公开(公告)号：CN107236720A

公开(公告)日：2017-10-10

申请号：CN201710182075.X

申请日：2017-03-24

Applicant: 本田技研工业株式会社

Inventor： 大熊二郎 ,  广濑佳嗣 ,  须田汀 ,  山口明日香 ,  近藤康弘 ,  佐藤大 ,  柴田大辅

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12P19/14

Abstract: 本发明提供一种耐热性纤维二糖水解酶，其具有纤维素结合基序区域及纤维二糖水解酶催化区域，且至少在95℃、且pH5.5的条件下具有以磷酸溶胀微晶纤维素为底物的水解活性，所述纤维素结合基序区域由以下(A1)、(B1)或(C1)构成：(A1)由序列号1所表示的氨基酸序列构成的多肽；(B1)由序列号1所表示的氨基酸序列中的至少一个氨基酸的缺失、取代或添加而形成的氨基酸序列所构成的、且具有与纤维素结合的功能的多肽；(C1)由与序列号1所表示的氨基酸序列具有70％以上序列一致性的氨基酸序列所构成、且具有与纤维素结合的功能的多肽。

公开(公告)号：CN105331596A

公开(公告)日：2016-02-17

申请号：CN201510463482.9

申请日：2015-07-31

Applicant: 本田技研工业株式会社

Inventor： 近藤康弘 ,  广濑佳嗣 ,  山口明日香 ,  须田汀 ,  大熊二郎 ,  加藤友彦 ,  柴田大辅

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/63 ,  C12N1/15

CPC classification number: C12N9/248 ,  C07K2319/00 ,  C07K2319/02 ,  C12N9/2445 ,  C12Y302/01037 ,  C12N9/2434

Abstract: 本发明提供一种耐热性β-木糖苷酶，其具有由下列(A)、(B)或(C)构成的β-木糖苷酶催化区域：(A)由序列号1所示氨基酸序列构成的多肽；(B)由序列号1所示氨基酸序列中的至少一个氨基酸的缺失、取代或添加而形成的氨基酸序列所构成的、并且至少在85℃且pH6.0的条件下具有以对硝基苯基-β-D-吡喃木糖苷为底物的水解活性的多肽；(C)由与序列号1所示氨基酸序列具有80％以上序列一致性的氨基酸序列构成的、并且至少在85℃且pH6.0的条件下具有以对硝基苯基-β-D-吡喃木糖苷为底物的水解活性的多肽。

公开(公告)号：CN107236719B

公开(公告)日：2020-10-16

申请号：CN201710181595.9

申请日：2017-03-24

Applicant: 本田技研工业株式会社

Inventor： 大熊二郎 ,  须田汀 ,  山口明日香 ,  广濑佳嗣 ,  近藤康弘 ,  佐藤大 ,  柴田大辅

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12P19/14

Abstract: 本发明提供一种耐热性纤维二糖水解酶，其具有由下列(A)、(B)或(C)构成的纤维二糖水解酶催化区域。(A)由序列号1所表示的氨基酸序列构成的多肽；(B)由序列号1所表示的氨基酸序列中的至少一个氨基酸的缺失、取代或添加而形成的氨基酸序列所构成、且至少在65℃、且pH为6的条件下具有以磷酸溶胀微晶纤维素为底物的水解活性的多肽；(C)由与序列号1所表示的氨基酸序列具有80％以上序列一致性的氨基酸序列所构成、且至少在65℃、pH为6的条件下具有以磷酸溶胀微晶纤维素为底物的水解活性的多肽。

公开(公告)号：CN105331596B

公开(公告)日：2018-11-23

申请号：CN201510463482.9

申请日：2015-07-31

Applicant: 本田技研工业株式会社

Inventor： 近藤康弘 ,  广濑佳嗣 ,  山口明日香 ,  须田汀 ,  大熊二郎 ,  加藤友彦 ,  柴田大辅

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/63 ,  C12N1/15

CPC classification number: C12N9/248 ,  C07K2319/00 ,  C07K2319/02 ,  C12N9/2445 ,  C12Y302/01037

Abstract: 本发明提供一种耐热性β‑木糖苷酶，其具有由下列(A)、(B)或(C)构成的β‑木糖苷酶催化区域：(A)由序列号1所示氨基酸序列构成的多肽；(B)由序列号1所示氨基酸序列中的至少一个氨基酸的缺失、取代或添加而形成的氨基酸序列所构成的、并且至少在85℃且pH6.0的条件下具有以对硝基苯基‑β‑D‑吡喃木糖苷为底物的水解活性的多肽；(C)由与序列号1所示氨基酸序列具有80％以上序列一致性的氨基酸序列构成的、并且至少在85℃且pH6.0的条件下具有以对硝基苯基‑β‑D‑吡喃木糖苷为底物的水解活性的多肽。

公开(公告)号：CN105695436A

公开(公告)日：2016-06-22

申请号：CN201510895691.0

申请日：2015-12-08

Applicant: 本田技研工业株式会社

Inventor： 大熊二郎 ,  须田汀 ,  山口明日香 ,  广濑佳嗣 ,  近藤康弘 ,  佐藤大 ,  柴田大辅

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12N1/19 ,  C12N1/15 ,  C12N5/10 ,  C12P19/14 ,  C12P19/04

Abstract: 本发明提供一种耐热性β-木糖苷酶，其具有由下列(A)、(B)或(C)构成的β-木糖苷酶催化区域：(A)由序列号1或2所示氨基酸序列构成的多肽；(B)由序列号1或2所示氨基酸序列中的至少一个氨基酸的缺失、取代或添加而形成的氨基酸序列所构成、并且至少在105℃且pH5.0的条件下具有以对硝基苯基-β-D-吡喃木糖苷为底物的水解活性的多肽；(C)由与序列号1或2所示氨基酸序列具有75％以上序列一致性的氨基酸序列所构成、并且至少在105℃且pH5.0的条件下具有以对硝基苯基-β-D-吡喃木糖苷为底物的水解活性的多肽。

公开(公告)号：CN105316302A

公开(公告)日：2016-02-10

申请号：CN201510468554.9

申请日：2015-08-03

Applicant: 本田技研工业株式会社

Inventor： 须田汀 ,  大熊二郎 ,  广濑佳嗣 ,  山口明日香 ,  近藤康弘 ,  加藤友彦 ,  柴田大辅

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N15/79 ,  C12N1/21 ,  C12N1/15 ,  C12P19/14

CPC classification number: C12N9/2437 ,  C07K2319/21 ,  C12N9/248 ,  C12P19/02 ,  C12P19/14 ,  C12Y302/01004 ,  C12Y302/01008 ,  C12N9/2482

Abstract: 本发明提供一种超耐热性内切葡聚糖酶，其具有由下列(A)、(B)或(C)构成的内切葡聚糖酶催化区域：(A)由序列号3或序列号11所示氨基酸序列构成的多肽；(B)由序列号3或序列号11所示氨基酸序列中的至少一个氨基酸的缺失、取代或添加而形成的氨基酸序列所构成的、并且至少在110℃且pH4.0的条件下具有以羧甲基纤维素为底物的水解活性的多肽；(C)由与序列号3或序列号11所示氨基酸序列具有70％以上序列一致性的氨基酸序列构成的、并且至少在110℃且pH4.0的条件下具有以羧甲基纤维素为底物的水解活性的多肽。

公开(公告)号：CN104911197A

公开(公告)日：2015-09-16

申请号：CN201510106938.6

申请日：2015-03-11

Applicant: 本田技研工业株式会社

Inventor： 须田汀 ,  大熊二郎 ,  山口明日香 ,  广濑佳嗣 ,  近藤康弘

IPC: C12N15/56 ,  C12N15/10 ,  C12N9/42 ,  C12P19/14

CPC classification number: C12N9/2437 ,  C12N15/102 ,  C12N15/1034 ,  C12N15/1089 ,  C12P19/02 ,  C12P19/14 ,  C12Y302/01004 ,  C40B30/02

Abstract: 一种有选择性地获取具有活性的酶的自然变异体的方法，包括1)从由环境微生物菌丛宏基因组DNA碱基序列组成的基因组数据库中，检测具有酶活性的蛋白质ORF序列；2)使用基于该ORF序列而设计的引物，对至少一个环境微生物菌丛宏基因组DNA进行PCR克隆，获得至少一个由该ORF序列的全长、该ORF序列的部分序列、或编码该ORF序列所编码的氨基酸序列中至少缺失、取代或添加了一个氨基酸残基的氨基酸序列的碱基序列所组成的PCR克隆；3)对在工序2)中得到的各PCR克隆，确定碱基序列及该碱基序列所编码的氨基酸序列；4)测定在工序2)中得到的各PCR克隆所编码的蛋白质的酶活性，选择具有活性的酶的自然变异体。