公开(公告)号：CN102925473B

公开(公告)日：2014-11-12

申请号：CN201210467416.5

申请日：2012-11-19

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 吴宗福 ,  邵靓 ,  琚存祥 ,  王卫雪 ,  唐敏 ,  陆承平

IPC: C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12R1/46

Abstract: 本发明提供制备猪链球菌GZ0565株无痕缺失突变株的方法，涉及基因工程领域。该方法包括如下步骤：采用融合PCR方法，得到由待敲除靶基因上下游片段组成的同源重组片段；将同源重组片段插入pSET4S质粒，然后电转化至猪链球菌GZ0565株的感受态细胞进行同源重组，筛选猪链球菌GZ0565株无痕缺失突变株。本发明提供的制备猪链球菌GZ0565株无痕缺失突变株的方法，筛选效率高，得到的猪链球菌GZ0565株无痕缺失突变株，敲除了靶基因，但是不含有抗性基因，因此具有成为疫苗株的潜能。

公开(公告)号：CN103146666A

公开(公告)日：2013-06-12

申请号：CN201310089171.1

申请日：2013-03-20

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 陆承平 ,  张炜 ,  琚存祥

IPC: C12N9/36 ,  C12N15/56 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  A61K38/47 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供猪链球菌胞壁水解酶、其编码基因及应用，涉及生物技术领域。猪链球菌胞壁水解酶，其氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。本发明还公开了猪链球菌胞壁水解酶的编码基因及含有猪链球菌胞壁水解酶的基因的重组表达载体和重组菌。提供了制备猪链球菌胞壁水解酶的方法，通过培养所述重组菌并进行纯化后得到所述猪链球菌胞壁水解酶。本发明猪链球菌胞壁水解酶，能够有效杀灭猪链球菌，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及嗜水气单胞杆菌。猪链球菌胞壁水解酶的基因可以在重组大肠杆菌中高效表达，所得猪链球菌胞壁水解酶活性和稳定性高，能够有效杀灭猪链球菌，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及嗜水气单胞杆菌。

公开(公告)号：CN102925473A

公开(公告)日：2013-02-13

申请号：CN201210467416.5

申请日：2012-11-19

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 吴宗福 ,  邵靓 ,  琚存祥 ,  王卫雪 ,  唐敏 ,  陆承平

IPC: C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12R1/46

Abstract: 本发明提供制备猪链球菌GZ0565株无痕缺失突变株的方法，涉及基因工程领域。该方法包括如下步骤：采用融合PCR方法，得到由待敲除靶基因上下游片段组成的同源重组片段；将同源重组片段插入pSET4S质粒，然后电转化至猪链球菌GZ0565株的感受态细胞进行同源重组，筛选猪链球菌GZ0565株无痕缺失突变株。本发明提供的制备猪链球菌GZ0565株无痕缺失突变株的方法，筛选效率高，得到的猪链球菌GZ0565株无痕缺失突变株，敲除了靶基因，但是不含有抗性基因，因此具有成为疫苗株的潜能。

公开(公告)号：CN102154365A

公开(公告)日：2011-08-17

申请号：CN201110026879.3

申请日：2011-01-25

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 许家荣 ,  陆承平 ,  黄冬艳

IPC: C12N15/863 ,  C12N15/44 ,  C12N7/01 ,  C12N7/02 ,  G01N33/569 ,  A61K39/145 ,  A61P31/16 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了猪流感病毒H1N1亚型HA1蛋白重组猪痘病毒及其制备方法。根据猪流感病毒A/swine/Shanghai/1/2005(H1N1)毒株HA1的基因序列设计、合成HA1基因，并把该基因克隆入猪痘病毒载体pUSZ11中，得到转移载体pUSZ11/H1。所述的重组病毒是将猪痘病毒和转移载体pUSZ11/H1感染、转染PK15细胞，进行同源重组获得的阳性克隆。该重组猪痘病毒能稳定表达HA1蛋白，接毒后细胞病变出现规律，种毒的毒价稳定在107TCID50/mL，并能有效地刺激机体的免疫保护反应，能够在制备预防和/或治疗猪流感病毒H1N1亚型感染的药物中应用。

公开(公告)号：CN101955530A

公开(公告)日：2011-01-26

申请号：CN201010529394.1

申请日：2010-11-02

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘永杰 ,  陆承平 ,  焦大为

IPC: C07K16/06 ,  C07K1/36 ,  C07K1/30 ,  C07K1/18 ,  C07K1/16

Abstract: 本发明涉及鲫鱼IgM提取纯化工艺，一种将鲫鱼IgM从鲫鱼血清中与其它化合物相分离，从而获得高纯度鲫鱼IgM的方法。包括制备鲫鱼血清；通过33%到50%饱和硫酸铵分级沉淀法对鲫鱼血清进行粗提；通过Macro-prephighQ强阴离子交换柱从鲫鱼血清饱和硫酸铵分离沉淀提取物中进一步提取鲫鱼IgM；经离子交换层析获得的样品进一步通过SephacrylTMS-300葡聚糖凝胶层析柱进行精细分离纯化。从5mL鲫鱼血清（蛋白浓度60mg/mL)中纯化得到4.4mgIgM，得率为1.4%，经SDS-PAGE检测、蛋白扫描仪分析，纯度达96%以上。

公开(公告)号：CN101942505A

公开(公告)日：2011-01-12

申请号：CN201010158115.5

申请日：2010-04-28

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 姚火春 ,  陆承平 ,  潘子豪

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 本发明涉及一种致病性嗜水气单胞菌检测试剂盒，属于病原微生物检测领域。基于致病性嗜水气单胞菌标准株J-1株16S rDNA基因组的高度保守区间所设计的引物用于致病性嗜水气单胞菌种属特性的区别鉴定，扩增片段685bp；以该菌所分泌的特异性蛋白酶气溶素所设计的第二对引物用于气单胞菌的致病性的判定，片段大小为301bp。本发明能够快速、准确的判定待检菌株的种属特性和致病性，通过对实验菌株和临床分离株的常规生化鉴定方法和致病性鉴定方法的比较试验得知，该试剂盒的符合率为100％。在对本试剂盒的特异性、重复性、敏感性和保存期的评价试验中，均得到了理想的结果。