一种去蛋白缓冲液、去除狂犬疫苗中宿主蛋白的方法

    公开(公告)号:CN118440163A

    公开(公告)日:2024-08-06

    申请号:CN202410498502.5

    申请日:2024-04-24

    Abstract: 本申请涉及疫苗制剂纯化的技术领域,具体公开了一种去蛋白缓冲液、去除狂犬疫苗中宿主蛋白的方法。本申请提供的去蛋白缓冲液包括月桂酰谷氨酸钠、甘草酸二钾、天门冬氨酸和磷酸缓冲液;进一步地,以去蛋白缓冲液的体积计,各组分的含量为:月桂酰谷氨酸钠2.82‑6.46g/L,甘草酸二钾0.72‑1.64g/L、天门冬氨酸1.06‑2.44g/L,余量为磷酸缓冲液;本申请还提供了一种利用上述去蛋白缓冲液去除狂犬疫苗中宿主蛋白的方法。本申请提供的去蛋白缓冲液能够改变宿主蛋白膜透性,有效去除狂犬疫苗澄清液中的宿主蛋白,并且不会对狂犬疫苗的抗原造成影响,保证疫苗的高抗原回收率。

    ORF3基因自然截短的猪流行性腹泻病毒弱毒株及其应用

    公开(公告)号:CN118360260A

    公开(公告)日:2024-07-19

    申请号:CN202410307090.2

    申请日:2024-03-18

    Applicant: 广西大学

    Abstract: 本发明公开了一株ORF3基因自然截短的猪流行性腹泻病毒弱毒株,其保藏编号为CCTCC NO:V202409。本发明弱毒株的ORF3基因由于核苷酸缺失,导致翻译提前终止,弱毒株保留了ORF3自然截短的基因特点。遗传进化分析表明,本发明的弱毒株归属于G2b型,截短的ORF3基因在体外培养中稳定遗传,且在体外高效复制,属细胞适应毒株。ORF3基因自然截短的弱毒株具有天然的遗传标记,接种细胞后能够产生典型的PEDV细胞病变,且在细胞上增殖稳定,毒价均达106.0PFU/mL以上,可作为预防PEDV的潜在候选疫苗。对母猪进行免疫,免疫母猪体临床表征正常,其所生产的仔猪体重增长稳定,对仔猪具有良好的保护效力,可以为研制猪流行性腹泻病毒疫苗以预防和控制PED的发生和流行提供技术基础和保障。

    基于盖塔病毒骨架的嵌合甲病毒制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118127077A

    公开(公告)日:2024-06-04

    申请号:CN202410557841.6

    申请日:2024-05-08

    Abstract: 本发明公开了一种基于盖塔病毒骨架的嵌合甲病毒制备方法和应用;本发明先公开一种质粒载体,所述质粒载体以含有盖塔病毒基因组的感染性cDNA克隆为骨架质粒,再通过如下(A1)或(A2)任一方式进行构建:(A1)将盖塔病毒的ORF2基因序列替换成其他甲病毒ORF2基因;(A2)保留盖塔病毒Cap基因前123位氨基酸序列,而其余盖塔病毒ORF2基因序列替换为去除Cap基因N端前102~123位氨基酸的其他甲病毒ORF2基因序列。本发明还公开了前述基础上的嵌合甲病毒的制备方法、所述制备方法获得的嵌合甲病毒减毒株。所述嵌合甲病毒对小鼠的毒力显著减弱,不引起死亡及严重的体重下降,但保持了良好的免疫原性。

    一种FPV重组杆状病毒、高效制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN117965460A

    公开(公告)日:2024-05-03

    申请号:CN202311744647.0

    申请日:2023-12-18

    Abstract: 本发明公开了一种FPV重组杆状病毒、高效制备方法及其应用。重组杆状病毒包含重组BS‑GP64‑FPV VP2基因,所述重组BS‑GP64‑FPV VP2基因包括启动子增强元件BS序列、Kozak‑GP64信号肽序列、优化的FPV VP2基因,所述重组杆状病毒用于高效制备猫泛白细胞减少症病毒样颗粒疫苗。采用BEVS的qBac系统以同源重组方式构建重组杆状病毒,只需要一次转染即可获得重组病毒,该方法较Bac‑to‑Bac系统简单快捷、可视,且表达量高,通过添加相关启动子增强元件和人工密码子优化,实现了FPV VP2蛋白的高水平、高纯度表达,重组杆状病毒用于高效制备猫泛白细胞减少症病毒样颗粒疫苗,使得病毒样颗粒疫苗具有较好的免疫原性,可用于预防猫细小病毒的感染。

    一种重组致弱的猫传染性腹膜炎病毒及其应用

    公开(公告)号:CN117417902B

    公开(公告)日:2024-05-03

    申请号:CN202311404545.4

    申请日:2023-10-27

    Abstract: 本发明公开了一种重组致弱的猫传染性腹膜炎病毒及其应用,属于生物技术领域。所述重组致弱的猫传染性腹膜炎病毒构建方法包括:利用反向遗传操作平台,将质粒pBAC‑FIPV‑79S的ORF7a区域替换成NanoLuc序列,之后病毒拯救出重组猫传染性腹膜炎病毒。本发明通过对该重组病毒的生长特性测定,证实了ORF7a的缺失不会对病毒生长特性产生显著影响;该重组病毒的致病性结果证实ORF7a缺失显著降低了毒株的致病性。本发明提供的猫传染性腹膜炎病毒对猫具有安全性,对猫传染性腹膜炎病毒强毒株具有保护效果,具有作为弱毒疫苗的潜力。

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