公开(公告)号：CN110423271A

公开(公告)日：2019-11-08

申请号：CN201910723900.1

申请日：2019-08-07

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 李永清 ,  靳换 ,  孔子萌 ,  江波 ,  许健 ,  刘文晓

IPC: C07K14/705 ,  C07K16/28 ,  C07K16/06 ,  C07K1/16 ,  C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明提供了鸡CR2基因的克隆、蛋白的表达和纯化及其多克隆抗体的制备。提供了ChCR2蛋白的氨基酸序列和基因序列，构建了含有不同标签的ChCR2原核表达载体，利用大肠杆菌原核表达系统表达ChCR2蛋白，并对蛋白进行纯化。纯化后的蛋白能够制备效价较高的多克隆抗体。ChCR2基因，在鸡免疫系统中的作用十分重大。CR2能将先天性补体介导的免疫应答与病原体和外来抗原联系起来，通过与共价附着于靶标的C3d结合而产生的适应性免疫应答，其导致的细胞信号传导现象，能极大程度降低B细胞活化的阈值。B细胞在免疫系统中的位置举足轻重，所以本发明发现的ChCR2无论是从基础研究还是临床运用上的意义都是十分重大的。

公开(公告)号：CN109402274A

公开(公告)日：2019-03-01

申请号：CN201811332791.2

申请日：2018-11-09

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 李永清 ,  李霄阳 ,  许健 ,  江波 ,  刘文晓

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/6809 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明通过RNA-seq技术获得A型和B型牛源多杀性巴氏杆菌菌株的差异表达基因的方法，以及通过多杀性巴氏杆菌的差异表达基因或其产物检测A型多杀性巴氏杆菌或者鉴别A型和B型牛源多杀性巴氏杆菌的应用。本发明还建立了基于差异表达基因鉴别A型和B型多杀性巴氏杆菌的荧光定量RT-PCR方法。所述RT-PCR方法包括对多杀性巴氏杆菌TadD基因进行扩增的步骤。本发明的方法可以高灵敏度、高特异性地检测A型菌株，灵敏度为10fg cDNA/μL，是常规PCR的1000倍，且不与其他种属的细菌反应，具有良好的特异性。本发明的方法通过特异性检测A型牛源多杀性巴氏杆菌和鉴别A型与B型多杀性巴氏杆菌，不仅可以对相关疫病进行鉴别诊断，也可为今后A型疫苗的免疫效力提供有效监测，具有重大的实用价值和应用前景。