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公开(公告)号：CN115947795B
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202211064046.0
申请日：2022-09-01
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01 , C12N15/70 , G01N33/535 , G01N33/68 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种检测非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的重组蛋白、双抗原夹心ELISA试剂盒及其应用，包括包被抗原的酶标板、酶标抗体、非洲猪瘟阳性对照血清、ASF阴性对照血清、稀释液、反应液、10×洗涤液、TMB底物溶液、终止液。该试剂盒中包被酶标板的抗原为携带His标签的重组ASFV p54、p30融合蛋白(p54‑30‑His)。该试剂盒可用于ASFV感染血清学诊断以及抗体的水平的监测、流行病学调查等，并能有效避免重组亚单位疫苗或病毒样颗粒疫苗免疫猪抗体检测时标签蛋白的干扰，为ASFV抗体检测、检测提供一种准确、有效的方法。
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公开(公告)号：CN115947795A
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202211064046.0
申请日：2022-09-01
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01 , C12N15/70 , G01N33/535 , G01N33/68 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种检测非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的重组蛋白、双抗原夹心ELISA试剂盒及其应用，包括包被抗原的酶标板、酶标抗体、非洲猪瘟阳性对照血清、ASF阴性对照血清、稀释液、反应液、10×洗涤液、TMB底物溶液、终止液。该试剂盒中包被酶标板的抗原为携带His标签的重组ASFV p54、p30融合蛋白(p54‑30‑His)。该试剂盒可用于ASFV感染血清学诊断以及抗体的水平的监测、流行病学调查等，并能有效避免重组亚单位疫苗或病毒样颗粒疫苗免疫猪抗体检测时标签蛋白的干扰，为ASFV抗体检测、检测提供一种准确、有效的方法。
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公开(公告)号：CN110196323A
公开(公告)日：2019-09-03
申请号：CN201910427204.6
申请日：2019-05-22
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/533 , G01N33/544
Abstract: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒抗原荧光微球免疫试纸卡，包括PVC底板，在PVC底板上按顺序依次固定有样品垫、荧光垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；荧光垫内有荧光标记抗ASFV p30抗原的一个表位的单克隆抗体Mab1；硝酸纤维素膜表面划有检测线和质控线，检测线为针对ASFV p30抗原另一表位的单克隆抗体Mab2，质控线为羊抗小鼠IgG抗体。适用于发病猪外周血、血清、唾液、组织(肺脏、脾脏)研磨液内ASFV p30抗原的检测，在短时间内诊断出ASFV感染，特别适合现场ASFV感染诊断、流行病学调查和生猪国际贸易检疫检验；与免疫荧光分析仪协同使用直接显示结果，操作迅速简单、准确率高，具有很强的实用性。
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公开(公告)号：CN107022026A
公开(公告)日：2017-08-08
申请号：CN201710438812.8
申请日：2017-06-12
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术研究领域，具体涉及一种鸡卵黄抗体的纯化方法。所述的鸡卵黄抗体纯化方法用类弹性蛋白多肽(ELP)与链球菌G蛋白(SPG)C2结构域融合蛋白与粗制卵黄抗体结合，用相变循环沉淀结合复合物；然后洗脱卵黄抗体，用相变循环去除ELP‑C2融合蛋白。与现有的卵黄抗体纯化方法相比，本发明的鸡卵黄抗体纯化方法具有简单、快速和纯化效率高等优点。
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公开(公告)号：CN101921878B
公开(公告)日：2012-09-05
申请号：CN201010288475.7
申请日：2010-09-21
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种非洲猪瘟病毒核酸扩增引物、检测方法和试剂盒。所说的引物对和特异性核酸探针选自SEQIDNO：1-12。其检测方法包括步骤：（a）利用PCR引物扩增待测样本中核酸；（b）将烷巯基标记的检测探针标记至纳米金颗粒上；（c）将生物素标记的捕捉探针和步骤（b）纳米金标记的检测探针与变性的PCR产物杂交；（d）将步骤（c）的杂交体系加入包被链亲素的酶标板，捕捉杂交复合物；（e）银染增强捕捉的纳米金；（f）终止银染增强反应，肉眼观察灰度判定结果。本发明具有检测敏感性高、检测特异性强以及检测成本低的特点，可有效排除PCR方法检测非洲猪瘟病毒出现的假阳性或假阴性，快速检测出非洲猪瘟病毒核酸。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109810976B
公开(公告)日：2019-11-05
申请号：CN201910110764.9
申请日：2019-02-12
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及猪塞内卡病毒全长感染性克隆的制备方法及应用，包括如下步骤：（1）SVV/GD05株基因组全序列的扩增；（2）pSVV‑GD05病毒感染性克隆质粒的构建；（3）pSVV‑GD05‑iLOV重组质粒的构建；（4）亲本病毒（SVV‑GD05）与重组病毒（SVV‑GD05‑iLOV）拯救。本发明利用一株分离自中国猪群的SVV毒株，构建出以细菌质粒为骨架的病毒感染性克隆pSVV‑GD05，并能成功拯救出病毒。同时，将报告基因iLOV插入SVV感染性克隆病毒基因组中，成功拯救出能表达该报告基因的重组SVV病毒。本发明为深入开展SVV的基础和应用研究提供了有效的平台，具有重要的科学应用价值。
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公开(公告)号：CN105886489A
公开(公告)日：2016-08-24
申请号：CN201610300134.4
申请日：2016-05-09
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N9/506 , C07K14/57 , C12N15/70 , C12N2800/101 , C12N2800/22 , C12P21/06
Abstract: 本发明属于生物技术研究领域，具体涉及一种烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVP)活性包涵体及其制备方法和在重组蛋白制备中的应用。所述TEVP活性包涵体由两个PT连接头分隔的ELK16自聚肽和烟草蚀纹病毒蛋白酶组成。其制备方法包括表达载体构建、活性包涵体表达与纯化、重组蛋白切割和目的蛋白回收。与现有的TEVP相比，本发明的TEVP活性包涵体具有制备简单、容易从终产物中去除和价格低廉等优点，可以用于各种重组蛋白的制备。
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公开(公告)号：CN103278627B
公开(公告)日：2015-09-02
申请号：CN201310193976.0
申请日：2013-05-22
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明的一种检测非洲猪瘟病毒（ASFV）抗体的多抗原酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒属于生物技术和动物传染病诊断研究领域，包括三种ASFV重组抗原表达与纯化、ASFV抗体阳性和阴性对照血清制备、最佳包被抗原组合及浓度确定、多抗原ELISA（MA-ELISA）反应参数优化、ASFV抗体阴性血清临界值确定以及MA-ELISA检测人工感染和田间血清样品的灵敏性、特异性、可重复性测定。通过大量已知血清样品检测证明，本发明的MA-ELISA检测血清ASFV抗体的灵敏性、特异性和可重复性显著高于世界动物卫生组织推荐的ELISA方法和国外同类试剂盒，可用于ASFV血清学诊断、流行病学调查和生猪进出口检疫检验。
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公开(公告)号：CN103525775B
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201310485894.3
申请日：2013-10-16
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及表达猪繁殖与呼吸综合征病毒游离受体重组腺病毒组及其制备与应用。所述重组腺病毒组，是由表达猪唾液酸粘附素前4个IgV结构域和与猪IgG Fc片段融合蛋白的重组腺病毒，及表达脱衣壳受体CD163第5-9个SRCR结构域与猪IgG Fc片段融合蛋白的重组腺病毒组成。该重组腺病毒组应用于制备防治猪繁殖与呼吸综合征制剂。与现有的疫苗相比，本发明制备的重组腺病毒为复制缺陷性病毒，不能在猪体内扩散传播，不存在散毒和毒力返强风险，表达的两种游离受体的协同作用能显著抑制不同毒株PRRSV感染，可以作为防控PRRS的新型制剂进行开发。
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公开(公告)号：CN103293306A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201310197035.4
申请日：2013-05-22
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明涉及的一种非洲猪瘟病毒（ASFV）抗体检测胶体金免疫层析试纸条制备方法属于生物工程和动物疫病诊断领域，包括ASFV重组抗原p54表达、纯化、抗体制备、胶体金免疫层试纸条制备及其检测ASFV抗体的灵敏性和特异性。与现有的其他血清学方法相比，用本发明建立的胶体金免疫层析试纸条具有方便、快速、灵敏和特异等优点，能在5分钟内获得明确的诊断结果，并能直接检测可疑猪血清（或抗凝血）的病毒抗体，特别适合现场ASFV血清学诊断、流行病学调查和生猪国际贸易检疫检验。
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