基于数字LAMP技术检测猪圆环病毒3型的引物及其试剂盒与方法

    公开(公告)号:CN109182468A

    公开(公告)日:2019-01-11

    申请号:CN201810979698.4

    申请日:2018-08-24

    Abstract: 本发明公开了一种基于数字LAMP技术检测猪圆环病毒3型的引物和试剂盒及方法。试剂盒包括:2×ddLAMP Supermix、引物组合、无RNA酶的超纯水、细菌总DNA提取试剂、阴性对照和阳性对照。其检测方法是通过提取待检样品DNA,配置LAMP反应体系,进行微滴化和LAMP反应后,通过检测荧光信号,判断待检样品是否含有猪圆环病毒3型,并测定其含量。本发明具有快速、精准、灵敏、适用性广,无需依赖变温扩增设备,可实现绝对定量等优点,可实现猪圆环病毒3型病诊断的早发现、早治疗和早预防,能有效控制疫情爆发。

    原位荧光环介导恒温核酸扩增技术检测结核分枝杆菌的方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN101942511B

    公开(公告)日:2013-04-10

    申请号:CN201010259678.3

    申请日:2010-08-20

    Inventor: 叶宇鑫 石磊

    Abstract: 本发明公开了一种原位荧光环介导恒温核酸扩增技术检测结核分枝杆菌的方法及试剂盒。本发明根据结核分枝杆菌gyrB基因保守区设计了四条特异性引物,应用这四条引物,同时结合原位荧光环介导恒温核酸扩增技术,能特异性地检测出结核分枝杆菌。本发明实现样品原位检测、无需增菌、特异性高,能在不到2小时完成扩增,最低检测极限达到10CFU/ml,标本的检出率达到99%。使用本发明所述的方法和试剂盒鉴定结核分支杆菌简便。

    大肠杆菌O157恒温核酸扩增快速检测试剂盒及其用法

    公开(公告)号:CN101343661A

    公开(公告)日:2009-01-14

    申请号:CN200810030333.3

    申请日:2008-08-22

    Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌O157恒温核酸扩增快速检测试剂盒及其用法,试剂盒包括引物混合液,其序列为外引物1:GCTATACCACGTTACAGCGTG;外引物2:ACTACTCAACCTTCCCCAGTTC;内引物1:GCTCTTGCCACAGACTGCACATTCGTTGACTACTTCTTATCTGG;内引物2:CTGTGACAGCTGAAGCTTTACGCGAAATCCCCTCTGAATTTGCC;磷酸缓冲液PBS、多聚甲醛、多聚赖氨酸、溶菌酶、蛋白酶K、RNA酶、BstDNA聚合酶、反应液、样品预处理液、显色剂、阳性对照及阴性对照。利用该试剂盒通过大肠杆菌O157菌体固定处理、细胞通透性处理、恒温基因扩增反应、判断反应产物结果实现对大肠杆菌O157高特异性、快速、高效、高灵敏度、简便的原位检测。

    基于数字PCR技术检测猪圆环病毒3型菌的引物和探针及其试剂盒与方法

    公开(公告)号:CN109251967A

    公开(公告)日:2019-01-22

    申请号:CN201810882636.1

    申请日:2018-08-03

    Abstract: 本发明公开了一种基于数字PCR技术检测猪圆环病毒3型的引物和探针及其试剂盒与方法。引物和探针,包括上游引物FP、下游引物BP、探针Probe;检测试剂盒包括2×ddPCR Supermix、无RNA酶的超纯水、病毒总DNA提取试剂、阴性对照和阳性对照。其检测方法是通过提取待检样品DNA,利用微滴数字PCR技术对待检样品DNA进行定量检测,通过扩增分析得到的拷贝数判断待检样品是否含有猪圆环病毒3型,并测定其含量。本发明具有精准、灵敏、适用性广,无需依赖标准曲线,可实现绝对定量等优点,可实现猪圆环3型病毒病诊断的早发现、早治疗和早预防,能有效控制疫情爆发。

    基于数字PCR技术检测副猪嗜血杆菌的引物和探针及其试剂盒与方法

    公开(公告)号:CN108977512A

    公开(公告)日:2018-12-11

    申请号:CN201810882637.6

    申请日:2018-08-03

    Abstract: 本发明公开了一种基于数字PCR技术检测副猪嗜血杆菌的引物和探针及其试剂盒与方法。引物和探针,包括上游引物FP、下游引物BP、探针Probe;检测试剂盒包括2×ddPCR Supermix、无RNA酶的超纯水、细菌总DNA提取试剂、阴性对照和阳性对照。其检测方法是通过提取待检样品DNA,利用微滴数字PCR技术对待检样品DNA进行定量检测,通过扩增分析得到的拷贝数判断待检样品是否含有副猪嗜血杆菌,并测定其含量。本发明具有精准、灵敏、适用性广,无需依赖标准曲线,可实现绝对定量等优点,可实现副猪嗜血杆菌病诊断的早发现、早治疗和早预防,能有效控制疫情爆发。

    含内标的单核细胞增生李斯特氏菌LAMP检测试剂盒

    公开(公告)号:CN103320435A

    公开(公告)日:2013-09-25

    申请号:CN201310268744.7

    申请日:2013-06-28

    Abstract: 本发明公开了一种单核细胞增生李斯特氏菌LAMP检测试剂盒及检测方法,属于食品安全的分子生物学检测方法领域。本发明的LAMP检测试剂盒中检测引物组包括检测引物组及内标引物组;检测试剂盒包括引物组、反应液、DNA聚合酶、核酸荧光染料、阳性对照和内标。其检测方法是通过提取待检样品,在63~65℃对样品模板进行30-45分钟的扩增,不仅可检测待检样品是否含有单核细胞增生李斯特氏菌,同时可根据检测内标引物组是否有扩增来判断是否有假阴性检测结果。本发明具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、适合现场检测等优点,并且可有效防止假阴性的发生,适于推广应用。

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