公开(公告)号：CN106692964A

公开(公告)日：2017-05-24

申请号：CN201611102065.2

申请日：2016-12-05

Applicant: 扬州大学 ,  国药集团扬州威克生物工程有限公司 ,  福建圣维生物科技有限公司

Inventor： 叶建强 ,  张建军 ,  李文迹 ,  张伟 ,  秦爱建 ,  殷健 ,  高巍 ,  邵红霞 ,  梁广成

IPC: A61K39/235 ,  A61P31/14 ,  C12N7/00

CPC classification number: A61K39/12 ,  A61K2039/5252 ,  A61K2039/552 ,  C12N7/00 ,  C12N2710/10034

Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域，具体涉及血清4型禽腺病毒灭活苗及其制备方法。所述血清4型禽腺病毒灭活苗，其抗原为通过悬浮培养方法获得的效价不低于109TCID50/ml的灭活后的血清4型禽腺病毒。本发明的利用鸡肝细胞，通过激流式生物反应器悬浮培养技术高效扩增血清4型禽腺病毒，并研制出高效价血清4型禽腺病毒灭活苗。该疫苗效价可达109TCID50/ml，是传统鸡胚疫苗效价的100倍。高效价血清4型禽腺病毒灭活苗的制备可大大降低疫苗的成本，提供疫苗免疫效果，具有很好的应用前景。

公开(公告)号：CN109295010B

公开(公告)日：2021-04-02

申请号：CN201811178904.8

申请日：2018-10-10

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  任丹 ,  李拓凡 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  高巍 ,  张鑫宇

IPC: C12N7/00 ,  C12N7/02 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明涉及一种利用鸡肝细胞进行坦布苏病毒高效扩增的方法，包括以下步骤：（1）细胞培养：将鸡肝细胞用含体积浓度为10%胎牛血清的DMEM‑F12培养基进行培养，待细胞长满单层后，用PBS洗涤一遍后，以质量浓度为0.25%的胰酶进行消化、传代至细胞培养板中；（2）鸡肝细胞高效扩增坦布苏病毒：将鸡肝细胞接种至细胞培养板内培养，在汇合度为60%到70%时，将坦布苏病毒AHRD2018株接种鸡肝细胞，MOI为0.01，以2ml含体积浓度为2%胎牛血清的培养基培养4天，定时收集200μl上清冻存于‑80℃冰箱备用，同时每孔补200μl含体积浓度为2%胎牛血清的培养基。本发明利用鸡肝细胞可以更早产生高滴度病毒的特性，利用病毒复制速率显著高于DF‑1细胞和BHK‑21细胞的鸡肝细胞来扩增坦布苏病毒。