公开(公告)号：CN117165704A

公开(公告)日：2023-12-05

申请号：CN202310926541.6

申请日：2023-07-26

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 张铭芳 ,  金鸽 ,  张秀海 ,  杜运鹏 ,  薛静 ,  杨凤萍 ,  陈绪清 ,  赵春莉

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明公开了湖北百合microRNA荧光定量内参基因的筛选方法和应用，包括osa‑miR166m、osa‑miR166g‑3p和osa‑miR166a‑3p基因作为内参基因在湖北百合microRNA荧光定量PCR分析中的应用；其中，在不同发育时期的花瓣间分析时，采用osa‑miR166m和osa‑miR166a‑3p基因作为内参基因；在不同组织间分析时，采用osa‑miR166g‑3p和osa‑miR166a‑3p基因作为内参基因。本发明为进一步准确定量百合生长发育中的miRNA基因表达水平提供合适的内参选择。

公开(公告)号：CN115500263B

公开(公告)日：2023-05-02

申请号：CN202211243994.0

申请日：2022-10-11

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 杜运鹏 ,  张秀海 ,  张铭芳 ,  吴健 ,  刘丹丹 ,  陈绪清 ,  杨凤萍 ,  薛静

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种垂花百合鳞片快速诱导以及试管小鳞茎膨大的方法，采用两步法进行，具体包括如下步骤：(1)取垂花百合的鳞片作为外植体，消毒灭菌后接种到不定芽诱导培养基上培养，诱导获得小鳞茎；(2)将所述小鳞茎接种到鳞茎膨大培养基中培养，获得膨大鳞茎组培苗。所述不定芽诱导培养基为MS基本培养基+NAA 0.2mg/L+TDZ 0.5mg/L+BR 0.05mg/L+结冷胶4g/L+蔗糖30g/L。所述鳞茎膨大培养基为：MS基本培养基+结冷胶4g/L+蔗糖30g/L。本发明方法能够有效提高垂花百合试管苗增大倍数、为垂花百合资源保护、快速繁殖及利用奠定基础。

公开(公告)号：CN114908112A

公开(公告)日：2022-08-16

申请号：CN202111226586.X

申请日：2021-10-21

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 张秀海 ,  薛静 ,  杨凤萍 ,  张铭芳 ,  陈绪清 ,  杜运鹏 ,  高俊莲

IPC: C12N15/70

Abstract: 本发明公开了一种细菌转化方法，将聚乙烯亚胺修饰的碳量子点与质粒和细菌细胞混合进行转化。本发明的细菌转化方法开发了一种高效、低毒性的载体，包裹DNA，同时，建立开发了一种不需要制备感受态细胞、不依赖特殊仪器的转化方法，不仅可以将DNA导入靶细胞中，还可以保护外源DNA不被细胞内的核酸酶降解，对于分子生物学的发展将具有重要意义。

公开(公告)号：CN102337292B

公开(公告)日：2013-04-10

申请号：CN201110295586.5

申请日：2011-09-27

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 薛静 ,  张晓东 ,  杨凤萍 ,  陈绪清 ,  张立全 ,  李向龙

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/66 ,  A01H1/02 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明公开了删除转基因植物中抗生素标记基因的系统及其应用。本发明所提供的删除系统由分别含有抗生素标记基因和含Cre酶基因的两个植物表达载体各自单独包装组成。所述含有抗生素标记基因的植物表达载体含有两个同向的loxP位点，且两loxP位点之间含有抗生素标记基因及可视化标记基因表达盒。将所述两载体的转基因植株后代杂交，便可从杂交后代中删除抗生素标记基因，这为食品安全提供了保证，在转基因研究中具有重要的意义。另外，可视化标记基因使得仅仅从转基因植株及种皮果皮的颜色上就可以判断出转基因的效果与删除效果，因此该删除体系在转基因研究领域是一个突破，大大节省了分子检测的成本，对于后续的育种也有着重要的意义。

公开(公告)号：CN101173277B

公开(公告)日：2010-12-08

申请号：CN200710176258.7

申请日：2007-10-23

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 张晓东 ,  杨凤萍 ,  张立全 ,  陈绪清 ,  梁荣奇 ,  郭新梅

IPC: C12N15/11 ,  C12N15/61 ,  C12N15/79 ,  A01H1/00

Abstract: 本发明公开了一种获得转基因玉米的方法。该获得转基因玉米的方法，是将含有外源目的DNA、并以木糖异构酶基因为筛选标记的重组真核细胞表达载体导入玉米中，在含有D-木糖的愈伤组织诱导培养基中筛选愈伤组织，得到转基因玉米。本发明获得转基因玉米的方法中的筛选体系摒弃了存在潜在安全隐患争议的抗生素和除草剂，利用植物自身代谢产物--木糖为选择剂，是一种较为安全的新型筛选体系，可以提高玉米遗传转化自交系改良的成功率，并降低潜在生物安全隐患。

公开(公告)号：CN100448995C

公开(公告)日：2009-01-07

申请号：CN200510130065.9

申请日：2005-12-08

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 张晓东 ,  陈绪清 ,  梁荣奇 ,  杨凤萍 ,  张立全 ,  高泽发

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明公开了一种培育抗虫小麦的方法及其专用基因。本发明用于培育抗虫小麦的基因，其碱基序列如SEQ ID NO：1所示。将该基因导入小麦中，能显著提高小麦的抗虫性。

公开(公告)号：CN1800396A

公开(公告)日：2006-07-12

申请号：CN200510130065.9

申请日：2005-12-08

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 张晓东 ,  陈绪清 ,  梁荣奇 ,  杨凤萍 ,  张立全 ,  高泽发

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明公开了一种培育抗虫小麦的方法及其专用基因。本发明用于培育抗虫小麦的基因，具有下述核苷酸序列之一：(1)序列表中序列1的核苷酸序列；(2)在高严谨条件下可以与序列表中序列1的核苷酸序列杂交的核苷酸序列。该基因导入小麦中显著提高了小麦的抗虫性。

公开(公告)号：CN1762200A

公开(公告)日：2006-04-26

申请号：CN200510104869.1

申请日：2005-09-23

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 张晓东 ,  杨凤萍 ,  梁荣奇 ,  张立全 ,  陈绪清 ,  孙振元

IPC: A01H1/00 ,  C12N15/63

Abstract: 本发明公开了一种培育抗旱性增强的黑麦草的方法。本发明所提供的培育抗旱性增强的黑麦草的方法，是将DREB转录因子的编码基因插入植物表达载体，得到含有DREB转录因子的编码基因的重组表达载体，将该重组表达载体导入黑麦草中，得到抗旱性增强的黑麦草。本发明利用逆境诱导型启动子(RD29B)来增强外源DREB1B、CBF1基因的表达，能显著改良黑麦草的抗旱能力。