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公开(公告)号：CN114150007A
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN202111525445.8
申请日：2021-12-14
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种适用于家兔乳腺特异性表达去氨普酶DSPAα1的编码基因，应用所述编码基因来制备去氨普酶DSPAα1，表达量高，生产成本低。本发明还涉及一种从兔乳中提取、纯化去氨普酶rDSPA的方法，通过联用苯甲醚亲和层析、阳离子交换层析和活性蓝亲和层析进行分离纯化，操作简便、产品纯度高，可达98%。
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公开(公告)号：CN103571864A
公开(公告)日：2014-02-12
申请号：CN201310563264.3
申请日：2013-11-14
Applicant: 扬州大学
Abstract: 载体pGEMT/rhPA及其构建方法、在高效重组人纤溶酶原激活剂制备方法中的应用，属于生物工程领域的基因工程和细胞工程技术，本发明采用先构建pGEMT/5’P载体，再构建pGEMT/5’+3’P载体，最后构建成于9203－10269位置共1068bp，其中编码356个氨基酸的pGEMT/rhPA载体，试验证明其表达的重组产物具有含量高、比活性高的优点，可用于开发人溶血栓药。
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公开(公告)号：CN102391989A
公开(公告)日：2012-03-28
申请号：CN201110308199.0
申请日：2011-10-12
Applicant: 扬州大学
Inventor： 成勇
IPC: C12N5/10 , C12N15/877 , C12Q1/68 , A61D19/04 , A01K67/027 , G01N33/68
Abstract: 本发明涉及动物转基因新品种培育领域的转基因动物优良性状的客观评定。本发明的技术方案（1）采集一个动物的体细胞，将同一个体的同类细胞分成两组，其中一组转染外源基因，另一组不转染外源基因；（2）分别用两组细胞制备克隆（SCNT）动物，并分别获得同一细胞系、同一细胞类型、相同年龄的转基因和非转基因克隆动物；（3）分析转基因与非转基因两组动物的表型差异，及它们的组织样品进行相关生物学试验，对转基因动物作出安全性评价。应用该方法进行生物安全性评价可消除动物个体差异，获得更加精确的转基因动物生理、生化指标，及转基因动物产品（肉、乳、毛、等）与非转基因动物产品的区别，更加客观地进行转基因产品的生物安全评价。
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公开(公告)号：CN103952405B
公开(公告)日：2016-02-10
申请号：CN201410201664.4
申请日：2014-05-13
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种山羊MSTN基因定点修饰系统及其应用方法，所述山羊MSTN基因定点修饰系统，即能够有效的识别、修饰山羊MSTN基因靶序列的转录激活样效应因子核酸酶TALENs；本发明提供的转录激活样效应因子核酸酶TALENs由分别能够特异识别所述识别模块TALMEX-1F和TALMEX-1R的核酸酶TALEN-R和TALEN-L组成；所述核酸酶TALEN-L为SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示核苷酸序列编码的蛋白质，所述核酸酶TALEN-R为SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5所示核苷酸序列编码的蛋白质。本发明还公开了使用上述敲除系统对山羊细胞MSTN基因进行靶向修饰，获得突变细胞系的方法。本发明对于在山羊上对MSTN基因进行敲除或改造以获得优质瘦肉率的新品种及MSTN基因调控机理研究具有重大应用价值。
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公开(公告)号：CN1896268B
公开(公告)日：2010-05-12
申请号：CN200610085611.6
申请日：2006-06-27
Applicant: 扬州大学
Inventor： 成勇
Abstract: 从羊胚胎中提取活化小分子羊胎素的方法及其用途，属生物工程技术领域，将去除肠胃肠的40～90日龄新鲜羊胚胎切碎后，加蒸馏水，制成匀浆，在-20℃条件下反复冻融，过滤，将滤液加热后，分别取得滤过液A及沉淀物A；将滤过液A超滤，取透明淡黄色滤过液B和沉淀物B；将沉淀物A及沉淀物B合并，调pH至2.0，加入胃蛋白酶，再调pH至7.0，在100±2℃条件下保温后，取滤过液C；将滤过液B和滤过液C合并，即为活化小分子羊胎素。可用于制备外用祛除皱纹、美化皮肤用品。本发明的羊胎素分子量控制在3000～6000之间，大部分为小分子肽及细胞因子成份，活化性高，减少了过敏等副作用，并提高了皮肤吸收率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101451151A
公开(公告)日：2009-06-10
申请号：CN200810242891.6
申请日：2008-12-30
Applicant: 扬州大学
Inventor： 成勇
IPC: C12N15/85 , C12N5/20 , A01K67/027 , C07K14/47
Abstract: 本发明涉及生物工程领域的生物活性蛋白表达体系的建立，该技术可应用于制备重组蛋白，如某些细胞因子、酶及抗原性蛋白(疫苗)，本发明的技术方案是应用功能基因的DNA编码序列及含有核心启动/增强子序列的表达载体组成的基因构件，制备转基因小(大)鼠，从转基因小(大)鼠中获得转基因组织细胞，应用细胞融合的方法将转基因细胞与肿瘤细胞融合产生杂交瘤细胞，杂交瘤细胞接种小鼠腹腔大量生产重组蛋白。应用本发明可大规模、高效率生产重组蛋白。利用杂交瘤细胞及小鼠个体作为生产媒介不仅成本低、产量高，而且较其它动物安全、卫生，易控制质量。因此，本发明在生物产业中有较高的应用价值。
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公开(公告)号：CN1873011A
公开(公告)日：2006-12-06
申请号：CN200610040436.9
申请日：2006-05-10
Applicant: 扬州大学
Inventor： 成勇
Abstract: 高表达水平的转基因动物乳腺特异性载体的构建方法，生物工程技术领域，该技术应用于制备转基因动物乳腺生物反应器。以巨细胞病毒部分非编码序列为增强子序列，将巨细胞病毒增强子序列构建在动物乳蛋白调控序列和功能基因之间，组成乳腺特异性表达载体。本发明应用真核基因增强子序列为巨细胞病毒增强子序列(约500bp)；动物乳蛋白调控序列可以是酪蛋白非编码区或乳球蛋白非编码区；功能基因可以是cDNA或基因组DNA，这些元件一起组成乳腺特异性表达载体，以提高转基因动物乳腺生物反应器表达水平和表达率。
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公开(公告)号：CN106947780A
公开(公告)日：2017-07-14
申请号：CN201710191095.3
申请日：2017-03-28
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/90 , C12N9/22 , A01K67/027
CPC classification number: C12N15/907 , A01K67/0276 , A01K2217/075 , A01K2227/107 , C12N9/22 , C12N15/102
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种兔MSTN基因编辑方法。该方法是利用CRISPR/Cas9在兔MSTN基因座定点实现基因修饰；包括根据兔MSTN基因靶序列位点设计和引导序列、利用引导序列构建2种CRISPR/Cas9二合一质粒mstn‑sgRNA1和mstn‑sgRNA2、体外转录出sgRNA‑1、sgRNA‑2和Cas9mRNA并形成两种二合一复合物的分子生物学材料，再利用该分子生物学材料制备转基因兔，诱导MSTN基因编码序列第3外显子4881‑4903及4796‑4818位核苷酸序列的突变与缺失的步骤。应用本发明方法可实现MSTN基因突变和基因敲除，获得MSTN表达缺失或降低的基因编辑兔，本发明可用于瘦肉型兔基因编辑育种。
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公开(公告)号：CN103194468B
公开(公告)日：2014-08-06
申请号：CN201310147589.3
申请日：2013-04-25
Applicant: 扬州大学
Inventor： 成勇
Abstract: 本发明属生物工程领域，提供了重组人纤溶酶原激活剂的新序列，如SEQIDNO.1所示，这种序列可用制备乳腺特异性表达重组人纤维蛋白酶原激活剂；此DNA序列的动物表达重组产物促进纤维蛋白溶解的作用也得到试验和证实；本发明还公开了用于hrPA转基因羊制备的乳腺表达载体的结构。细胞转染外源基因操作步骤、转染外源基因的细胞筛选及转基因细胞核移植，获得转基因克隆羊；该技术可用于大规模制备用于人心血病治疗的溶血栓药物，其生产成本低、安全性高、产物活性高。本发明具有完全自主的知识产权，后续开发产品为自主产品。该发明具有广阔的产业前景和巨大的经济效益。
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公开(公告)号：CN103952405A
公开(公告)日：2014-07-30
申请号：CN201410201664.4
申请日：2014-05-13
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种山羊MSTN基因定点修饰系统及其应用方法，所述山羊MSTN基因定点修饰系统，即能够有效的识别、修饰山羊MSTN基因靶序列的转录激活样效应因子核酸酶TALENs；本发明提供的转录激活样效应因子核酸酶TALENs由分别能够特异识别所述识别模块TALMEX-1F和TALMEX-1R的核酸酶TALEN-R和TALEN-L组成；所述核酸酶TALEN-L为SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示核苷酸序列编码的蛋白质，所述核酸酶TALEN-R为SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5所示核苷酸序列编码的蛋白质。本发明还公开了使用上述敲除系统对山羊细胞MSTN基因进行靶向修饰，获得突变细胞系的方法。本发明对于在山羊上对MSTN基因进行敲除或改造以获得优质瘦肉率的新品种及MSTN基因调控机理研究具有重大应用价值。
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