coli C600。所述的荧光E.coli C600获得外援DNA的能力不受影响，稳定性强，能够稳定遗传，荧光不会随着细菌传代而丢失，可作为接合实验的受体菌。所述的荧光E.coli C600在质粒接合转移相关领域中能够更高效、直观地鉴别受体菌和接合子，具有良好的应用前景。
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