一种旱稻孢囊线虫LAMP快速检测方法

    公开(公告)号:CN107142329A

    公开(公告)日:2017-09-08

    申请号:CN201710554029.8

    申请日:2017-07-09

    Abstract: 本发明涉及一种旱稻孢囊线虫LAMP快速检测方法。通过比对旱稻孢囊线虫核糖体rDNA‑ITS序列,筛选获得特异性位点,设计筛选出5条LAMP引物HE‑F3、HE‑B3、HE‑FIP、HE‑BIP和HE‑LB。本发明提取旱稻孢囊线虫基因组DNA,通过环介导等温扩增,再对扩增产物显色和观察,从而快速检测和鉴定出旱稻孢囊线虫,能够从14种植物线虫22个群体中特异的检测出旱稻孢囊线虫,检测阈值为1/20000头孢囊,灵敏度较普通PCR方法的高10倍。本发明的检测方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便、高效快捷,结果肉眼即可观察,在旱稻孢囊线虫快速检测和早期和田间诊断方面具有很高的应用价值。

    菲利普孢囊线虫Taqman MGB探针实时荧光定量PCR检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN104928372B

    公开(公告)日:2017-08-08

    申请号:CN201510295749.8

    申请日:2015-06-02

    Abstract: 本发明为“菲利普孢囊线虫Taqman MGB探针实时荧光定量PCR检测方法及其应用”,属植物线虫分子检测技术领域。“菲利普孢囊线虫Taqman MGB探针实时荧光定量PCR检测方法及其应用”公开了一种基于菲利普孢囊线虫RAPD特异性序列设计了一条特异的荧光探针HF‑probe和一组特异性引物qHF‑R和qHF‑F,上述探针和引物能从菲利普孢囊线虫中扩增获得特异性的荧光曲线,从而实现对菲利普孢囊线虫的快速分子检测。本发明具有灵敏度高,特异性强且快速准确,在菲利普孢囊线虫病的早期诊断和田间监测预警等方面,具有很高的实际应用价值。

    一种香蕉穿孔线虫特异性LAMP检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN102154476B

    公开(公告)日:2014-06-25

    申请号:CN201110032956.6

    申请日:2011-01-31

    Inventor: 彭德良 彭焕 王琼

    Abstract: 本发明为“一种香蕉穿孔线虫特异性LAMP检测方法及其应用”,属生物技术领域。一种香蕉穿孔线虫特异性的循环恒温扩增(LAMP)检测方法,其反应体系中香蕉穿孔线虫特异性LAMP检测引物RSF3、RSB3、RSFIP、RSBIP和RSLF,通过对罹病植物组织中香蕉穿孔线虫或单头香蕉穿孔线虫DNA提取,LAMP等温扩增,从而快速和特异性检测香蕉穿孔线虫。本发明的检测方法特异性强、灵敏度高、成本低廉、操作简便,在香蕉穿孔线虫现场快速检测和香蕉穿孔线虫病的早期诊断方面具有很高的应用价值。

    一种菲利普孢囊线虫LAMP快速检测方法及应用

    公开(公告)号:CN103103285B

    公开(公告)日:2014-02-26

    申请号:CN201310053055.4

    申请日:2013-02-18

    Abstract: 本发明涉及一种菲利普孢囊线虫LAMP快速检测方法及应用。根据菲利普孢囊线虫RAPD特异性片段序列,设计筛选出6条LAMP引物HF11-F3、HF11-B3、HF11-FIP、HF11-BIP、HF11-LB和HF11-LF,通过提取菲利普孢囊线虫基因组DNA,环介导等温扩增体系建立及其优化、扩增产物显色和观察,从而快速检测和鉴定出菲利普孢囊线虫。本发明的检测方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便、高效快捷,结果肉眼即可观察,在菲利普孢囊线虫快速检测和菲利普孢囊线虫病的早期和田间诊断方面具有很高的应用价值。

    豌豆孢囊线虫特异性RAPD标记和SCAR标记快速分子检测方法

    公开(公告)号:CN102690825B

    公开(公告)日:2013-07-03

    申请号:CN201210200468.6

    申请日:2012-06-14

    Abstract: 本发明为豌豆孢囊线虫特异性RAPD标记和SCAR标记快速分子检测方法,属生物技术领域。豌豆孢囊线虫特异性RAPD标记的DNA片段,其具有如SEQ ID NO1所示的核苷酸序列。根据该豌豆孢囊线虫特异性RAPD扩增片段,设计特异性引物HgoF1和HgoR1,将其转化为更加稳定的SCAR标记片段,在SCAR标记快速分子检测豌豆孢囊线虫的方法中,可扩增出544bp的特异性片段。本发明提高了分子检测灵敏度并且快速准确,在豌豆孢囊线虫检测以及豌豆孢囊线虫病的早期诊断方面,具有很高的应用价值。

    一种菲利普孢囊线虫LAMP快速检测方法及应用

    公开(公告)号:CN103103285A

    公开(公告)日:2013-05-15

    申请号:CN201310053055.4

    申请日:2013-02-18

    Abstract: 本发明涉及一种菲利普孢囊线虫LAMP快速检测方法及应用。根据菲利普孢囊线虫RAPD特异性片段序列,设计筛选出6条LAMP引物HF11-F3、HF11-B3、HF11-FIP、HF11-BIP、HF11-LB和HF11-LF,通过提取菲利普孢囊线虫基因组DNA,环介导等温扩增体系建立及其优化、扩增产物显色和观察,从而快速检测和鉴定出菲利普孢囊线虫。本发明的检测方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便、高效快捷,结果肉眼即可观察,在菲利普孢囊线虫快速检测和菲利普孢囊线虫病的早期和田间诊断方面具有很高的应用价值。

    豌豆孢囊线虫特异性RAPD标记和SCAR标记快速分子检测方法

    公开(公告)号:CN102690825A

    公开(公告)日:2012-09-26

    申请号:CN201210200468.6

    申请日:2012-06-14

    Abstract: 本发明为“豌豆孢囊线虫特异性RAPD标记和SCAR标记快速分子检测方法”,属生物技术领域。豌豆孢囊线虫特异性RAPD标记的DNA片段,其具有如SEQ ID NO1所示的核苷酸序列。根据该豌豆孢囊线虫特异性RAPD扩增片段,设计特异性引物HgoF1和HgoR1,将其转化为更加稳定的SCAR标记片段,在SCAR标记快速分子检测豌豆孢囊线虫的方法中,可扩增出544bp的特异性片段。本发明提高了分子检测灵敏度并且快速准确,在豌豆孢囊线虫检测以及豌豆孢囊线虫病的早期诊断方面,具有很高的应用价值。

    旱稻孢囊线虫特异性RAPD和SCAR标记快速分子检测方法

    公开(公告)号:CN102690824A

    公开(公告)日:2012-09-26

    申请号:CN201210200140.4

    申请日:2012-06-14

    Abstract: 本发明涉及旱稻孢囊线虫特异性RAPD和SCAR标记快速分子检测方法,属生物技术领域。旱稻孢囊线虫特异性RAPD标记的DNA片段,具其如SEQ ID NO1所示的核苷酸序列。根据旱稻孢囊线虫特异性RAPD扩增片段,设计特异性引物HeF1和HeR1,将其转化为更加稳定的SCAR标记片段,在SCAR标记快速分子检测旱稻孢囊线虫的方法中,可扩增出434bp的特异性片段。本发明提高了分子检测灵敏度并且快速准确,在旱稻孢囊线虫检测以及旱稻孢囊线虫病的早期诊断方面,具有很高的应用价值。

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