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公开(公告)号：CN113249506A
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202110709487.0
申请日：2021-06-25
Applicant: 徐州工程学院
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6837 , C12Q1/10 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种用于迟缓爱德华氏菌检测的基因芯片探针组，属于食品安全和食源性致病微生物检测技术领域。所述基因芯片探针组包括捕获探针ET‑CP、检测探针ET‑DP、滚环探针ET‑RCP，其中所述检测探针ET‑DP是由ET‑DPA，ET‑DPB和ET‑DPC按照5’‑3’方向依次连接而成。本发明所述基因芯片探针组选取了迟缓爱德华氏菌毒力相关的特异性靶蛋白基因的DNA片段，并以所述基因芯片探针组开发了基因芯片滚环探针检测迟缓爱德华氏菌，该方法灵敏度高，可实现快速、准确、便捷的检测，对于实验室研究和食品安全、水产养殖、海产品质量安全检测以及海洋环境监测等生产实践都具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN106008343B
公开(公告)日：2018-12-11
申请号：CN201610463837.9
申请日：2016-06-23
Applicant: 徐州工程学院
IPC: C07D221/14 , C09K11/06 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种基于萘酰亚胺的汞离子荧光探针及其制备方法和应用，所制备的汞离子荧光探针是以1,8‑萘酰亚胺为荧光母体，依次通过与正丁胺反应，得到强荧光性的中间体N‑丁基‑4‑溴‑1,8‑萘酰亚胺，所得中间体与2‑甲氧基苄胺反应引入氮原子和氧原子，增强该化合物和金属离子的配位能力，检测过程中发明的该小分子传感器上的氮原子和氧原子能很快地和汞离子发生配位，使荧光迅速增强，从而实现对汞离子的检测。本发明所制备的汞离子荧光探针是一种结构简单，合成方法简单，原料廉价易得，产率高，易于制备的理想的汞离子化学传感器。
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公开(公告)号：CN104087544A
公开(公告)日：2014-10-08
申请号：CN201410276444.8
申请日：2014-06-19
Applicant: 徐州工程学院
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , A62D3/02 , C12R1/125 , A62D101/04 , A62D101/28
Abstract: 本发明涉及一种可以降解有机磷农药工程菌、其构建方法和应用。该工程菌含有编码广谱有机磷农药水解酶（OPH）的opd基因，能表达有机磷农药水解酶。该菌株为Bacillussubtilissp.LTG1菌株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为CGMCCNo.9272。该工程菌可以同时降解敌敌畏、马拉硫磷、乐果、氧化乐果、对硫磷、甲基对硫磷和乙酰甲胺磷等有机磷类农药，该菌株可用于水源、土壤中有机磷农药污染的生物降解和生物净化。
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公开(公告)号：CN104004689A
公开(公告)日：2014-08-27
申请号：CN201410256536.X
申请日：2014-06-10
Applicant: 徐州工程学院
Abstract: 本发明公开了一种能降解2,4–滴丁酯和敌敌畏的菌株及其制备修复菌剂的方法，所述菌株为革兰氏阴性菌，显微镜下可见菌株菌体为短杆状。透射电镜下，具有极生鞭毛。在LB平板上培养菌落呈圆形、油滴状、黄色、不透明，表面湿润、粘稠，边缘整齐。在短时间内对2,4-滴丁酯和敌敌畏降解率分别为99.82%和99.65%，该菌株为Pseudomonassp.LT1菌株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为CGMCC No.7947。该菌株可用于上述农药的生物降解，以及农药污染的土壤及农产品的生物修复和生物净化。
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公开(公告)号：CN110669777B
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN201911124752.8
申请日：2019-11-18
Applicant: 徐州工程学院
Abstract: 本发明公开了一种杀虫球孢白僵菌工程菌构建方法，设计引物从pUC57‑AaIT载体中PCR扩增AaIT基因，经酶切、纯化和pbarGPEl构建pbarGPEl‑AaIT载体；用引物扩增出GpdA‑AaIT‑TrpC表达盒；用Not1单酶切pGPS3Ben‑bbchit1并去磷酸化，与用Not1酶切的GpdA‑AaIT‑TrpC连接，转化筛选获得pGPS3Ben‑bbchit1‑AaIT表达载体，将其导入根癌农杆菌感受态细胞中获得阳性转化子菌落；球孢白僵菌孢子悬液和含pGPS3Ben‑bbchit1‑AaIT载体的根癌农杆菌液混合，经固体IM培养基、CPZ选择培养基筛选获得转化球孢白僵菌工程菌株。本发明构建的球孢白僵菌工程菌株可制备高效杀虫生物防治剂，对环境无污染且防治效果良好，适合在生物防治技术领域推广。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110786381A
公开(公告)日：2020-02-14
申请号：CN201911027897.6
申请日：2019-10-28
Applicant: 徐州工程学院
IPC: A23C9/133
Abstract: 本发明公开了一种紫薯杏仁风味酸奶的制备方法，将紫薯浆与杏仁浆按照体积比4:1，均匀混合制得混合浆液，再加入纯牛奶、白砂糖混合均匀，再加入稳定剂，加入纯牛奶至总量为100mL，充分搅拌混合后，采用高压均质的方法，均质压力设置为18-20MPa，注入高压灭菌的酸奶瓶中，在温度为62℃进行巴氏杀菌30min，冷却至42℃，再加入乳酸菌冻干粉作为发酵剂，用灭菌玻璃棒充分搅拌，立即盖上酸奶瓶的瓶盖以保持其在厌氧环境中，在恒温培养箱中进行乳酸发酵，发酵温度41℃、发酵时间8h；发酵完成后，将其自然冷却到10℃；接着放入4℃的冰箱冷藏室中保存，后熟时间为12h，最终即可得到紫薯杏仁风味酸奶。
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公开(公告)号：CN110669777A
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201911124752.8
申请日：2019-11-18
Applicant: 徐州工程学院
Abstract: 本发明公开了一种杀虫球孢白僵菌工程菌构建方法，设计引物从pUC57-AaIT载体中PCR扩增AaIT基因，经酶切、纯化和pbarGPEl构建pbarGPEl-AaIT载体；用引物扩增出GpdA-AaIT-TrpC表达盒；用Not1单酶切pGPS3Ben-bbchit1并去磷酸化，与用Not1酶切的GpdA-AaIT-TrpC连接，转化筛选获得pGPS3Ben-bbchit1-AaIT表达载体，将其导入根癌农杆菌感受态细胞中获得阳性转化子菌落；球孢白僵菌孢子悬液和含pGPS3Ben-bbchit1-AaIT载体的根癌农杆菌液混合，经固体IM培养基、CPZ选择培养基筛选获得转化球孢白僵菌工程菌株。本发明构建的球孢白僵菌工程菌株可制备高效杀虫生物防治剂，对环境无污染且防治效果良好，适合在生物防治技术领域推广。
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公开(公告)号：CN108374052A
公开(公告)日：2018-08-07
申请号：CN201810228084.2
申请日：2018-03-20
Applicant: 徐州工程学院
Abstract: 本发明公开了一种用于生物芯片检测金黄色葡萄球菌的探针组序列，属于食源性致病微生物检测技术领域。所述的探针组为：捕获探针CP(CP，Capture probe)、检测探针(DP，detect probe)、滚环探针(RCP，Rolling circle probe)。该套探针组序列根据GenBank上金黄色葡萄球菌的全基因组序列设计，以上述探针组开发的生物芯片RCA检测金黄色葡萄球菌方法具有灵敏度高、特异性强和准确性高等特点，可广泛适用于食品、养殖及口岸等检测。
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公开(公告)号：CN106987641A
公开(公告)日：2017-07-28
申请号：CN201710301856.6
申请日：2017-05-02
Applicant: 徐州工程学院
CPC classification number: Y02A50/451 , C12Q1/6844 , C40B40/06 , C12Q2531/125 , C12Q2563/107 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明公开了一种检测食源性致病菌生物芯片的制备方法，属于食源性致病微生物检测技术领域，本发明以食源性致病菌独有的蛋白基因序列设计其特异性的CP、DP和RCP。CP和DP含有与待检菌基因组DNA特异性序列互补的序列，RCP不含任何待检菌基因组DNA序列；CP点样固定在醛基修饰的芯片表面，制备成捕获探针微阵列，在片CP和DP与待检菌基因组DNA退火并连接，加入链亲和素与固相RCA扩增产物结合，在一定的条件下洗脱。用近红外荧光成像仪扫描芯片，检测CP与DP能否连接，以及能否实现滚环扩增和检测靶标，从而特异性检测目标食源性致病菌。该方法可检测多种食源致病性微生物，适用于食品、养殖及口岸等多种食源致病性微生物高通量、快速、准确检测。
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公开(公告)号：CN103439514B
公开(公告)日：2015-06-10
申请号：CN201310338039.X
申请日：2013-08-05
Applicant: 徐州工程学院
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明是以小分子的农兽药半抗原与牛血清白蛋白偶联制备成免疫抗原，用免疫抗原免疫小鼠制备得到相应的农兽药单克隆抗体，捕获单抗探针用生物芯片点样仪点样到琼脂糖修饰的玻片固相载体上，制备成多重复的“捕获单抗探针”微阵列。将农兽药半抗原与卵清白蛋白偶联制备成“半抗原-OVA”偶联体，然后用荧光分子Cy3标记。将待检样品液与“标记检测抗原”按一定浓度混合后，与芯片孵育，样品中的待测抗原和相应“标记检测抗原”与固定在芯片上的相应的“捕获单抗探针”直接竞争性结合，在一定的条件下洗脱。用生物芯片扫描仪检测结果。该方法能同时检测农副产品样品中多种农兽药残留，适用于种植、养殖生产中药物残留高通量、快速、准确检测。
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