公开(公告)号：CN108152499A

公开(公告)日：2018-06-12

申请号：CN201711278198.X

申请日：2017-12-06

Applicant: 华南农业大学 ,  广东温氏食品集团股份有限公司

Inventor： 杨金易 ,  沈玉栋 ,  曾道平 ,  谭庶 ,  孙远明 ,  徐振林 ,  陈丽 ,  韦田

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/535 ,  G01N21/31

Abstract: 本发明公开了一种金刚烷胺的抗原、抗体及其酶联免疫检测试剂盒。本发明首先制备了金刚烷胺半抗原，其分子结构式如式（Ⅰ）所示： ，然后与偶联载体蛋白后得到人工抗原，然后通过杂交瘤技术获得金刚烷胺的单克隆抗体，从而以所述金刚烷胺单克隆抗体建立了竞争性酶联免疫检测方法及试剂盒。本发明的金刚烷胺酶联免疫检测试剂盒可用于检测动物组织样品中金刚烷胺的含量，检出限为0.10μg/kg，IC50为0.79μg/L，线性检测范围为0～16.2μg/L，该方法简便、快速，成本低廉、灵敏度高、特异性强，适合现场快速检测。

公开(公告)号：CN108129412A

公开(公告)日：2018-06-08

申请号：CN201711431980.0

申请日：2017-12-26

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  何凡 ,  邹婷婷 ,  徐振林 ,  杨金易 ,  王弘 ,  韦晓群 ,  孙远明 ,  雷红涛

IPC: C07D263/26 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K14/415 ,  C12N9/26 ,  C07K16/44 ,  G01N33/535

Abstract: 本发明公开了一种5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮抗原、抗体及其制备方法与应用。本发明首先对5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮分子结构进行改造，包括引入羰基结构使半抗原手臂结构自由旋转度下降，使半抗原呈现构象限定性以及增加结构复杂性等等，使得分子的特征结构更好的被免疫动物所识别，从而可大大增加制备抗体的成功几率。并以此基础制备了5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮人工抗原和抗体，效价高、检测效率高；克服了传统仪器法存在周期长、专业性强、成本高，不适宜现场大批量快速检测等缺点问题。本发明的抗原抗体合成过程简单、成本低，为开发出成本低廉、检测效率高、操作简便的酶联免疫快速检测工具，奠定了基础，应用前景好。

公开(公告)号：CN105481859B

公开(公告)日：2017-10-20

申请号：CN201510782683.5

申请日：2015-11-16

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  邓丽华 ,  杨金易 ,  徐振林 ,  华彦涛 ,  王弘 ,  肖治理 ,  雷红涛 ,  孙远明

IPC: C07D471/14 ,  G01N33/543 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K16/44

Abstract: 本发明公开了一种他达那非及其结构类似物的酶联免疫检测试剂盒及其使用方法。该试剂盒包括包被有他达那非抗原的酶标板、他达那非抗体工作液、辣根过氧化物酶标记的二抗、他达那非标准品工作液、底物液、底物缓冲液、反应终止液、浓缩洗涤液。本发明同时公开了利用所述试剂盒检测保健食品中他达那非及其结构类似物的方法。本发明提供的检测他达那非及其类似物的试剂盒采用间接竞争酶联免疫吸附分析技术，最大检测范围为 0.12～7.45 ng/mL，半抑制浓度为0.933 ng/ml，检出限为0.095 ng/mL，回收率为83.0～119.2%，检出限低、灵敏度高、稳定性好，成本低，非常适合大量样品的初筛，对保健食品中他达那非的违禁添加的快速检测具有重要现实意义。

公开(公告)号：CN106814116A

公开(公告)日：2017-06-09

申请号：CN201611236382.3

申请日：2017-02-20

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  孙远明 ,  吴民富 ,  郝欣 ,  雷红涛 ,  王宇 ,  沈玉栋 ,  杨金易

IPC: G01N27/30 ,  G01N27/48

CPC classification number: G01N27/308 ,  G01N27/48

Abstract: 本发明公开了一种无标记型丙烯酰胺电化学免疫传感器及其构建方法和应用。所述电化学免疫传感器以玻碳电极作为工作电极，于玻碳电极表面固定氧化石墨烯/银纳米/壳聚糖纳米复合物，然后先后在其表面电化学聚合聚苯胺纳米线和电化学沉积金纳米颗粒，抗体通过巯基‑金键固定在电极表面。将制备的免疫传感器连接至电化学工作站，可对食品中的丙烯酰胺含量进行测定。本发明的电化学免疫传感器制备方法快速高效，特异性强，灵敏度高。

公开(公告)号：CN106496323A

公开(公告)日：2017-03-15

申请号：CN201610876473.7

申请日：2016-10-08

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 雷红涛 ,  张雅琼 ,  沈兴 ,  陆宁 ,  徐振林 ,  孙远明 ,  杨金易 ,  肖治理

IPC: C07K14/795 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K1/107 ,  C07K16/14 ,  C07K16/06 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种簇选择性赭曲霉毒素人工抗原及其广谱性多克隆抗体的制备方法。将赭曲霉毒素B经活泼酯法与载体蛋白偶联，透析后获得赭曲霉毒素人工抗原。然后将所述人工抗原乳化后免疫兔，分离纯化兔血清后得到赭曲霉毒素的广谱性多克隆抗体。该多克隆抗体对赭曲霉毒素A、B、C的识别性能均良好，对三者的IC50分别为0.85 ng/mL，3.53 ng/mL和0.29 ng/mL。本发明制备得到了有效的赭曲霉毒素B人工抗原，且得到的赭曲霉毒素多抗灵敏度高，广谱识别性良好，为建立赭曲霉毒素的广谱性免疫检测方法提供了核心原材料，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN104119277B

公开(公告)日：2016-08-17

申请号：CN201410338095.8

申请日：2014-07-16

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 孙远明 ,  罗林 ,  徐振林 ,  沈玉栋 ,  王弘 ,  雷红涛 ,  杨金易 ,  肖治理

IPC: C07D233/64 ,  C07K1/107 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/06 ,  C07K16/18 ,  G01N33/535

Abstract: 本发明属于食品安全免疫检测技术领域，具体公开了一种直接针对组胺的半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法与应用。所述半抗原的分子结构如（Ⅰ）所示：；其中，n=0～6。由上述半抗原与载体蛋白结合获得人工抗原，由上述人工抗原免疫动物获得的抗体能直接识别组胺，对其他结构类似物均不存在明显的交叉反应；基于此抗体建立的组胺免疫分析方法，较之前报道的间接衍生的方法，省去了对样品进行前处理的衍生步骤，节省有机试剂的消耗和分析时间，降低检测成本。所得多克隆抗体的效价为1：64000，半抑制浓度为56.3 mg/L，其组胺的最低检测限可达25.8 mg/L低于各国规定的限量标准。

公开(公告)号：CN105669628A

公开(公告)日：2016-06-15

申请号：CN201610021937.6

申请日：2016-01-12

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 雷红涛 ,  陈佳虹 ,  孙远明 ,  李轩 ,  李永芳 ,  沈兴 ,  陆宁 ,  张雅琼 ,  徐振林 ,  沈玉栋 ,  杨金易 ,  王弘 ,  肖治理

IPC: C07D311/36 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53

CPC classification number: C07D311/36 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  C07K19/00 ,  G01N33/5308 ,  G01N2400/00

Abstract: 本发明公开了一种黄豆苷元半抗原和完全抗原及其制备方法和应用。所述黄豆苷元半抗原的分子结构如下式（Ⅰ）或式（Ⅱ）所示：本发明以黄豆苷元为原料，经过2步化学反应分别得到黄豆苷元7-衍生物和4`-衍生物半抗原，成功地合成了黄豆苷元半抗原，合成方法安全有效，产物纯度高。在此基础上进一步采用活泼酯法制备适合于动物免疫的黄豆苷元完全抗原，以此抗原免疫Balb/c小鼠，效价可达1：32000，抑制率可达94.9%，为建立黄豆苷元的免疫分析方法提供了核心原材料和有利条件，具有广阔的实际应用前景。

公开(公告)号：CN103951630B

公开(公告)日：2016-06-01

申请号：CN201410154388.0

申请日：2014-04-17

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  沈玉栋 ,  孙远明 ,  刘凤银 ,  肖治理 ,  杨金易 ,  雷红涛 ,  王弘

IPC: C07D263/26 ,  C07K14/765 ,  C07K14/795 ,  C07K14/77 ,  G01N33/544

Abstract: 本发明公开了一种直接检测呋喃它酮代谢物AMOZ的树状半抗原、树状抗原及其应用。树状半抗原是将AMOZ的乙醛酸衍生物偶联在四分支聚酰胺-胺的活性氨基末端得到，基于该树状半抗原制备人工抗原，再以人工抗原制备抗体。通过本发明的人工抗原能够获得直接针对AMOZ的高质量抗体，抗体的效价为1:64000，基于该抗体所建立的化学发光酶联免疫分析方法（CLEIA）对AMOZ的最低检测限为0.112 ng/mL，半抑制浓度为15.26 ng/mL，可以直接用于AMOZ的检测，克服了传统方案的AMOZ半抗原、人工抗原制备出的抗体特异性差，不能直接识别AMOZ本身的缺点。本发明的树状半抗原、人工抗原及抗体在食品中AMOZ的残留检测上具有广泛的应用前景，同时该半抗原的制备思路可以为其他类似的小分子化合物的半抗原设计提供借鉴。

公开(公告)号：CN103787946B

公开(公告)日：2016-03-02

申请号：CN201310747570.2

申请日：2013-12-31

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  孙远明 ,  王雅丽 ,  沈玉栋 ,  肖治理 ,  杨星星 ,  杨金易 ,  徐振林 ,  雷红涛

IPC: C07D207/38 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K16/14 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明提供了一种异细交链孢菌酮酸人工抗原和抗体及其制备方法与应用，属于食品安全领域。所述异细交链孢菌酮酸人工抗原的分子结构如下所示：或，所述异细交链孢菌酮酸人工抗原是通过戊二醛法与载体蛋白偶联或活泼酯法与载体蛋白偶联制备得到的。利用本发明上述人工抗原制备得到的抗体的效价可达到1：32000，最低检测限为0.01ng/mL，半抑制浓度为0.77ng/mL，产生的抗体的特异性高、灵敏度高、准确度高，为建立快速、准确、灵敏的异细交链孢菌酮酸免疫检测方法奠定了基础。

公开(公告)号：CN105044333A

公开(公告)日：2015-11-11

申请号：CN201510351080.X

申请日：2015-06-24

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 雷红涛 ,  陈佳虹 ,  卢蓝蓝 ,  孙远明 ,  徐振林 ,  杨金易 ,  沈玉栋 ,  王弘 ,  肖治理

IPC: G01N33/558

CPC classification number: G01N33/558

Abstract: 本发明公开了一种吡哌酸的ELISA检测方法及其应用。该ELISA检测方法是利用吡哌酸抗体和包被原组合的ELISA检测体系建立的；所述包被原为吡哌酸包被原或喹诺酮类包被原；具体是采用异源模式，以吡哌酸抗体和包被原洛美沙星-OVA为最优组合建立的一种更加灵敏有效的吡哌酸的ELISA检测方法。本发明的ELISA检测方法高效、方便、高灵敏和高特异性，检测的线性范围（IC20～IC80）为0.9～38.5 ng/mL，半抑制浓度(IC50)为5.99 ng/mL，最低检测限为0.31 ng/mL；而且前处理方法操作简单，能够满足残留检测的要求，可应用于快速检测食品中非法添加的吡哌酸，具有广阔的应用前景。