一种检测禽白血病群特异性抗原的双抗夹心间接ELISA方法

    公开(公告)号:CN113325175A

    公开(公告)日:2021-08-31

    申请号:CN202110613582.0

    申请日:2021-06-02

    Applicant: 贵州大学

    Abstract: 本发明公开了一种检测禽白血病群特异性抗原的双抗夹心间接ELISA方法,包括:1)用禽白血病病毒RSA株p27基因序列设计一对引物以扩增p27基因,构建重组表达载体经诱导表达获得重组表达蛋白上清表达,上清表达经过纯化后作为免疫原,制备兔源、鼠源多克隆抗体;2)对包被兔源多克隆抗体的酶标板进行洗涤,37℃封闭1h,洗板;3)加入待检血清进行孵育,洗板;4)加入鼠源多克隆抗体进行孵育,洗板;5)加入酶标二抗进行孵育,洗板;6)加入TMB显色液显色,最后加入显色终止液,终止反应;7)利用酶标仪测定步骤4)酶标板孔中液体OD450nm值,根据临界值判定阴阳性。本发明具有制备周期短,成本低,特异性及重复性好,敏感性高,可靠性好等优点。

    一种基于CSF-FMD二联基因工程疫苗的制备方法

    公开(公告)号:CN103933581A

    公开(公告)日:2014-07-23

    申请号:CN201410182816.0

    申请日:2014-05-04

    Applicant: 贵州大学

    Abstract: 本发明涉及一种基于CSF-FMD二联基因工程疫苗的制备方法,公开了基于猪瘟病毒和猪O型口蹄疫病毒二联核酸疫苗的研究及应用。基于猪瘟病毒和猪O型口蹄疫病毒二联核酸疫苗主要原料为:pcDNA3.1-CSFV-E2-FMDV-O-VP1真核质粒。本发明本发明针对CSFVE2基因和FMDV-OVP1进行核酸疫苗研究,可刺激动物机体产生相应高水平的抗体,体现出很强的特异性。针对CSFV和FMDV-O引发猪的感染和传播,通过E2基因和VP1基因对两种病毒起到防控效果,可达到安全和有效的效果。

    一种微生物除臭剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN102247611B

    公开(公告)日:2013-10-02

    申请号:CN201110189038.4

    申请日:2011-07-07

    Applicant: 贵州大学

    Abstract: 本发明公开了一种微生物除臭剂及其制备方法,其菌种组成为:嗜酸乳杆菌106~109个/mL、短小芽孢杆菌106~109个/mL、枯草芽孢杆菌106~109个/mL、荧光假单胞菌105~107个/mL、沼泽红假单胞菌105~107个/mL、班图酒香酵母菌104~106个/mL、平常假丝酵母菌104~106个/mL、扩张青霉104~106个/mL、米根霉104~106个/mL、绿色木霉104~106个/mL、细黄链霉菌104~106个/mL和灰色链霉菌104~106个/mL。本发明能有效降低恶臭气体的释放量,为畜禽养殖场恶臭的有效处理和环境保护提供技术支持。

    山羊传染性胸膜肺炎病原检测双重PCR诊断试剂盒及制备、使用方法

    公开(公告)号:CN102634601A

    公开(公告)日:2012-08-15

    申请号:CN201210142444.X

    申请日:2012-05-10

    Applicant: 贵州大学

    Abstract: 本发明公开了一种山羊传染性胸膜肺炎病原检测双重PCR诊断试剂盒的原料配方及制备、使用方法。原料配方为:1000~2000μLPCR反应液,100~200μLTaqDNA聚合酶,50~100μL阳性对照、50~100μL阴性对照、1mL-2mL超纯水。PCR反应液包括引物1混合液、引物2混合液、PCR反应缓冲液和dNTP,四种液体于PCR反应液中体积比为2:2:5:1。制备方法包括:最佳反应退火温度的确定;特异性检测;敏感性检测;临床应用性检测和试剂盒包装。本发明对山羊养殖场疑似山羊传染性胸膜肺炎病羊病原、疑似病例的快速、确定性诊断提供了有效方法,为山羊传染性胸膜肺炎防控提供技术支持。

    山羊痘正向间接血凝诊断试剂的制备方法及检测方法

    公开(公告)号:CN102253198A

    公开(公告)日:2011-11-23

    申请号:CN201110188925.X

    申请日:2011-07-07

    Applicant: 贵州大学

    Abstract: 本发明公开了一种能够检测山羊痘抗体的山羊痘正向间接血凝诊断试剂及其制备方法、检测方法。制备方法为:以戊二醛和绵羊红细胞混合制备红细胞悬液,与等量的纯化山羊痘病毒混合,经搅拌、离心、洗涤,用含1%新生犊牛血清的PBS配成1%致敏红细胞,即制成为山羊痘正向间接血凝诊断试剂。经优化的制备条件是:采用戊二醛单醛化法固定红细胞,致敏红细胞浓度0.8%~1.0%,抗原含量控制在20μg.mL-1~200μg.mL-1之间,可以达到较好的致敏效果;检测方法按常规正向间接血凝试验方法进行,反应温度20~25℃,反应时间50min。该方法具有较好的特异性、敏感性和可重复性,可用于兽医临床上山羊痘抗体快速检测。

    一种促进冷水鱼免疫功能的饲料的制备及使用方法

    公开(公告)号:CN111869799A

    公开(公告)日:2020-11-03

    申请号:CN202010655525.4

    申请日:2020-07-09

    Applicant: 贵州大学

    Abstract: 本发明公开了一种促进冷水鱼免疫功能的饲料的制备方法,在基础饲料的制备过程中,按照每千克基础饲料添加180mg~220mg微生物源免疫增强剂,将微生物源免疫增强剂与基础饲料各原料进行混合形成混合料,将混合料按照常规方法制备即得所需饲料;所述微生物源免疫增强剂为纯度>90%的壳寡糖。该饲料在满足鲟鱼生长所需营养需求的基础上,还能有效发挥免疫增强剂的促免疫作用,提高鲟鱼生长率及免疫力,有效降低药物的使用量及损耗,进一步提高其应用价值和意义。

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