公开(公告)号：CN117384860B

公开(公告)日：2024-09-20

申请号：CN202310188666.3

申请日：2023-02-28

Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 ,  中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

Inventor： 陈瑞爱 ,  鑫婷 ,  丁家波 ,  张广智 ,  沈青春 ,  熊挺 ,  刘郁夫 ,  梁琳 ,  杨洁

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/24 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  G01N33/543 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明涉及药及动物病检测技术领域，具体而言，本发明涉及一种用于结核菌素效价标定的单克隆抗体，其与IFN‑γ的结合特异性强，为采用其进行IFN‑γ的测定提供了良好的基础，进而也为结核菌素效价标定提供了良好的基础。相应的，本发明还公开了分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株GIFN‑5G2。本发明还公开了包括该单克隆抗体的药物、试剂盒。

公开(公告)号：CN116444654A

公开(公告)日：2023-07-18

申请号：CN202310268334.6

申请日：2023-03-20

Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 ,  肇庆大华农生物药品有限公司 ,  华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司

Inventor： 陈桂娥 ,  冯夏宁 ,  陈瑞爱 ,  容芳 ,  孙荣航 ,  李作生 ,  刘郁夫

IPC: C07K16/08 ,  C12N15/70 ,  C12N5/20 ,  C07K14/01 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种抗非洲猪瘟病毒p72蛋白单克隆抗体及制备方法和应用。本发明采用重组质粒pET28b‑p72进行表达纯化后得到p72蛋白免疫小鼠，选择血清抗体效价最高的小鼠进行腹腔注射p72蛋白加强免疫，然后取加强免疫后小鼠脾细胞与sp2/0细胞进行融合，筛选出分泌抗p72抗体的阳性杂交瘤细胞，对阳性杂交瘤细胞株进行亚克隆，得到抗非洲猪瘟病毒p72蛋白单克隆抗体细胞株。本发明利用原核表达系统表达ASFV p72蛋白，成功制备了能稳定分泌与ASFVp72蛋白特异性结合的单克隆抗体的细胞株，该抗体纯度高、亲和性和特异性强。

公开(公告)号：CN116121199A

公开(公告)日：2023-05-16

申请号：CN202211679961.0

申请日：2022-12-27

Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 ,  中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

Inventor： 陈瑞爱 ,  蒋卉 ,  丁家波 ,  刘郁夫 ,  沈青春 ,  范学政 ,  熊挺 ,  梁琳

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/12 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明涉及动物病检测技术领域，具体而言，本发明涉及布鲁氏菌单克隆抗体6A5及其应用、试剂盒。首先，本发明公开了一种杂交瘤细胞株以及其分泌得到的布鲁氏菌单克隆抗体6A5。可采用该单克隆抗体代替牛源阳性血清标定RBT与SAT抗原，其制备方便，且特异性更高。同时克服了制备阳性血清难以仅含有IgG类抗体的技术难题，通过高效价IgG 1亚型布鲁氏菌单抗可以在标定RBT与SAT抗原时实现效价统一，提高诊断抗原质量。

公开(公告)号：CN115948471A

公开(公告)日：2023-04-11

申请号：CN202211539660.8

申请日：2022-12-02

Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心

Inventor： 陈瑞爱 ,  李作生 ,  刘郁夫 ,  容芳 ,  郝文茜 ,  冯夏宁

IPC: C12N15/867 ,  C12N15/44 ,  C12N7/00 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于生物工程及疫苗制备技术领域，公开了一种H5亚型禽流感病毒病毒样颗粒的表达制备方法。所述制备方法为：将H5亚型AIV的HA蛋白序列中的血凝素信号肽序列替换成蜂毒素信号肽序列，并设计酶切位点，得到目的基因HA；通过双酶切将目的基因HA和M1蛋白序列分别克隆至杆状病毒穿梭质粒pFastBac1‑dual，再转化至DH5α感受态细胞，得到重组质粒，然后加入到DH10Bac感受态细胞中培养，提取得到重组杆粒Bacmid‑HA‑M1，最后转染至SF9昆虫细胞进行VLPs表达制备。本发明方法表达的病毒样颗粒与天然AIV病毒粒子相类似，并能显著提升目的蛋白在细胞培养上清中的表达量。

公开(公告)号：CN115044612A

公开(公告)日：2022-09-13

申请号：CN202210699860.3

申请日：2022-06-20

Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心

Inventor： 冯夏宁 ,  李作生 ,  陈瑞爱 ,  刘郁夫 ,  容芳 ,  郝文茜 ,  王圳

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/62 ,  C12N15/34 ,  C12N5/10 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/91 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒p72蛋白稳定表达细胞系及其构建方法，在将p72蛋白完成序列改造得到重组蛋白后，分别将其克隆至原核表达载体、真核表达载体，分别进行原核表达、真核表达和；其中，在原核表达的过程中，能得到稳定表达p72重组蛋白的大肠杆菌以及能得到纯化后的p72重组蛋白；经过真核表达后，能得到稳定表达p72重组蛋白的CHO细胞株。利用本发明的构建方法能在2个月内筛选获得表达非洲猪瘟病毒p72蛋白的CHO细胞株，并在没有嘌呤霉素筛选压力下，细胞系传至20代，仍可检测到外源重组蛋白，成功率为90％，具有试验周期短、成功率高和表达成本低的优点。