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公开(公告)号：CN118176948A
公开(公告)日：2024-06-14
申请号：CN202410446272.8
申请日：2024-04-15
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明涉及一种结合生长节律截干复幼促进水曲柳扦插生根的方法，属于林业生物技术领域。针对扦插繁殖中年龄效应瓶颈的难题，依据水曲柳进入封顶期会停止高生长，加速木质化这一生长节律特性，于生长期和封顶期的临界窗口处截干，平衡萌枝生长量的同时，缩短其高生长时间，提早进入封顶期，以实现萌枝既保持幼态又达到半木质化，形成适宜生根状态，提高扦插生根率。8年生水曲柳树液流动后8～9周截干，扦插生根率最高，可达85.6％，比其它时间点平均值高2.3倍，超出CK(0％)85.6％。该发明克服了年龄效应对扦插再生的影响，对扦插再生难树种具有极大的借鉴意义。
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公开(公告)号：CN116420620B
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202310426005.X
申请日：2023-04-20
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明公开了一种通过胚挽救获得水曲柳与白蜡种间杂交F1代的方法，选择赤峰地区的白蜡树作为父本，选择哈尔滨地区本土优良水曲柳作为母本，在5月初，对雌花进行套袋、人工授粉、摘袋，授粉后35d开始取样，果实表面消毒后扒掉果皮获得无菌胚珠，将胚珠接种在发育培养基中，置于25±2℃环境下，黑暗培养7‑8周，胚珠逐渐发育成熟，然后转移至弱光条件下培养，光照强度为10μmol·m‑2·s‑1，光周期12h/d，温度25±2℃，子叶长出并转绿，对没有萌发的胚转入胚的二次萌发培养基中，光照强度为80μmol·m‑2·s‑1，子叶长出并转绿，将长出子叶的胚转移至幼苗生长培养基中，光照培养20‑25d，获得幼苗，该方法可以解决水曲柳与白蜡种间杂交中胚的畸形、幼胚败育、未成熟胚无法获得杂种植株等问题，对林木新品种选育具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN116970586A
公开(公告)日：2023-10-31
申请号：CN202310488676.9
申请日：2023-05-04
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N9/10 , C12N15/54 , C12N15/113 , C12N15/87 , A01K67/033 , C12N15/70 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了柳蝙蛾几丁质合成酶1(PeCHS1)基因、其dsRNA及其合成方法和抗虫性应用，通过转录组分析，设计并合成PeCHS1基因开放阅读框的特异性引物对，经过基因克隆获得PeCHS1基因序列，核苷酸序列为SEQ ID NO：1，氨基酸序列为SEQ ID NO:2，然后选择序列为SEQ ID NO：3的基因片段为RNAi靶序列，设计并合成带有酶切位点的引物对SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7，PCR扩增，构建原核表达载体并诱导dsRNA表达。对柳蝙蛾幼虫进行dsRNA的饲喂，干扰PeCHS1基因的表达，5d后处理组取食相较对照组逐渐减少，活动缓慢，在死亡幼虫中发现蜕皮异常及体表发育异常的表型，8d后幼虫死亡率为50％，此时GFP对照组为30％，效果显著。本发明在林业柳蝙蛾害虫的防治中具有高效性、特异性和安全性的广泛应用前景。
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公开(公告)号：CN116732219A
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202310437465.2
申请日：2023-04-23
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种水曲柳与白蜡种间杂交F1代品种鉴定的方法，该方法利用SSR分子标记技术筛选出2对可以鉴定父本、母本和杂交F1子代的引物，PCR扩增后用12％非变性聚丙烯酰胺电泳进行检测，在凝胶成像仪中观察显色的凝胶，并拍照，统计父本、母本和F1子代之间的差异条带，即父母本的差异条带在F1子代中都存在，说明F1子代为杂交品种。目前对水曲柳与白蜡杂交子代的鉴定多采用田间生长、生理及抗逆特征等指标进行鉴定，不易判别是否为真杂种，本发明能够准确和易于鉴定水曲柳和白蜡杂交种质成分，确定杂交种纯度，为培育新品种并推广具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN114703189B
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202210336615.6
申请日：2022-03-31
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/70 , C12N15/84 , C12Q1/6897 , A01H5/00 , A01H6/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种水曲柳U6基因启动子proFmU6.3及其克隆与应用。本发明首次成功克隆了水曲柳RNA聚合酶Ⅲ型启动子——水曲柳内源U6基因启动子proFmU6.3，并成功构建了水曲柳U6基因启动子活性检测载体，通过瞬时转化水曲柳幼苗、GUS染色验证，证明该启动子具有高效转录活性，为水曲柳及近缘植物的转化研究提供了高效的启动子序列。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114703187A
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202210336608.6
申请日：2022-03-31
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N15/10 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明涉及一种水曲柳U6基因启动子proFmU6.7及其克隆与应用。本发明首次成功克隆了水曲柳RNA聚合酶Ⅲ型启动子——水曲柳内源U6基因启动子proFmU6.7，并成功构建了水曲柳U6基因启动子活性检测载体，通过瞬时转化水曲柳幼苗、GUS染色验证，证明该启动子具有高效转录活性。实验证明一种水曲柳U6基因截短启动子proFmU6.7.4具有启动活性，并成功在CRISPR/Cas9系统中应用。水曲柳U6基因启动子proFmU6.7克隆及启动子活性的表达分析，为研究与水曲柳及近缘植物的转化研究提供了高效的启动子序列，也可以实现对水曲柳高效精准的种质创新与品种遗传改良。
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公开(公告)号：CN110946073A
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201811130201.8
申请日：2018-09-27
Applicant: 东北林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种快速繁殖水曲柳胚性细胞的方法，选取水曲柳愈伤组织，该愈伤组织来源可以是根、茎、叶、种子、胚等多种外植体，将愈伤组织接种在F4固体培养基中，培养1-2个继代，可得水曲柳胚性愈伤组织；将松散的胚性愈伤组织接种到F4液体培养基中培养2-3个继代，可以得到水曲柳单细胞和小细胞团。本发明的优点在于选择了F4培养基，该培养基除了常规的WPM基本培养基之外，选择30g/L的蔗糖和BA、NAA、IBA、TDZ四种激素组合，该培养基上的细胞涨势旺盛，只要在生长周期内继代就不会出现褐化死亡的现象。该方法的建立为水曲柳细胞规模化生产及次生代谢产物研究奠定基础。
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公开(公告)号：CN104087644B
公开(公告)日：2018-04-27
申请号：CN201410270442.8
申请日：2014-06-18
IPC: C12P33/00
Abstract: 本发明属于生物工程领域，具体涉及一种利用氢气提高白桦细胞中总三萜和白桦脂醇含量的方法。以白桦悬浮细胞为材料，按50g/L接种量接种于100mL B5液体培养基中，附加0.1～0.3mg/L6‑BA和0.5～4.0mg/L TDZ，蔗糖20g/L，酸水解酪蛋白1g/L，pH5.5～6.0。在细胞悬浮培养第8天通入氢气使其终浓度为0.5‑1.5mmol/L，培养12h后收获，白桦脂醇含量最高为1.11mg/gDW，是对照组185.1％。培养24h后收获，细胞内总三萜含量达到24.37mg/gDW，为对照组的181.32％。氢气具有无毒无害的优势，方便代谢产物的分离和纯化。该发明为解决天然植物药物来源紧缺和工业化大规模生产白桦三萜和白桦脂醇药物提供了一种新途径。
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公开(公告)号：CN103952459B
公开(公告)日：2017-10-24
申请号：CN201410211396.4
申请日：2014-05-20
Abstract: 本发明提供了一种促进次生代谢产物积累的新方法和5‑氮杂胞苷的新用途，涉及生物工程技术领域。其特点在于利用添加一定浓度5‑氮杂胞苷诱导子，提高白桦次生代谢产物总三萜和齐墩果酸的积累。本方法的发明，为利用植物细胞离体培养技术进行工业化大规模生产三萜及齐墩果酸类药物提供了一种新方法。
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公开(公告)号：CN103430849B
公开(公告)日：2015-08-26
申请号：CN201310372994.5
申请日：2013-08-24
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明属于生物工程领域，具体涉及一种利用温度处理提高白桦丛生苗中总三萜、齐墩果酸和黄酮含量的方法。以白桦愈伤组织接种于NT+2mg/L 6-BA的固体培养基诱导白桦丛生苗，继代两次后转移至NT+0.5mg/L 6-BA固体培养基，筛选获得总三萜含量高的白桦丛生苗。将上述筛选丛生苗接种于NT+0.5mg/L 6-BA液体培养基中，接种量为5g/100ml，震荡培养第七天分别进行高温45℃和低温4℃胁迫处理，此后24h-48h收获，检测丛生苗中总三萜、总黄酮和齐墩果酸含量。两种温度胁迫处理总三萜含量比对照提高49.20％～5.03倍，最高含量达59.66mg/g；齐墩果酸含量比对照提高3.68倍～10.56倍，最高含量达2.33mg/g；总黄酮含量对照提高10％～38.37％，最高达4.0mg/g。该申请发明无污染、低成本、可操作性强，效率高，为解决天然植物药物来源紧缺和工业化大规模生产白桦总三萜和齐墩果酸药物提供了一种新技术。
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