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公开(公告)号：CN112553246A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011444975.5
申请日：2020-12-08
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种基于CRISPR‑SaCas9系统的高效基因组编辑载体及其应用，属于植物基因工程领域。本发明还提供了将其导入水稻细胞的方法。本发明的高效基因组编辑载体包括第一表达盒和任选的第二表达盒，所述的第一表达盒为sgRNA表达盒，第二表达盒为SaCas9‑NLS融合蛋白表达盒。利用本发明的基因编辑载体，可以在预定的水稻基因组位点，简便而高效地进行基因突变。
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公开(公告)号：CN112538492A
公开(公告)日：2021-03-23
申请号：CN202011474234.1
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种识别PAM序列为NRTH的SpCas9n变体及相应碱基编辑系统。本发明的SpCas9n变体融合ABE的碱基编辑系统入生物体或生物细胞内，使所述SpCas9n变体、sgRNA和ABE的编码基因均得到表达，实现基因组靶点序列的编辑；所述sgRNA靶向所述靶点序列；所述靶点序列的PAM序列为NRTH，N为A、T、C或G；R为A或T；H为A，T或C。本发明利用SpCas9n变体融合ABE的碱基编辑系统在水稻中实现了更多的靶点序列中由A:T到G:C的替换，如PAM序列为NRTH的靶点序列，扩展了ABE介导的碱基替换系统的编辑范围，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN112430613A
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN202011443163.9
申请日：2020-12-08
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种SpG基因及其应用。本发明在OsSpCas9的基础上突变6个氨基酸获得SpG基因。并且本发明提供一种表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用突变的SpG基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切。本发明实现了水稻基因打靶，这是因为经突变后的SpG适用于水稻的基因组剪切。
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公开(公告)号：CN112430612A
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN202011443150.1
申请日：2020-12-08
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种SpRY基因及其应用。本发明在OsSpCas9的基础上突变11个氨基酸获得SpRY基因。并且本发明提供一种表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用突变的SpRY基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切。本发明实现了水稻基因打靶，这是因为经突变后的SpRY适用于水稻的基因组剪切。
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公开(公告)号：CN107389861B
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN201710564832.X
申请日：2017-07-12
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种水稻组织培养特性的快速鉴别方法。本申请的发明人在实验中意外发现水稻组织培养特性与水稻组织对特定浓度的氯酸钾溶液的抗性有直接的正相关性，并据此发现找到了一种能够快速对水稻组织培养特性进行鉴别的方法。本发明的方法使用氯酸钾溶液处理水稻幼苗，观察幼苗的受伤程度，通过特定时间段内的氯酸钾反应等级来定性，氯酸钾反应指数来定量，评价不同水稻材料对氯酸钾的抗性(敏感性)。从而实现高通量、快速简便地鉴别大量水稻材料的组织培养特性。相对于传统方法，本方法不需经过组织培养过程，具有简便高效、周期短、成本低的特点，显著提高不同水稻材料的组织培养特性的鉴别效率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104762303B
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201510164460.2
申请日：2015-04-08
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N5/10 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供一种植物镉诱导表达启动子CdS1及其应用，所述植物镉诱导表达启动子CdS1能够驱动目的基因在镉诱导条件下表达。更具体而言，本发明的启动子包含SEQ ID No:1所示的DNA序列或其同源物、衍生物。在应用中，本发明的启动子可以与具有改善植物的耐镉或抗镉性状的基因结合使用，将本发明的启动子与耐镉或抗镉基因相连接导入植物中，并驱动耐镉或抗镉基因在植物的根、茎、叶或其他部位表达，可以提高植物的耐镉或抗镉性能。比如，如果将本发明的启动子与抑制植物镉吸收的基因相连接，诱导该基因在高镉环境下集中表达，可以减少植物对镉的吸收，进而降低食品中的镉含量。因此，从环境安全和食品安全两个角度来讲，本发明的启动子都具有极高的商业价值。
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公开(公告)号：CN105838718B
公开(公告)日：2019-04-12
申请号：CN201610396789.6
申请日：2016-05-31
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种水稻茎叶强表达启动子SAFES7及其应用。本发明从水稻中发现、分离并鉴定了该启动子的序列。具体而言，本发明通过DNA重组技术，构建由该水稻茎叶强表达启动子SAFES7驱动GUS报告基因的转化载体，通过模式作物的转化实验，鉴定了该启动子的特点是，驱动目的基因在茎、叶、叶鞘等组织中表达，而在根、胚、胚乳细胞中不表达。对这类启动子的研究和应用，不仅有助于阐述相关基因的生物学功能，而且在作物基因工程中使用此类启动子为作物转基因安全性研究提供了材料基础和多种选择。
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公开(公告)号：CN107304421A
公开(公告)日：2017-10-31
申请号：CN201610247623.8
申请日：2016-04-18
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12Q1/68
Abstract: 本发明提供一种新型作物启动子分离方法，所述方法利用作物不同品种在长期的驯化过程中，其启动子上碱基的多态性可能通过改变启动子活性影响基因表达，从而产生性状差异的原理，以作物不同表型的品种为材料，综合转录组和基因组深度测序数据，以生物信息学手段批量分离与表型差异相关的、具有核酸多态性的特异型启动子，再通过连接报告基因的实验进行鉴定，获得一批与关键性状调控相关且具有生理表达强度的新型启动子。本发明对品种资源加以创新利用，拓宽了作物启动子研究的范围，且所分离的启动子与性状差异直接相关，表达强度更可能是生理上需要的强度，同时启动子可在不同作物背景下保持特异性，更适于基因工程的使用。
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公开(公告)号：CN103993039B
公开(公告)日：2017-01-18
申请号：CN201410245505.4
申请日：2014-06-04
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种利用PMI(phosphomannose isomerase，磷酸甘露糖异构酶)筛选标记将外源基因导入闭颖授粉粳稻的方法。具体而言，本发明通过含有pCAMBIA1381-PMI载体的农杆菌菌株EHA105介导，以甘露糖为筛选剂，将外源基因导入到闭颖授粉的粳稻品种8m30中。通过PCR检测鉴定，表明外源基因已导入8m30中。该方法成功实现了闭颖授粉的粳稻品种的遗传转化，且无需使用抗生素或除草剂筛选，在加快性状改良过程同时，避免花粉外传导致的基因漂移，提高了环境友好程度。
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公开(公告)号：CN105755022A
公开(公告)日：2016-07-13
申请号：CN201610249074.8
申请日：2016-04-19
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
CPC classification number: C12N9/1088 , C12N15/8205 , C12N15/8271 , C12Y205/01018
Abstract: 本发明公开了一种水稻耐镉基因OsGSTU5及其编码蛋白与应用。本发明的水稻耐镉基因OsGSTU5包含序列表中SEQ ID NO:1中所示序列或其衍生物。本发明的水稻耐镉基因OsGSTU5编码的蛋白质氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示。水稻耐镉基因OsGSTU5编码表达蛋白质谷胱甘肽S?转移酶(glutathione S?transferase,GSTs)，催化谷胱甘肽(glutathione,GSH)与镉螯合，促进镉的代谢隔离，从而提高植物耐镉能力。此外，本发明通过构建OsGSTU5基因的水稻过表达株系，提高水稻植株对镉胁迫的耐受能力。通过水稻耐镉基因OsGSTU5的生理特性及调控机制研究，为镉胁迫下植物的生理功能及调控机理研究提供了基因资源和理论依据，同时为GSTs蛋白超级家族的功能研究提供基因资源。
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