杜氏盐藻TPSP基因、其编码蛋白及其克隆方法和植物转化载体的构建方法

    公开(公告)号:CN101033469A

    公开(公告)日:2007-09-12

    申请号:CN200710037424.5

    申请日:2007-02-09

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种杜氏盐藻TPSP基因、其编码蛋白及其克隆方法和植物转化载体的构建方法。该基因具有SEQ NO 1所示的碱基序列。本发明首次发现杜氏盐藻DvTPSP基因,并首次提供杜氏盐藻DvTPSP基因的全长cDNA序列;经过序列分析,并与其他物种TPS基因对比,可知该基因在盐藻中编码海藻糖-6-磷酸合成酶和海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶。然而,该基因和已知的海藻糖合成酶基因有较大的不同,是在盐藻中首次发现并首次克隆到一个新的海藻糖合成酶基因。将该基因转入不同的酵母突变体中进行功能鉴定,发现该基因在盐敏感突变体G19中具有一定的盐耐受性。另外,将该基因通过农杆菌遗传转化高等植物,进行了分子鉴定和逆境生理分析,结果证明该基因能提高植物的逆境耐受性,特别是抗旱能力,因此该基因具有应用到植物抗逆基因工程的价值。

    在低盐和高盐渗透胁迫下盐藻差异表达的标签、基因片段及其克隆方法

    公开(公告)号:CN1920042A

    公开(公告)日:2007-02-28

    申请号:CN200610029210.9

    申请日:2006-07-21

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及在低盐和高盐渗透胁迫下杜氏盐藻(Dunlaliella virids)差异表达基因片段及其分离方法。本发明使用SAGE技术由极端模式生物盐藻(Dunaliellaviridis)中得到8个与盐胁迫相关的基因标签,通过PCR获得对应标签的基因片段,经RT-PCR验证这8个受盐胁迫诱导表达的基因片段SEQ ID NO:9~16,确实与盐胁迫相关基因。其中,SEQ ID NO:9~12所代表的4个基因在低盐渗透环境下高水平表达,在高盐渗透环境呈低水平表达;而SEQ ID NO:13~16所代表的4个基因在高盐渗透胁迫条件下高水平表达,低盐渗透胁迫条件下呈低水平表达。为进一步研究盐藻耐盐分子机制奠定了基础。

    衣藻红色荧光标记蛋白基因CrmRFP、其合成方法及其真核表达载体的构建方法

    公开(公告)号:CN1844388A

    公开(公告)日:2006-10-11

    申请号:CN200610026203.3

    申请日:2006-04-28

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种衣藻红色荧光标记蛋白基因CrmRFP、其合成方法及其真核表达载体的构建方法。本发明的衣藻红色荧光标记蛋白基因CrmRFP具有SEQ NO23所示的核苷酸序列序列。其合成方法为:比对衣藻密码子使用频率表,找出红色荧光蛋白mRFP衣藻使用频率较低的八个密码子,通过同义突变,使用频率较高的密码子把这八个使用频率较低的密码子替换掉;根据上述的八个使用频率较高的密码子设计引物,借助重叠延伸法,通过五轮15次PCR反应得到改造之后的全长mRFP,命名为CrmRFP。本发明为衣藻的细胞学和分子生物学研究提供了另外一个重要的荧光蛋白标记。同时,为在衣藻中同时使用双(多)色荧光标记奠定了基础。

    谷氨酰胺合成酶基因、其编码蛋白及其克隆方法

    公开(公告)号:CN102250925B

    公开(公告)日:2012-10-31

    申请号:CN201110148438.0

    申请日:2011-06-03

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种谷氨酰胺合成酶基因、其编码蛋白及其克隆方法。本发明的基因来源于盐藻,为SEQIDNO1所示的碱基序列,该基因具有合成谷氨酰胺合成酶的功能,并且证明了该基因能够显著提高模式生物大肠杆菌合成谷氨酰胺的能力。这也预示了所公开的全长基因及氨基酸序列,其在提高生物体的氮利用效率、增加生物体氮元素含量的植物基因工程方面具有应用价值。

    高同源度多基因家族的表达谱的构建方法

    公开(公告)号:CN101096667B

    公开(公告)日:2011-06-08

    申请号:CN200710041192.0

    申请日:2007-05-24

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及高同源度基因家族中各个成员基因表达谱的构建方法。本发明将RT-PCR随机克隆与荧光实时定量PCR相结合,使用RT-PCR随机克隆获得各个成员基因的表达状态以及表达的基因的相对丰度,再使用实时荧光定量PCR获得各基因家族总体表达量,将两者结合得到基因家族所有成员基因的表达状态及各个表达的成员基因的表达谱的方法。本发明为多基因家族表达调控的研究提供了新的方法,同时也为禾本科作物醇溶蛋白含量的基因工程改造提供了理论指导。

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