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公开(公告)号：CN117959420A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410141901.6
申请日：2024-02-01
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: A61K39/215 , A61K39/39 , A61P31/14 , C07K14/165 , C12N15/85 , C12N15/50
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒二价亚单位疫苗及制备方法，属于兽用生物制品领域。本发明构建了含S基因的重组真核质粒pPEDV‑2b‑S和pPEDV‑2a‑S，经纯化得到较纯的重组蛋白PEDV‑2a‑S和pPEDV‑2b‑S，将两者混合后与佐剂共同构建猪流行性腹泻病毒二价亚单位疫苗，利用该疫苗免疫猪后，重组蛋白能有效刺激仔猪和母猪产生特异性抗体，且在血清和乳汁中诱导较高的中和抗体水平，免疫的仔猪/乳猪的粪便中病毒载量较低，说明本发明制备的猪流行性腹泻病毒二价亚单位疫苗对猪具有良好的免疫原性，为猪流行性腹泻病毒亚单位疫苗的研发提供了基础。
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公开(公告)号：CN117683726A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311777549.7
申请日：2023-12-22
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N5/10 , C12N15/50 , C12N15/85 , C07K14/165 , C07K1/22 , A61K39/215 , A61P31/14 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种稳定外分泌表达猪流行性腹泻病毒S蛋白的CHO细胞系的构建方法，属于基因工程技术领域。本发明通过设计合成9个信号肽引物，以同源重组的方式得到表达猪流行性腹泻病毒变异株AH2012/12株S全长蛋白的9个重组表达质粒，瞬时转染HEK 293T细胞后，通过Western‑blot验证蛋白外分泌表达水平，筛选出含跨膜蛋白酶丝氨酸9信号肽S蛋白具有较好的外分泌表达特性；随后利用G418筛选获得稳定表达猪流行性腹泻病毒S蛋白的单克隆细胞，通过传代验证不同代次的蛋白表达水平，成功构建了可稳定外分泌表达猪流行性腹泻病毒S蛋白的CHO细胞系，为进一步研制猪流行性腹泻病毒亚单位疫苗奠定了基础。
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公开(公告)号：CN113736799B
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202111092942.3
申请日：2021-09-17
Abstract: 本发明提供山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆构建方法及其应用，属于生物技术领域。该构建方法包括：以山羊副流感病毒3型的总RNA反转录产物为模板，扩增A、B、C和D片段；将片段A和B、片段C和D分别插入pCI‑neo‑1载体中，得到重组载体pCI‑A‑B、pCI‑C‑D；以pCI‑A‑B为模板，扩增片段A‑B；以pCI‑C‑D为模板，扩增C‑D片段；将线性化pYES1L载体、A‑B和C‑D片段混和，导入酵母内进行同源重组，得到山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆质粒。本发明构建方法效率高，得到的感染性cDNA克隆拯救的病毒感染细胞后能够快速产生细胞病变，病毒滴度高，且保持稳定。
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公开(公告)号：CN113025531A
公开(公告)日：2021-06-25
申请号：CN202110341915.9
申请日：2021-03-30
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明公开了一株绵羊肺炎支原体及其在抗绵羊肺炎支原体制剂筛选中的应用，所述绵羊肺炎支原体的分类命名为绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)NJ01株，已保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2020907，保藏日期为2020年12月14日。本发明所提供的菌株NJ01培养生长速度快、滴度高，可达1010CCU/mL，在特定培养基中经复苏传代培养后，只需要10‑72h即可变色，这为抗绵羊肺炎支原体制剂的测定节约了时间，提高了效率，可用于抗支原体制剂的快速筛选等。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108913665B
公开(公告)日：2021-06-22
申请号：CN201810831978.0
申请日：2018-07-26
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及一种分泌抗CpHV‑1单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，属于免疫技术领域。本发明从建立的分泌抗CpHV‑1单克隆抗体的杂交瘤细胞库中筛选出一株杂交瘤细胞4A4株。用其制备的小鼠腹水单克隆抗体对CpHV‑1的中和效价达28。本发明的杂交瘤细胞4A4株分泌的单克隆抗体可用于CpHV‑1发病羊的临床治疗，疗效显著，安全无不良副反应。本发明的杂交瘤细胞4A4株制备的单克隆抗体治疗剂，保存两年后中和效价不降低，稳定性好。此外，利用本发明的杂交瘤细胞4A4株分泌的单克隆抗体作为检测抗体建立的间接免疫荧光（IFA）检测方法，具有较好的灵敏性和特异性，可以用于CpHV‑1感染的鉴别诊断。
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公开(公告)号：CN111693705A
公开(公告)日：2020-09-22
申请号：CN202010674384.0
申请日：2020-07-14
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了抗CPIV3单克隆抗体在制备用于检测牛副流感病毒3型抗体的试剂上的应用，特别地，利用抗CPIV3单克隆抗体构建了用于检测牛副流感病毒3型抗体的阻断ELISA试剂盒和竞争ELISA试剂盒，具有异性好、灵敏度高、稳定性好，可快速、简便、高效的检测牛副流感病毒3型抗体，且成本低，适合样品的高通量检测。
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公开(公告)号：CN112522210B
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202011516349.2
申请日：2020-12-21
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种分泌抗小反刍兽疫病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗与应用，所述的杂交瘤细胞株为4B2，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2020266。本发明所提供的单克隆抗体可用于检测PPRV，特异性强，不与羊疱疹病毒1型、山羊副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒1型、牛病毒性腹泻病毒2型等常见羊病毒发生反应。且本发明的提出为建立一种快速、简易、准确的检测方法，以及在免疫机制研究、免疫功能研究、检测方法建立等方面提供技术手段，对PPRV的防控及实验室研究都具有重要意义。
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公开(公告)号：CN111041000B
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN201911407906.4
申请日：2019-12-31
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供一株分泌抗裂谷热病毒NSs蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，属于生物技术领域。分泌抗裂谷热病毒NSs蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株2D6D10，其保藏编号为CCTCC NO：C2019269。本发明还提供所述杂交瘤细胞株分泌的抗裂谷热病毒NSs蛋白单克隆抗体及其在制备裂谷热病毒NSs蛋白抗体检测试剂盒方面的应用。本发明杂交瘤细胞2D6D10能够产生针对RVFV非结构蛋白NSs蛋白的单克隆抗体，该单克隆抗体具有阻断作用，因此本发明的阻断ELISA试剂盒可用于病毒感染与灭活疫苗或缺失疫苗免疫抗体的鉴别诊断。
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公开(公告)号：CN108913665A
公开(公告)日：2018-11-30
申请号：CN201810831978.0
申请日：2018-07-26
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及一种分泌抗CpHV-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，属于免疫技术领域。本发明从建立的分泌抗CpHV-1单克隆抗体的杂交瘤细胞库中筛选出一株杂交瘤细胞4A4株。用其制备的小鼠腹水单克隆抗体对CpHV-1的中和效价达28。本发明的杂交瘤细胞4A4株分泌的单克隆抗体可用于CpHV-1发病羊的临床治疗，疗效显著，安全无不良副反应。本发明的杂交瘤细胞4A4株制备的单克隆抗体治疗剂，保存两年后中和效价不降低，稳定性好。此外，利用本发明的杂交瘤细胞4A4株分泌的单克隆抗体作为检测抗体建立的间接免疫荧光（IFA）检测方法，具有较好的灵敏性和特异性，可以用于CpHV-1感染的鉴别诊断。
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