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公开(公告)号：CN103789246A
公开(公告)日：2014-05-14
申请号：CN201410005932.5
申请日：2014-01-03
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种透性化谷氨酸脱羧酶工程菌及其制备方法，所述方法包括：将已表达谷氨酸脱羧酶的谷氨酸脱羧酶工程菌菌体悬浮于水或缓冲液中，50～70℃处理5～40min后，收集菌体，得到所述的透性化谷氨酸脱羧酶工程菌；其中，所述的谷氨酸脱羧酶工程菌包括宿主细胞和转入宿主细胞的谷氨酸脱羧酶基因，所述的宿主细胞为大肠杆菌。本发明还提供了所述方法得到的透性化谷氨酸脱羧酶工程菌。本发明的方法，简便、成本低，易于操作，可有效提高菌体的谷氨酸脱羧酶表观催化活力。
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公开(公告)号：CN103773731A
公开(公告)日：2014-05-07
申请号：CN201410005648.8
申请日：2014-01-03
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种提高谷氨酸脱羧酶重组工程菌表观催化活力的方法，包括：将谷氨酸脱羧酶重组工程菌接种至培养基中，振荡培养，获得种子液；将种子液接种至培养基中，振荡培养至OD600为0.6～0.8时，加入诱导剂进行诱导培养，加入诱导剂的同时向培养基中加入细胞壁合成抑制剂或者表面活性剂来干扰重组菌细胞壁或（和）细胞膜的合成，达到增强菌体通透性、提高菌体表观催化活力的目的；诱导培养结束后收集菌体，即得到表观催化活力提高的谷氨酸脱羧酶重组工程菌。本发明避免了常规菌体培养后再进行透性化处理所需的多步工艺步骤，为改善高谷氨酸脱羧酶重组工程菌表观催化活力提供一种简便、高效和低成本的方法。
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公开(公告)号：CN102925368B
公开(公告)日：2014-01-01
申请号：CN201210441085.8
申请日：2012-11-07
Applicant: 浙江大学宁波理工学院 , 宁波美诺华药业股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种可催化不对称还原反应的球孢白僵菌(Beauveriabassiana)，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心，保存号为：CGMCC NO.6345，保藏时间2012年7月12日。本发明的菌株可以表达高立体选择性的羰基还原酶，利用该菌株进行4-氯乙酰乙酸乙酯的全细胞催化时，产物中S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的对映体过量值达到100％e.e.；利用该菌株进行N，N-二甲基-3-氧代-3-(2-噻吩)-1-丙胺盐酸盐的全细胞催化时，产物中(S)-N，N-二甲基-3-羟基-3-(2-噻吩)-1-丙胺盐酸盐的对映体过量值达到100％e.e.。
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公开(公告)号：CN103013898A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201210440849.1
申请日：2012-11-07
Applicant: 宁波美诺华药业股份有限公司 , 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种表达羰基还原酶的重组工程菌及其应用，该工程菌包括宿主细胞和转入宿主细胞的重组载体，所述重组载体由原始载体及接入原始载体的目的基因构成，所述宿主细胞为大肠杆菌(Escherichiacoli)Rosetta(DE3)，所述的目的基因为羰基还原酶基因，碱基序列如SEQ ID NO.1所示。本发明重组工程菌羰基还原酶表达水平较高，利用诱导培养的菌体细胞将氮，氮-二甲基-3-氧基-3-(2-噻吩)-l-丙胺盐酸盐转化为(S)-氮，氮-二甲基-3-羟基-3-(2-噻吩)-l-丙胺；或将4-氯乙酰乙酸乙酯转化为(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯，两种产物的光学纯度及转化率均较高。
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公开(公告)号：CN102925368A
公开(公告)日：2013-02-13
申请号：CN201210441085.8
申请日：2012-11-07
Applicant: 浙江大学宁波理工学院 , 宁波美诺华药业股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种可催化不对称还原反应的球孢白僵菌(Beauveriabassiana)，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心，保存号为：CGMCC NO.6345，保藏时间2012年7月12日。本发明的菌株可以表达高立体选择性的羰基还原酶，利用该菌株进行4-氯乙酰乙酸乙酯的全细胞催化时，产物中S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的对映体过量值达到100％e.e.；利用该菌株进行N，N-二甲基-3-氧代-3-(2-噻吩)-1-丙胺盐酸盐的全细胞催化时，产物中(S)-N，N-二甲基-3-羟基-3-(2-噻吩)-1-丙胺盐酸盐的对映体过量值达到100％e.e.。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111534493A
公开(公告)日：2020-08-14
申请号：CN202010250037.5
申请日：2020-04-01
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种嘌呤核苷磷酸化酶突变体、基因及应用。所述嘌呤核苷磷酸化酶突变体由大肠杆菌的嘌呤核苷磷酸化酶第167位甲硫氨酸突变成精氨酸、第168位苯丙氨酸突变成丙氨酸所得。本发明利用定点饱和突变技术对大肠杆菌(Escherichia coli)的嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)进行催化性能改良，筛选出的PNP突变酶比活力可达310U/mg，较野生型酶提高约47.6％，热稳定性更为优良。
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公开(公告)号：CN107177642B
公开(公告)日：2019-10-29
申请号：CN201710438866.4
申请日：2017-06-12
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种咪唑‑4‑乙酸的生物合成方法，该方法包括以下步骤：以L‑组氨酸为底物，在膜联L‑氨基酸脱氨酶的催化下，进行脱氨反应，得到含有中间产物3‑(4‑咪唑)‑2‑氧丙酸的反应液；向所述反应液中加入过氧化氢溶液，进行反应，反应结束后，得到咪唑‑4‑乙酸。本发明方法步骤简单，反应条件温和，原料来源广泛、生物催化剂易于制备、设备要求低，底物转化率高，且不需要使用有机溶剂和有毒试剂，相对于现有的化学法具有高效、成本低和环境友好的特点。
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公开(公告)号：CN104878059B
公开(公告)日：2018-06-26
申请号：CN201510149807.6
申请日：2015-03-31
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
IPC: C12P19/40
Abstract: 本发明公开了一种制备S‑腺苷蛋氨酸的方法，包括：以D/L‑蛋氨酸为原料，发酵获得S‑腺苷蛋氨酸，往发酵液中添加柠檬酸和磷酸盐。本发明将柠檬酸和磷酸盐添加入发酵液中，使菌株利用柠檬酸和磷酸盐合成ATP，在保证不显著提高原料成本的情况下，解决了现有技术中S‑腺苷蛋氨酸产量因胞内ATP浓度低造成的产物产量低的问题，显著提高了S‑腺苷蛋氨酸产量和L‑蛋氨酸的转化率。
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公开(公告)号：CN105918697A
公开(公告)日：2016-09-07
申请号：CN201610256493.4
申请日：2016-04-22
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
IPC: A23K50/80 , A23K20/158 , A23K20/163 , A23K40/30
Abstract: 本发明涉及一种饲料添加剂，该饲料添加剂包括挥发油混合物和载体，该挥发油混合物与载体的质量比为1:4～8，挥发油混合物由姜黄挥发油、绞股蓝挥发油以及苍术挥发油混合而成，所述载体为β‑环糊精；还涉及该饲料添加剂的制备方法和在水产动物饲料中的应用。与现有技术相比，本发明中的饲料添加剂应用于水产动物饲料中能显著增强水产动物的抗氧化能力，提高水产动物血清总抗氧化能力和超氧化物歧化酶的活性，增强机体的抗氧化能力，避免机体氧化损伤，增强水产动物的免疫功能，提高水产动物血清中溶菌酶活力和补体活力，提高血清中白细胞吞噬指数，改善机体健康，提高水产动物的增长率和存活率，促进生长，为发展水产动物的绿色饲养打下理论基础。
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公开(公告)号：CN103789246B
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201410005932.5
申请日：2014-01-03
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种透性化谷氨酸脱羧酶工程菌及其制备方法，所述方法包括：将已表达谷氨酸脱羧酶的谷氨酸脱羧酶工程菌菌体悬浮于水或缓冲液中，50～70℃处理5～40min后，收集菌体，得到所述的透性化谷氨酸脱羧酶工程菌；其中，所述的谷氨酸脱羧酶工程菌包括宿主细胞和转入宿主细胞的谷氨酸脱羧酶基因，所述的宿主细胞为大肠杆菌。本发明还提供了所述方法得到的透性化谷氨酸脱羧酶工程菌。本发明的方法，简便、成本低，易于操作，可有效提高菌体的谷氨酸脱羧酶表观催化活力。
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