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公开(公告)号：CN113430224A
公开(公告)日：2021-09-24
申请号：CN202110679391.4
申请日：2021-06-18
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心 , 湖南农业大学
IPC: C12N15/84 , C12N15/65 , C12N15/55 , C12N15/56 , C12N15/29 , C12N15/10 , A01H5/02 , A01H5/10 , A01H6/46
Abstract: 本发明公开了一种可视化CRISPR/Cas9基因编辑系统，包括基因编辑元件、外源T‑DNA可视化追踪元件和转基因花粉失活元件，转基因花粉失活元件为玉米α‑淀粉酶基因ZMAA1的表达框；基因编辑元件为CRISPR/Cas9表达结构，CRISPR/Cas9表达结构包括Cas9基因表达框和gRNA表达框；外源T‑DNA可视化追踪元件为红色荧光蛋白基因DsRed的表达框。本发明利用胚乳荧光蛋白标记携带外源Cas9基因T‑DNA区的转基因种子，以筛选不含转基因的突变体种子。同时，利用花粉失活技术使携带Cas9基因的花粉失活，增加无转基因成分种子的比例，且避免因转基因花粉漂移带来的生物安全隐患。
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公开(公告)号：CN110331161B
公开(公告)日：2021-04-02
申请号：CN201910699895.5
申请日：2019-07-31
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心 , 湖南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用显性黑色颖壳性状提高水稻遗传工程核不育系种子色选精度的方法，具体为：培育黄颖双色选遗传工程核不育系；将显性黑色颖壳基因、育性恢复基因、花粉失活基因和荧光标记基因四个连锁表达的基因导入至黄颖双色选遗传工程核不育系基因组中培育黑颖双色选遗传工程繁殖系；黑颖双色选遗传工程繁殖系与黄颖双色选遗传工程核不育系混植，混收全部种子；根据颖壳颜色对混收的种子进行第一次筛选，分离黄颖不育系种子和黑颖种子；根据胚乳是否发荧光进行第二次筛选，提纯黄颖不育系种子。本发明利用水稻显性黑色颖壳作为新的色选标记提高遗传工程核不育系种子在分选过程中的纯度，实现遗传工程核不育系纯度达到生产应用标准的目标。
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公开(公告)号：CN112063742A
公开(公告)日：2020-12-11
申请号：CN202010967845.3
申请日：2020-09-15
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心 , 湖南农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于鉴定Cry1Ab基因的KASP标记引物及应用，由其组成的试剂盒及试剂盒的应用，KASP标记引物包括K2标记引物和K4标记引物；K2标记引物包括K2A‑F、K2A‑R、K2G‑F K2G‑R；K4标记引物包括K4C‑F、K4C‑R、K4G‑F、K4G‑R。试剂盒包括KASP标记引物和KASP反应混合液。本发明的KASP标记引物，能够快速精准高通量的完成回交转育后代的基因分型，并有效区分抗虫基因的杂合型，可应用于抗虫回交转育群体的基因型鉴定。
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公开(公告)号：CN110250000B
公开(公告)日：2020-04-07
申请号：CN201910699890.2
申请日：2019-07-31
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心 , 湖南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用隐性颖壳颜色性状提高水稻遗传工程核不育系种子色选精度的方法，将隐性异色颖壳可育水稻材料培育成双色选遗传工程核不育系；将包含黄颖基因、育性恢复基因、花粉失活基因和荧光标记基因的四元连锁载体导入至双色选遗传工程核不育系的基因组中培育双色选遗传工程繁殖系；将双色选遗传工程繁殖系和与双色选遗传工程核不育系混植，混收全部种子；第一次荧光筛选，分离无荧光的不育系种子和发荧光的繁殖系种子；第二次颖壳颜色筛选，提纯异色颖壳不育系种子。本发明利用水稻隐性异色颖壳作为新的色选标记提高遗传工程核不育系种子在分选过程中的纯度，实现遗传工程核不育系纯度达到生产应用标准的目标。
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公开(公告)号：CN110305895A
公开(公告)日：2019-10-08
申请号：CN201910700220.8
申请日：2019-07-31
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心 , 湖南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用水稻RAmy1A基因防止转基因花粉漂移的方法，包括以下步骤：将花粉特异性启动子和水稻RAmy1A基因连接至表达载体的目标T-DNA区得到重组载体；水稻RAmy1A基因如SEQ ID NO.1所示；花粉特异性启动子为PNOP启动子，PNOP启动子的DNA序列如SEQ ID NO.2所示；将所述重组载体导入水稻愈伤组织中获得花粉败育的水稻植株。本发明利用水稻内源α淀粉酶基因构建花粉失活技术来防止转基因花粉漂移，将RAmy1A基因和花粉特异性启动子导入到水稻愈伤组织中，通过在花粉发育过程中高水平表达α淀粉酶，使花粉成熟过程中形成的淀粉粒不断降解。达到构建水稻普通核不育系种子的目的。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105210858B
公开(公告)日：2017-07-25
申请号：CN201510759876.9
申请日：2015-11-09
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心
IPC: A01H1/02
Abstract: 本发明提供了一种杂交水稻的育种方法，该方法包括：(1)将第一水稻品系与第二水稻品系进行杂交，得到F1代水稻；(2)将所述F1代水稻进行自交得到F2代水稻；(3)选择上述F1自交后代中，带有目标性状的可育单株水稻进行自交系选；获得遗传稳定的带有目标性状的可育水稻品系；(4)使用基因定点突变技术，敲除上述遗传稳定的带有目标性状的可育水稻品系中的温敏核不育基因TMS5，获得带有目标性状但不含转基因成分的温敏核不育水稻品系S；(5)利用所述S通过杂交配组，选育杂交水稻组合。本发明的杂交水稻的育种方法优化了两系杂交水稻选育过程，大大提高了育种效果。
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公开(公告)号：CN106834524A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201710209471.7
申请日：2017-03-31
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心 , 湖南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种水稻穗长主效QTLPL6‑5的定位及与主效QTLPL6‑5连锁的分子标记。水稻穗长主效QTLPL6‑5位于水稻第6染色体长臂上，定位于分子标记RM20118与RM20210之间，且精细定位于RM20118与M6‑7之间。分子标记RM20118、M6‑7和RM20210均位于水稻第6染色体长臂上，RM20118与M6‑7相距1.3Mb，M6‑7与RM20210相距1.2Mb。本发明提供的主效QTLPL6‑5能够在不同环境及遗传背景中稳定检测，为水稻穗型改良育种提供了新的位点选择，分子标记为精细定位、克隆水稻穗长QTLPL6‑5提供了有力工具。
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公开(公告)号：CN106332770A
公开(公告)日：2017-01-18
申请号：CN201510999840.8
申请日：2015-12-29
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心 , 黑龙江省农垦科学院
Abstract: 本发明涉及杂交水稻遗传育种领域，尤其涉及一种寒地杂交粳稻选育方法；包括以下步骤：S1、以携带反温敏不育基因的雁农S作为供体亲本，同时以综合性状优良的寒地粳稻R1作为轮回亲本进行回交育种，培育得到保留R1基本特性的反温敏不育系R1S；S2、以R1S作为母本，同时以综合性状优良的寒地粳稻R2为父本，大量测配杂交组合，得到R1S/R2；S3、以同生态区域区试品种为对照，评价R1S/R2的综合性状，筛选后得到寒地杂交粳稻；其中，所述综合性状包括但不局限于产量、耐寒性、抗病性和米质中的其中一种或多种，所述寒地粳稻R2与寒地粳稻R1具有遗传差异。本发明的寒地杂交粳稻选育方法，具有高不育起点温度、具稳定遗传能力、高产优质、耐冷抗病、反温敏不育的特点。
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公开(公告)号：CN104904591A
公开(公告)日：2015-09-16
申请号：CN201510291861.4
申请日：2015-06-02
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心
Abstract: 本发明提供一种杂交水稻育种方法，包括以下步骤：1)将保持系T98B经过60Co-γ射线处理，获得光温敏不育系T98S；2)以T98S作为母本，以非野败恢复系R作为父本配制增产3％以上的杂交组合，筛选强优势杂交组合T98S/R。本发明通过人工诱变将优良保持系快速转变为光温敏不育系，突破了三系的恢保制约，提高了恢复系利用效率，加快了强优杂交组合的选育。
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公开(公告)号：CN102634506B
公开(公告)日：2014-02-26
申请号：CN201210097394.8
申请日：2012-04-06
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心
IPC: C12N15/10
Abstract: 一种黏性末端接头应用于侧翼序列分离的方法，包括以下步骤：1）提取待测基因组DNA；2）选择同尾酶；设计并合成对应的连接接头；3）用同尾酶酶切基因组，形成具有相同的黏性末端的DNA片段；4）电泳检测酶切质量，并定量DNA片段浓度；将所述接头与基因组酶切产物连接，形成“接头-酶切片段-接头”的DNA片段；5）纯化“接头-酶切片段-接头”的DNA片段，PCR扩增；6）回收步骤3）获得的片段并测序；7）分析测序结果，获得已知序列的未知侧翼序列；8）未知侧翼序列的验证。本发明之侧翼序列分离的方法，连接效率高，通用性高，成本低。
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